承德一中高二直播课堂检测生物试题
一 选择题 （共 35 题，每题 2 分，共 70 分）
1.从土壤中筛选纤维素分解菌的实验设计正确的是( )
A.土壤取样→梯度稀释→稀释涂布平板→发酵培养
B.土壤取样→选择培养→稀释涂布平板→挑选菌落
C.土壤取样→梯度稀释→选择培养→挑选菌落
D.土壤取样→梯度稀释→稀释涂布平板→选择培养→挑选菌落
2.下列有关纤维素分解菌分离实验的说法正确的是( )
A.刚果红能与纤维素分解后的纤维二糖和葡萄糖形成红色复合物
B.在用刚果红染色时只可以先培养微生物再加入刚果红，不可以在倒
平板时直接加入
C.该实验只需用到选择培养基，不需用到鉴别培养基
D.在用刚果红染色过程中，若将微生物培养在事先加入刚果红的培养
基上，则出现透明圈的菌落不一定为所需菌种
3.在纤维素分解菌的鉴定实验中，纤维素酶的测定方法一般是( )
A.对纤维素进行定量测定
B.对纤维素酶分解纤维素后所产生的纤维二糖进行定量测定
C.对纤维素酶分解纤维素后所产生的葡萄糖进行定量测定
D.对纤维素分解菌进行定量测定
4.在各种培养基中细菌的生长情况如表所示，S、C、M 为简单培养基，U、V、X、Y、Z 代表加入培养基的不同物质，细菌不能合成的物质是( )
培养基 生长状态
S、C、M －
S、C、M＋V＋Z －
S、C、M＋U＋Y ＋
S、C、M＋Z＋X －
S、C、M＋V＋Y ＋
S、C、M＋U＋X －
S、C、M＋Y＋Z ＋
注：表中“＋”表示能生长，“－”表示不能生长。
A.Y B.V C.U D.Z
5 筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基。接种培养后，若
细菌能分解淀粉，培养平板经稀碘液处理，会出现以菌落为中心的透
明圈（如图），实验结果见下表。
菌种 菌落直径：C（mm）
透 明 圈 直 径 ： H
（mm）
H/C
细菌Ⅰ 5.1 11.2 2.2
细菌Ⅱ 8.1 13.0 1.6
有关本实验的叙述，错误的是（ ）
A. 培养基除淀粉外还含有氮源等其他营养物质B. 筛选分解淀粉的细菌时，菌液应稀释后涂布
C. 以上两种细菌均能将淀粉酶分泌至细胞外
D.细菌Ⅱ分解淀粉能力比细菌Ⅰ强
6 现有酵母菌和细菌的混合菌种，欲单独分离出酵母菌和硝化细菌，应
选用的培养基分别为（ ）
A. 伊红美蓝培养基、含青霉素培养基
B. 含青霉素培养基、含氨的无机培养基
C. 含氨的无机培养基、含青霉素培养基
D. 含青霉素培养基、伊红美蓝培养基
7 用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时，二者的共同点是 ( )
①可以用相同的培养基②都需要使用接种针进行接种③都需要在火焰
旁进行接种④都可以用来计数活菌
A. ①② B. ③④ C. ①③ D. ②④
8 分离土壤中尿素分解菌的实验操作中，无法分离得到尿素分解菌的原
因最可能是
A. 制备浸出液的土壤取自土壤的表层
B. 涂布前涂布器未在酒精灯外焰上灼烧灭菌
C. 牛肉膏蛋白胨培养基中添加尿素作为氮源
D. 接种操作者的双手未用酒精棉进行消毒
9 培养基、培养皿、接种环、实验者的双手、空气所采用的灭菌、消毒
方法依次是（）①化学消毒②灼烧灭菌③干热灭菌④紫外线灭菌⑤高压蒸汽灭菌⑥巴
氏消毒法
A. ③④②①⑥ B. ①②③④⑤ C. ⑥②③④① D. ⑤③②①④
10 某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员
从土壤中筛选获得了只能利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如下
图所示，①为土壤样品。下列相关叙述错误的是（）
A. 图中②培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为碳源
B. 如果要测定②中活细菌数量，常采用稀释涂布平板法
C. 若图中④为对照实验，则其中应含除苯酚外的其他碳源
D. ⑥上菌落分布均匀，是用平板划线法获得的单菌落
11 下列是关于“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验操作的叙
述，其中错误的是( )
A. 利用稀释涂布平板法准确估计菌落数目的关键是恰当的稀释度
B. 若要判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置未接种的牛肉膏
蛋白胨培养基作为对照
C. 在土壤中分解尿素的细菌的分离和计数实验中，应采用稀释涂布平
