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动物细胞的培养和核移植技术
授课人: 上课时间: 年 月 日
★本节学习目标:
1.简述动物细胞培养的过程、条件及应用。
2.了解通过动物细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景
3.掌握细胞融合与单克隆抗体的原理和应用
★本节知识点提要:
一、动物细胞工程的概念:
二、动物细胞培养
1.概念:从动物机体中取出相关的组织,将它分散成________,然后,放在适宜的培
养基中,让这些细胞________和________。
2.过程。
传代培养 再分瓶继续培养(2)10 代以内的细胞保持正常的 (3)细
胞传到 10~50 代左右时,增殖会 逐渐 ,以至于完全停止,但少 数细胞的
可能发生改变,克服 细胞寿命的自然极限,获得不死性)
3.条件。
(1)无菌、无毒的环境:对________和所有________进行无菌处理。
(2)营养:合成培养基中要有糖、________、__________、无机盐、________等,通常
需加入________、血浆等。
(3)温度和 pH。
①适宜温度:________±0.5 ℃。 ②适宜 pH:________。
(4)气体环境:主要是________和________,O 2 是________所必需的,CO 2 主要维持
____________。
4.应用。
(1)生产生物制品:如________疫苗、干扰素、____________等。
(2)应用于基因工程:当________是基因工程技术中的受体细胞时,则离不开动物细胞
培养。
(3)检测________,判断某种物质的________。
(4)用于生理、病理、药理等方面的研究,如筛选抗癌药物等。
三、动物体细胞核移植技术和克隆动物
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1.动物核移植:是将动物的一个细胞的________,移入一个去核的________细胞中,
使其重组发育成一个新的胚胎,这个胚胎最终成为动物个体。又分为________细胞核移植(易)
和________细胞核移植(难)。
2.下图所示为体细胞核移植的过程(以多利羊产生为例)。
3.应用前景。
(1)在畜牧生产中:可以加速家畜遗传改良进程,促进____________。
(2)在保护濒危物种方面:可增加这些动物的__________。
(3)在医药卫生方面:转基因克隆动物可以作为__________生产珍贵的医用蛋白。
(4)在治疗人类疾病方面:转基因克隆动物细胞、组织和器官可以作为________________
的供体。
(5) 人 的 核 移 植 胚 胎 干 细 胞 经 诱 导 分 化 , 形 成 相 应 组 织 、 器 官 后 , 可 以 用 于
__________________________________。
(6)研究胚胎发育及衰老过程,追踪研究疾病的发展过程和治疗疾病。
4.存在问题。
(1)________低。
(2)绝大多数克隆动物还存在________。
(3)克隆动物食品的________存在争议。
自我检测
一、选择题
1.为了使用于培养的动物组织细胞分散开以便配制成一定浓度的细胞悬浮液,选取来
的动物组织应先用下列哪种物质处理( )
A.胃蛋白酶 B.胰蛋白酶
C.盐酸 D.胰脂肪酶
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2.动物细胞培养过程的顺序是( )
①原代培养 ②传代培养 ③胰蛋白酶处理组织,形成分散的悬浮液
A.①②③ B.①③②
C.②③① D.③①②
3.从母羊甲的体细胞中取出细胞核,移植入母羊乙的去核卵细胞中,融合后的细胞经
卵裂形成早期胚胎,再植入到另一只母羊丙的子宫内,下列有关说法正确的是( )
A.生出小羊的性状与甲羊完全相同
B.一般来说生出小羊的核基因型与甲羊完全相同
C.生出小羊的遗传物质由甲、乙两双亲共同决定,所以该过程为有性生殖
D.生出小羊的性状由甲、乙、丙三个亲本的基因型与环境共同决定
4.下列关于体细胞克隆的叙述中,错误的是( )
A.供体为体细胞的细胞核
B.受体为去核卵母细胞的细胞质
C.细胞核移植是体细胞克隆的关键步骤
D.克隆出的后代与供体的遗传物质和表现型完全一致
5.关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述,错误的是( )
A.动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同
B.动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶
C.烟草叶片离体培养能产生新个体,小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖
D.动物细胞培养可用于检测有毒物质,茎尖培养可用于植物脱除病毒
6.动物细胞工程技术的基础是( )
A.动物细胞融合
B.单克隆抗体
C.胚胎移植
D.动物细胞培养
7.一般来说,动物细胞体外培养需要满足以下条件( )
①无毒的环境 ②无菌的环境 ③合成培养基需加血浆 ④温度与动物体温相近 ⑤
需要 O2,不需要 CO2 ⑥需要 CO2
A.①②③④⑤⑥ B.①②③④
C.①③④⑤⑥ D.①②③④⑥
8.下列关于动物细胞培养的叙述中错误的是( )
A.动物细胞培养是动物细胞工程的基础技术
B.用于培养的细胞最好取自健康动物体内的组织细胞
C.将所取的组织先用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行处理,使其分散成单个细胞,再稀释
制成细胞悬液培养
D.传代培养的细胞在传至 10~50 代左右时,增殖会逐渐减慢,以至于完全停止,所培
育的细胞全部衰老死亡
9.动物细胞体外培养时,需要在培养基中补充一定浓度的某些物质,下图是血清对正
常细胞和癌细胞培养影响的实验结果。从该图提供的信息可以获得的不正确结论是( )
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血清对正常细胞和癌细胞培养的影响
A.正常细胞与癌细胞的增殖速率相同
B.有无血清对正常细胞培养的影响不同
C.培养基中补充血清有助于正常细胞的培养
D.培养基中是否补充血清对癌细胞的培养影响不大
10.在动物细胞培养过程中,下列处理不恰当的是( )
A.培养液和培养用具要进行无菌处理
B.提供种类齐全的营养物质
C.提供纯氧以保证细胞的呼吸作用
D.保证提供适宜的温度和 pH
二、非选择题
11.某研究小组进行药物实验时,以动物肝细胞为材料,测定药物对体外培养细胞的毒
性。供培养的细胞有甲、乙两种,甲细胞为肝肿瘤细胞,乙细胞为正常肝细胞。
请回答下列有关动物细胞培养的问题。
(1)将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养,培养液及其他培养条件均相
同。一段时间后,观察到甲细胞数量比乙细胞数量__________。
(2) 在 动 物 细 胞 培 养 时 , 通 常 在 合 成 培 养 基 中 加 入 适 量 血 清 , 其 原 因 是
________________________________________________________________________。
细胞培养应在含 5%CO2 的恒温培养箱中进行,CO2 的作用是__________。
(3)在两种细胞生长过程中,当乙细胞铺满瓶壁时,其生长__________。药物实验需要
大量细胞,两种细胞频繁传代,甲细胞比乙细胞可以传代的次数更__________。若用动物的
肝脏组织块制备肝细胞悬液,需用__________处理。
(4) 为 了 防 止 细 胞 培 养 过 程 中 细 菌 的 污 染 , 可 向 培 养 液 中 加 入 适 量 的
________________________________________________________________________。
(5)已知癌基因 X 过量表达与肝肿瘤的发生密切相关,要试验一种抗肿瘤药物 Y 对甲细
胞生长的影响,可将甲细胞分为 A、B 两组,A 组细胞培养液中加入__________,B 组细胞培
养液中加入等量无菌生理盐水,经培养后,从 A、B 两组收集等量细胞,通过分别检测 X 基
因在 A、B 两组细胞中的__________或__________合成水平的差异,确定 Y 的药效。