CentralLaboratoryofBiology实验三 微生物形态特征的观察微生物学实验
课前预习与目的要求【课前预习】1.接种技术及油镜操作技术。2.细菌、霉菌、酵母菌和放线菌的制片技术及形态特征比较。【目的要求】1.进一步熟悉和掌握微生物无菌操作技术。2.了解细菌、霉菌、酵母菌和放线菌的代表种类的形态特征以及制片技术。
基本原理每一种类微生物菌落具有各自相对稳定的特征,这些特征可用于快速识别、鉴定微生物,在科研和生产实践中常被采用。
基本原理细菌:简单染色,在中性、碱性或弱酸性溶液中,细菌细胞通常带负电荷,而碱性染料在电离时,其分子的染色部分带正电荷。染料有:美蓝、结晶紫、碱性复红等。放线菌:菌丝体由基内菌丝、气生菌丝和孢子丝组成,制片时不采取涂片法,以免破坏细胞及菌丝体形态。通常采用插片法或玻璃纸法结合菌丝体简单染色进行观察。
基本原理酵母菌:由于细胞个体大,采取涂片的方法制片有可能损伤细胞,一般通过美蓝染液水浸片法或水—碘液水浸片来观察。霉菌:菌丝体较大,为多细胞、丝状,分为营养菌丝体和气生菌丝体,有特化现象(如假根、子实体等)。可以采取直接制片和透明胶带法观察,也可以采取载玻片培养观察法
实验用品1.菌种黑曲霉(Aspergillussp.),青霉(Penicfilliumsp.),根霉(Rhizopussp.),毛霉(Mucorsp.)2d~5d的马铃薯琼脂平板培养物。2.培养基土豆琼脂或查氏琼脂。3.仪器或其他用品无菌吸管,平皿,载玻片,盖玻片,U型玻棒,解剖针,解剖刀,镊子,50%乙醇,20%的甘油、显微镜以及乳酸石炭酸棉蓝染色液等。
方法步骤制备菌悬液或孢子悬液接种制备单菌落培养观察与描述镜检
用接种环转接菌种划线
吸取菌液涂平板
梯度稀释涂平板技术
实验结果1.填表:描述四大类微生物形态特征。2.绘制霉菌,放线菌,酵母菌的显微形态。
填表:描述四大类微生物形态特征项目细菌放线菌酵母菌霉菌菌落含水状态形态颜色透明度与培养基结合程度细胞显微形态气味其它
注意事项1.接种后,平板应做好记号(班级、姓名、菌种名称和日期),并倒扣培养。2.观察平板菌落时,养成良好习惯,最好不要打开培养皿盖。
实验报告1.设计一个实验,检测实验室空气环境中的微生物类别。
第一次内容:涂平板;观察霉菌,酵母装片;今天完成第二次内容:观察平板菌落形态;观察放线菌,细菌形态。下周实验完成菌液分别有10-1,10-2,10-3,10-4。保证每个浓度都要接种到。菌液用后交给我回收。
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