板法
D. 以尿素为唯一氮源且添加了酸碱
缓冲剂的培养基来培养该细菌后不会使酚红指示变红
12 下表所示为某微生物培养基的配方，有关叙述错误的是（）
A. 依物理性质划分，该培养基属于固体培养基；依用途划分，该培养
基属于选择培养基
B. 由培养基的原料可知，所培养微生物的同化作用类型是异养型，培
养的微生物可以是酵母菌或毛霉
C. 本培养基中青霉素的添加满足了微生物生长对特殊营养物质的要求
D. 若用该培养基分离能分解尿素的细菌，应除去青霉素和 NaNO3，并
应加入尿素
13 下图中甲是稀释涂布平板法中的部分操作，乙是平板划线法的操作
结果。下列叙述中错误的是
A. 甲中涂布前要将涂布器灼烧，冷却后才能涂菌液
B. 甲、乙操作中只有甲可以用于微生物的计数
C. 乙中接种环需要灼烧 5 次
D. 乙中的连续划线的起点是上一次划线的末端
14 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程中，关于倒平板的描述正确的
是（）
①等培养基冷却至 40℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板②将灭过菌的培养皿放在桌面上，左手拔出棉塞③右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通
过火焰④用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙⑤右手将锥形瓶
中培养基倒入培养皿，左手立即盖上皿盖⑥等待平板冷却 5～10 s，将
平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上
A. ③④⑤ B. ②③④⑤ C. ②③④⑤⑥ D. ①②③④⑤⑥
15 培养自养生物和培养异养生物在培养过程中的主要区别是（ ）
A. 培养过程是否需要氧气 B. 培养基中碳源不同
C. 培养基中氮源不同 D. 培养基中无机盐不同
16 可以作为硝化细菌碳源、氮源及能量来源的物质依次是（ ）
A. 含碳有机物、氨、光 B. 含碳无机物、氮、氮
C. 含碳有机物、氨、氨 D. 含碳无机物、氨、氨
17 下表是某微生物培养基的配方。下列说法正确的是：
编
号
① ② ③ ④ ⑤
成
分
(NH4)2SO4 KH2PO4 FeSO4
CaCl
2
H2O
含
量
0.4g 4.0g 0.5g 0.5g 100mL
A. 从培养基的营养成分看，此培养基可用来培养的微生物同化作用
类型是异养型
B. 若要观察微生物的菌落的特点，培养基中还应添加的成分是葡萄糖
C. 该培养基不需要高温灭菌和调节 pH 值
D. 培养基是人们按照微生物对营养物质的需求，配制出供其生长繁
殖的营养基质
18 如图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤，下列说
法正确的是（ ）
A. 制备①步骤使用的培养基过程是先灭菌再调 PH
B. ②③④步骤操作时只需要在接种前和划线结束后灼烧灭菌
C. 操作③到④的过程中，接种环共灼烧处理了 5 次
D. 接种结束后，将④倒置培养，皿底上标注菌种及接种日期等信息
19 下列有关微生物实验的叙述，不正确的是
A. 获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染
B. 平板划线法可用于微生物的计数
C. 分离不同的微生物要采用不同的稀释度
D. 观察菌落的特征可以用来进行菌种的鉴定
20 下图为分离和纯化分解甲醛细菌的实验过程，其中 LB 培养基能使
菌种成倍扩增。相关叙述正确的是（）A. 需要对活性污泥作灭菌处理
B. ②中 LB 培养基应以甲醛为唯一碳源
C. ④中出现的菌落是同一种微生物
D. 经⑤处理后，应选择瓶中甲醛浓度最低的一组进一步纯化培养
21 为了保持菌种的纯净需要进行菌种的保藏，下列有关叙述不正确的
是( )
A. 对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法，放入－4℃的
冰箱保藏
B. 临时保藏的菌种一般是接种到试管的固体斜面培养基上
C. 临时保藏的菌种容易被污染或产生变异
D. 对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法
22 用稀释涂布平板法测定微生物数量时，统计到的菌落数与实际活菌
数的关系是：
A. 菌落数大于或等于实际活菌数 B. 菌落数小于或等于实际活菌
数
C. 菌落数大于或小于实际活菌数 D. 菌落数等于实际活菌数
23 下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是A. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4．7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水
B. KH2PO4、Na2HPO4、 MgSO4．7H2O、葡萄糖、琼脂、水
C. KH2PO4、Na2HPO4、 MgSO4．7H2O、尿素、琼脂、水
D. KH2PO4、Na2HPO4、 MgSO4．7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、
水
24 高温灭菌的原理是
A. 每种微生物生长的最适温度是一定的
B. 每种微生物对高温环境都不适应
C. 高温破坏了细胞内的蛋白质、核酸，影响其生命活动
D. 高温降低了环境中氧的浓度
25 下列有关平板划线操作的叙述，错误的是（ ）
A. 在第二次划线时，接种环上的菌种直接来源于菌液
B. 每次划线前，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残
留的菌种
C. 第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染
培养物
D. 划线结束后，灼烧接种环能及时杀死接种环上的菌种，避免细菌
污染环境和感染操作者
26 巴氏消毒法的优点是：
A. 可用于对需要保持干燥的物品消毒
B. 可用于对不耐高温的食物进行消毒
C. 杀菌彻底，能够杀死芽孢和孢子D. 耗时很短，5～6 分钟即可完成
27 已知某种细菌以 CO2 为唯一碳源，下列相关叙述正确的是
A. 可推测该细菌的代谢类型为自养型
B. 在该细菌的培养基中可不必添加无机盐
C. 培养过程中碳源同时充当该细菌的能源物质
D. 培养该细菌的培养基中无需添加氮源
28 下列关于分离培养某种微生物的实验叙述正确的是（）
A. 倒平板时为防止培养基溅到皿盖上,应打开培养皿盖放到一边
B. 接种时为防止杂菌污染,接种前将涂布器在酒精中浸泡灭菌
C. 若菌液浓度过高无法得到单菌落,则需要稀释后再进行涂布
D. 接种后,将涂布器灼烧灭菌后,立即放入盛有酒精的烧杯中
29 下列关于培养基的叙述，错误的是( )
A. 氮源、无机盐、水等是微生物生长不可缺少的营养要素
B. 根据微生物对碳源需要的差别，使用不同碳源的培养基
C. 可在培养基中加入磷酸氢二钾或磷酸二氢钾，用于维持 pH 的相
对稳定
D. 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、
倒平板、灭菌
30 下列关于微生物培养基种类划分的叙述，错误的是：
A. 培养基按其物理性质可以分为液体培养基和固体培养基
B. 培养基按其化学成分可以分为天然培养基和合成培养基C. 培养基按其功能用途可以分为鉴别培养基和选择培养基
D. 培养基按其营养构成可以分为含水培养基和无水培养基
31 某果酒厂的果酒滞销，计划将生产的部分果酒“转变”为果醋。研
究人员设计了如图所示的装置，下列有关说法正确的是( )
A．甲瓶盛放的是果酒，乙瓶为发酵瓶，丙瓶盛放的是果醋
B．乙瓶中需要加入的微生物进行有氧呼吸的场所是细胞质基质和
线粒体
C．若不向乙瓶通入空气，微生物发酵产生醋酸的速率比较低
D．向三个瓶中的样液滴加重铬酸钾溶液就会出现灰绿色
32.关于果醋制作过程中的叙述正确的是( )
A．打开发酵瓶是因为全过程需要通入氧气，排出二氧化碳
B．醋酸菌在糖源和氧气充足时，能将葡萄糖分解成乙醇和二氧化碳
C．当糖源不足时，醋酸菌可将酒精最终转变成醋酸
D．要使果酒变成果醋只需通入氧气，加入醋酸菌就可以了
33.腐乳制作过程中，前期发酵后要将毛坯加盐腌制，盐的作用是( )
①抑制毛霉生长，防止杂菌污染和繁殖
②析出豆腐中的水分，使毛坯变硬，不易过早酥烂
③调节口味，使腐乳有一定咸味
④浸提毛霉菌丝上的蛋白酶，催化蛋白质水解
A.①③④ B.①②③④ C.②④ D.①②③
34.下列关于毛霉的叙述，错误的是( )
A.毛霉是一类具有细胞壁但没有成形细胞核的生物
B.毛霉属于腐生异养型微生物，在生态系统中属于分解者C.毛霉的变异来源只有基因突变和染色体变异两种
D.毛霉的生殖方式是孢子生殖
35 下列关于乳酸菌的说法错误的是( )
A.乳酸菌的遗传物质是 DNA
B.乳酸菌无氧呼吸产生乳酸和 CO2
C.乳酸菌与醋酸菌的细胞结构相似
D.在泡菜制作过程中，起主要作用的是乳酸菌
二填空题（除特殊标注外，每空 1 分，共 30 分）
36.植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题：
（1）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由 3 种组分
组成的复合酶，其中可将纤维素分解为纤维二糖的是 ；
可将纤维二糖分解成葡萄糖的是 。
（2）在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）时，CR 可与纤维素形
成________色复合物。用含有 CR 的该种培养基培养纤维素分解菌时，
培养基上会出现以该菌的菌落为中心的________。
（3）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同
学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表）：
酵母膏 无机盐 淀粉 纤维素粉 琼脂 CR 溶液 水
培养基甲 ＋ ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋
培养基乙 ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ ＋
注：“＋”表示有，“一”表示无。
据表判断，培养基甲________（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是 ；培养基乙________（填
“ 能 ” 或 “ 不 能 ”）用 于 分 离 和 鉴 别 纤 维 素 分 解 菌 ， 原 因
是 。
37..某化工厂的污水池中，含有一种有害的、难于降解的有机化合物
A。研究人员用化合物 A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，
成功地筛选到能高效降解化合物 A 的细菌(目的菌)实验的主要步骤如
下图所示。请分析回答问题。
(1)接种前需要对培养基及培养皿等进行灭菌，常用的灭菌方法是
____________。培养基灭菌后，将 1mL 水样稀释 1000 倍，在 3 个平
板上用涂布法分别接入 0.1mL 稀释液；经适当培养后，3 个平板上的
菌落数分别为 51、50 和 49。据此可得出每升水样中的活菌数为
_________ （2 分）。
(2)实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是____________。
(3)培养若干天后，应选择培养瓶中化合物 A 含量________的培养液，
接入新的培养液中连续培养，使“目的菌”的数量________。
(4) 转 为 固 体 培 养 时 ， 为 获 得 单 菌 落 进 行 继 续 筛 选 ， 常 采 用
或____________法，接种后，应将培养皿________(填“正放”或“倒置”)
(5)实验结束时，使用过的培养基应该进行________处理后，才能倒掉。
(6)微生物的鉴定：为检测尿素分解菌的存在与否，在以尿素为唯一氮
源的____________(填“选择”或“鉴别”)培养基中加入_____________
指示剂，如果存在尿素分解菌，则指示剂将变___________色。
38.发酵食品加工中离不开微生物。例如，果酒和果醋的制作离不开酵
母菌和醋酸菌，腐乳的制作离不开毛霉等微生物。
(1)腐乳是通过微生物发酵制成的佐餐食品，其制作流程如下，请回答
有关问题：
豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制
①制作腐乳的原料中哪种有机物的含量比较高？________。毛霉可利
用体内的酶将该成分分解成哪些小分子有机物？________________。
②在用盐腌制腐乳的过程中，若盐的浓度过低会出现什么现象？
_____________。
③ 卤 汤 中 酒 的 含 量 为 什 么 要 控 制 在 12% 左 右 ？
___________________________。
(2)下图是利用酵母菌和醋酸菌制作果酒和果醋的装置示意图，请回答
相关问题：
① 酵 母 菌 和 醋 酸 菌 在 结 构 上 的 主 要 区 别 是 酵 母 菌
________________________。
② 葡 萄 汁 装 入 发 酵 瓶 之 前 要 将 发 酵 瓶 清 洗 干 净 ， 用____________________消毒。
③制作________时应将开关 2 打开，长而弯曲的胶管 1 在发酵过程中
的作用是______________________。
(3)用鲜牛奶发酵制作酸牛奶时，起作用的微生物是________。选择题答案：
1.B 2.D 3.C 4.A 5.D
6【答案】B
A.伊红美蓝培养基是专一鉴别大肠杆菌的培养基，硝化细菌对青霉素
敏感，含青霉素培养基不能筛选硝化细菌，A 错误；
B.硝化细菌对含青霉素培养基敏感，酵母菌则不敏感，可以筛选酵母
菌，硝化细菌可以将环境中的氨氧化为硝酸根而利用其释放的能量合
成有机物，故含氨的无机培养基可以筛选硝化细菌，B 正确；
C.酵母菌是异养生物，不能用含氨的无机培养基筛选，硝化细菌对青
霉素敏感，含青霉素培养基不能筛选硝化细菌，C 错误；
D.硝化细菌对含青霉素的培养基敏感，酵母菌则不敏感，可以筛选酵
母菌，伊红美蓝培养基是专一鉴别大肠杆菌的培养基，D 错误。
7【答案】C
8.【答案】C
B. 从土壤中分离微生物的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀
释、涂布培养和筛选菌株。回顾和梳理分离土壤中分解尿素菌的实验
操作的相关知识，认真分析各个选项即可正确作答。
A.制备浸出液的土壤取自土壤的表层与纯化的尿素分解菌的单菌落有
关但影响不大，A 错误；
B.涂布器未在酒精灯外焰上灼烧灭菌可能会造成污染，与纯化的尿素
分解菌的单菌落有关但影响不大，B 错误；
C.该培养基必须以尿素为唯一的氮源，不能使用牛肉膏蛋白胨培养基
或在其中添加尿素作为氮源，该操作对实验影响最大，C 正确；
D.接种操作者的双手未用酒精棉进行消毒，可能会造成污染，但与纯
化的尿素分解菌的单菌落有关但影响不大，D 错误。9【答案】D
培养基用⑤高压蒸汽灭菌；培养皿能耐高温，需用③干热灭菌；接种
环可用②灼烧灭菌达到迅速彻底的灭菌效果；实验操作者的双手可用
①化学药剂进行消毒，如用酒精擦拭双手；空气可用④紫外线灭菌；
牛奶为不破坏其营养成分可采用⑥巴氏消毒法。综上所述，ABC 错误，
D 正确。
10.【答案】D
【解析】解：A、要筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，图中②
培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为唯一碳源，A 正确；
B、如果要测定②中的活细菌数量，常采用稀释涂布平板法，B 正确；
C、若图中④为对照实验，则其中应含除苯酚外的其他碳源，C 正确；
D、⑥上菌落分布均匀，是用稀释涂布平板法获得的单菌落，D 错误。
故选：D。
11【答案】B
12.【答案】C
A.依物理性质划分，该培养基属于固体培养基（含有琼脂）；依用途
划分，该培养基属于选择培养基（有青霉素），A 正确；
B.由培养基的原料有葡萄糖可知，所培养微生物的同化作用类型是异
养型，培养的微生物可以是酵母菌或毛霉，B 正确；
C.本培养基中青霉素的添加起选择作用，细菌不能在其上繁殖，C 错误；
D.若用该培养基分离能分解尿素的细菌，应除去青霉素和 NaNO3，并
应加入尿素作为唯一氮源，D 正确。
13.【答案】C
14【答案】A
①等培养基冷却至 50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，①错误；②将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，②错误；
③右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰，③正确；
④用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，不能打
开皿盖，④正确；
⑤右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上皿盖，⑤正确；
⑥待平板冷却凝固约 5～10min 后，将平板倒过来放置，使皿盖在下，
皿底在上，⑥错误。
综上分析③④⑤正确，A 符合题意，BCD 不符合题意。
故选 A。
15. 【答案】B
【解析】解：自养生物和异养生物的主要区别生物是否把无机物转变
成自身需要的有机物即可，是则为自养型，反之为异养型。
故选：B。
自养生物：是指在同化作用过程中，能够直接把从外界环境摄取的无
机物转变成为自身的组成物质即有机物，并储存了能量的一种新陈代
谢生物类型。如绿色植物，蓝藻，硝化细菌等。
异养生物：是相对于自养生物来说的，即生物体在同化作用过程中，
只能从外界摄取现成的有机物作为自身的组成物质和能量来源的生物。
如动物，大部分的细菌，真菌。
本题考查微生物代谢类型知识点，解决问题的重点在于理解自养生物
和异养生物的主要区别，应强化理解。
16.【答案】D
【解析】解：硝化细菌是自养生物，所以碳源来自含碳无机物；硝化
细菌能将氨氧化为亚硝酸盐或硝酸盐，并释放能量，所以硝化细菌的
氮源来自氨，能量也来自氨的氧化。 故选：D
硝化细菌属于化能合成作用微生物，能够直接利用环境中的氨氧化释
放的能量将二氧化碳合成有机物。
本题主要考查硝化细菌和营养成分和能量来源，意在强化学生对相关
微生物的认识。
17.【答案】D
A.从培养基的营养成分看（不含有机物），此培养基可用来培养的微
生物同化作用类型是自养型，A 错误；
B.微生物的菌落需要在固体培养基的表面生长，因此若要观察微生物
的菌落的特点，培养基中需要添加凝固剂(琼脂)，使液体培养基凝固成
固体培养基，B 错误；
C.培养基要高温灭菌和调节 pH 值，C 错误；
D.培养基是人们按照微生物对营养物质的需求，配制出供其生长繁殖
的营养基质，D 正确。
18.【答案】D
【解析】解：A、①步骤表示倒平板，倒平板的培养基需要先调节 pH
后灭菌，A 错误；
B、除了在接种前和划线结束后灼烧灭菌，在每次划线之间也需要灼烧
灭菌，B 错误；
C、接种环在每次接种前和接种结束后都要通过灼烧来灭菌，所以完成
步骤④中 5 次划线操作前都要灼烧灭菌，接种结束后还需灼烧灭菌 1
次，防止造成污染，由此可见，完成步骤④共需灼烧接种环 6 次，C
错误；
D、接种结束后，将④倒置培养，皿底上标注菌种及接种日期等信息，D 正确。
故选：D。
由图可知，①是倒平板，②是用接种环沾取菌液，③是进行平板划线，④
是培养。
制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的基本过程为计算、称量、溶化、调
pH、灭菌、倒平板五个步骤。
本题考查微生物的培养和纯化，要求考生识记培养基制备的基本过程，
掌握平板划线法的过程，明确每次划线之前和之后均需要灼烧灭菌，
再结合所学知识准确判断各项。
19.【答案】B
A.微生物培养获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染，A 正确；
B.稀释涂布平板法可用于微生物的计数，B 错误；
C.分离微生物时涂布接种需要对培养液进行梯度稀释，分离不同的微
生物要采用不同的稀释度，C 正确；
D.不同的微生物具有不同的菌落特征，观察菌落的特征可以用来进行
菌种的鉴定，D 正确。
故选 B。
20.【答案】D
A.不需要对活性污泥作灭菌处理，故 A 错误；
B.LB 培养基不以甲醛为碳源，故 B 错误；
C.④中出现的菌落是分解甲醛的细菌，不一定是同一种微生物，故 C
错误；
D.经⑤处理后，应选择瓶中甲醛浓度最低的一组进一步纯化培养，故 D
正确。
故选 D。21.【答案】A
A.对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法，放在4℃的冰箱中
保藏，A 错误；
B.临时保藏的菌种一般就是接种到试管的固体斜面培养基上保存，B 正
确；
C.临时保藏的菌种容易被污染或产生变异，所以每 3-6 个月要重新将
菌种从旧的培养基上转移到新培养基上培养，C 正确；
D.对于需要长期保存的菌种，用甘油管藏的方法，放在低温-20℃的冷
冻箱中保存，D 正确。
22.【答案】B
23.【答案】A
所用选择培养基的基本要求是满足分解尿素的细菌的生长条件，抑制
或阻止其他微生物的生长，且尿素是唯一的氮源，葡萄糖可以作为碳
源，因此 A 正确；B 选项缺少尿素，错误；C 选项缺少葡萄糖作为碳
源，错误；D 选项中缺少尿素，且牛肉膏、蛋白胨也可提供氮源，错
误。综上，A 正确，B、C、D 均错。
24.【答案】C
灭菌是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和
孢子。 高温破坏了细胞内的蛋白质、核酸，影响其生命活动，致使微
生物死亡；综上所述，C 正确；ABD 错误。
故选 C。
25【答案】A
【解析】解：A、在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来源于上
一次划线的末端，A 错误；
B、每次划线结束，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，B 正确；
C、接种前先要用火焰灼烧接种环，目的是避免接种环上可能存在的微
生物污染培养物，A 正确；
D、划线结束后，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残
留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者，D 正确。
故选：A。
平板划线法是指通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，
将聚集的菌种，逐步稀释分散到培养基的表面，最后得到由单个细菌
繁殖而来的菌落。
平板划线法是实验室常用的接种方法，注意的细节较多，但关键只有
一个就是防止杂菌污染，考生需要紧紧围绕这个关键作答。
26.【答案】B
27.【答案】A
【解答】
A.某种细菌以 CO2 为唯一碳源，可推测该细菌的代谢类型为自养型，A
正确；
B.微生物一般需要水、碳源、氮源和无机盐等营养物质，B 错误；
C.CO2 不能为微生物提供能量，C 错误；
D.氮源是微生物必需的营养物质，培养该细菌的培养基中需添加氮源，
D 错误。
故选 A。
28.【答案】C
【解答】
A.倒平板时，不能将打开的培养皿盖放到一边，以免微生物污染，A
错误；B.接种时为防止杂菌污染，接种前将涂布器灼烧灭菌，B 错误；
C.若菌液浓度过高无法得到单菌落，则需要稀释后再进行涂布，C 正确；
D.将涂布器灼烧灭菌后，待冷却后再放入盛有酒精的烧杯中，D 错误。
29.【答案】D
A.氮源、无机盐、水等是微生物生长不可缺少的营养要素，A 正确；
B.根据微生物对碳源需要的差别，使用不同碳源的培养基，B 正确；
C.可在培养基中加入磷酸氢二钾或磷酸二氢钾，用于维持 pH 的相对稳
定，C 正确；
D.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、灭
菌、倒平板，D 错误。
30.【答案】D
31【答案】A【解析】甲瓶是密封的，是缺氧环境，应是果酒发酵。丙
装置通入无菌空气，是果醋发酵。乙瓶为发酵瓶，A 正确。乙瓶中需要
加入的微生物为醋酸菌，是原核生物，无线粒体，B 错误。微生物发酵
产生醋酸需要有氧环境，C 错误。只有甲瓶中会进行无氧呼吸产生酒精，
滴加重铬酸钾溶液会出现灰绿色。D 错误。
32【答案】C
【解析】果醋制作时并不需要打开发酵瓶，在装置上连有排气口和充
气口；当氧气和糖源充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸和二
氧化碳；当糖源不足时，醋酸菌可将乙醇变为乙醛，最终变成醋酸；
果酒变果醋时菌种不同，温度也有差异。
33B
34A解析 毛霉是一类真菌，属于真核生物，具有成形的细胞核；毛霉营
腐生生活，代谢类型为异养需氧型，在生态系统中属于分解者；毛霉
进行无性生殖，因此其变异来源只有基因突变和染色体变异两种；毛
霉的生殖方式为孢子生殖。
35 B
二填空题
1【答案】
（1）C1 酶和 Cx 酶， 葡萄糖苷酶
（2）红色 透明圈
（3） 不能 液体培养基不能用于分离单菌落
不能 培养基中没有纤维素，不能形成 CR-纤维素红色复合物，
即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌。
2【答案】(1)高压蒸汽灭菌法 5.0×108（此空 2 分） (2)异养需氧型
(3) 减少 增加
(4) 平板划线法 稀释涂布平板(可互换） 倒置
(5) 灭菌
(6) 选择 酚红 红
3【答案】
(1)①蛋白质 小分子肽和氨基酸
②不足以抑制杂菌的生长，导致豆腐腐败
③酒精含量过低，不足以抑制杂菌生长；含量过高，腐乳成熟的时间
将延长
(2)①有以核膜为界限的细胞核②体积分数为 70%的酒精
③果醋 防止空气中杂菌的污染
(3)乳酸菌
【解析】酵母菌是真菌，属于真核生物，有真正的细胞核；醋酸菌是
原核生物，无细胞核。葡萄汁装入发酵瓶之前要将发酵瓶清洗干净，
用体积分数为 70%的酒精消毒。制作果醋时应将开关 2 打开通入空气，
因为醋酸菌是好氧菌，长而弯曲的胶管 1 可防止空气中杂菌的污染。
制作酸牛奶时，起作用的微生物是乳酸菌。
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