容山中学 2019-2020 学年第二学期期中考试高二年级
生物试卷
2020.4.19 7:30-9:00 考试时间：90 分钟 满分 100 分
一、单选题（每题 2.5 分，共 50 分）
1．下列关于发酵流程相关说法，错误的是
A．腐乳的制作中，前期应该表面长出菌丝，后期没有杂菌污染
B．菌种、杂菌、温度、发酵时间、调味品都会影响腐乳的色、香、味
C．果酒制作过程中，开始可以通入氧气，后期严格无氧环境
D．醋酸菌在有氧条件下会把乙醇直接氧化为乙酸
2．豆豉是大豆经过发酵制成的一种食品。为了研究影响豆豉发酵效果的因素，某小组将等量
的甲、乙两菌种分别接入等量的 A、B 两桶煮熟大豆中并混匀，再将两者置于适宜条件下进行
发酵，并定期取样观测发酵效果。以下推测不合理的是（ ）
A．该实验的自变量是菌种，温度属于无关变量
B．大豆发酵过程中部分蛋白质转变为多肽，形成豆豉的独特风味
C．若容器内上层大豆发酵效果优于底层，则发酵菌为厌氧菌
D．从大豆到豆豉，大豆中的蛋白质转变为小分子肽、氨基酸
3．关于泡菜发酵的叙述，不正确的是（ ）
A．泡菜发酵过程中产生亚硝酸盐，某些条件下转化为致癌物质亚硝胺
B．煮沸泡菜盐水的目的是除去水中的氧气和杀灭盐水中的其他杂菌
C．制作泡菜利用的菌种是乳酸菌，其代谢类型为异养厌氧型
D．泡菜腌制时间过长，容易造成细菌大量滋生，亚硝酸盐含量增加
4．防止杂菌入侵，获得纯净的培养物，是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是( )
A．实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒
B．接种环、接种针等金属用具，直接在酒精灯火焰的内焰部位灼烧灭菌
C．在实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，防止被微生物感染
D．使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境
5．下列关于培养基的叙述，错误的是( )
A．氮源、无机盐、水等是微生物生长不可缺少的营养要素B．根据微生物对碳源需要的差别，使用不同碳源的培养基
C．可在培养基中加入磷酸氢二钾或磷酸二氢钾，用于维持 pH 的相对稳定
D．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌
6．下表是某微生物培养基的配方。下列说法正确的是：（ ）
编号 ① ② ③ ④ ⑤
成分 (NH4)2SO4 KH2PO4 FeSO4 CaCl2 H2O
含量 0．4g 4．0g 0．5g 0．5g 100mL
A．从培养基的营养成分看，此培养基可用来培养的微生物同化作用类型是异养型
B．若要观察微生物的菌落的特点，培养基中还应添加的成分是葡萄糖
C．该培养基不需要高温灭菌和调节 pH 值
D．培养基是人们按照微生物对营养物质的需求，配制出供其生长繁殖的营养基质
7．下列有关纤维素分解菌分离实验的说法正确的是（ ）
A．刚果红能与纤维素分解后的纤维二糖和葡萄糖形成红色复合物
B．在用刚果红染色时只可以先培养微生物再加入刚果红，不可以在倒平板时直接加入
C．该实验只需用到选择培养基，不需用到鉴别培养基
D．在用刚果红染色过程中，若将微生物培养在事先加入刚果红的培养基上，
则出现透明圈的菌落不一定为所需菌种
8．下列有关“DNA 粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是
A．向菜花组织中加入蒸馏水并搅拌可释放核 DNA
B．鉴定 DNA 时，应将丝状物直接加入到二苯胺试剂中进行沸水浴
C．向 DNA 滤液中加入冷酒精缓慢搅拌，可见玻棒上有白色絮状物
D．实验结束后应保存好剩余的二苯胺试剂，以备下次实验时使用
9．多聚酶链式反应（PCR）一次循环：95℃下使模板 DNA 变性、解链→55℃下复性（引物与
DNA 模板链结合）→72℃下引物链延伸（形成新的脱氧核苷酸链）。下列有关 PCR 过程的叙述
中错误的是（ ）
A．变性过程未加解旋酶，是因为可以通过先适当加温来破坏 DNA 碱基对中氢键
B．PCR 技术扩增需要的条件是目的基因、引物、四种脱氧核苷酸、DNA 聚合酶和 DNA 连接酶
C．PCR 技术可用于基因诊断，判断亲缘关系等D．如果反应体系中加入模板 DNA100 个，则经过 30 个循环后，DNA 的数量为 100×230 个
10．下列关于酶的说法，正确的是( )
A．限制酶广泛存在于各种生物中，其化学本质是蛋白质
B．一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列
C．不同的限制酶切割 DNA 后都会形成黏性末端
D．DNA 连接酶可将单个核苷酸加到某个 DNA 片段的末端，形成磷酸二酯键
11．如图为某种质粒的简图，小箭头所指分别为限制性核酸内切酶 EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切
位点，P 为转录的启动部位。已知目的基因的两端有 EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，受体细胞
为无任何抗药性的原核细胞。下列有关叙述正确的是( )
A．将含有目的基因的 DNA 与质粒分别用 EcoRⅠ酶切，在 DNA 连接酶作用下，生成由两
个 DNA 片段之间连接形成的产物有两种
B．DNA 连接酶的作用是将酶切后得到的黏性末端连接起来形成重组质粒，该过程形成两个
磷酸二酯键
C．为了防止目的基因反向粘连和质粒自身环化，酶切时可选用的酶是 EcoRⅠ和 BamHⅠ
D．能在含青霉素的培养基中生长的受体细胞表明该目的基因已成功导入该细胞
12．某研究所的研究人员将生长激素基因通过质粒介导进入大肠杆菌细胞内，来表达这产生
生长激素。已知质粒中存在两个抗性基因：A 是抗链霉素基因，B 是抗青霉素基因，且目的基
因要插入到基因 B 中，而大肠杆菌不带有任何抗性基因，下列叙述错误的是
A．大肠杆菌可能未导入质粒
B．导入大肠杆菌的可能是重组质粒，也可能是质粒
C．可用含青霉素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒
D．在含青霉素培养基中不能生长，但在含链霉素培养基中能生长的可能是符合生产要求的大
肠杆菌
13．继在上海和安徽首次发现 H7N9 禽流感病例，我国多地出现禽流感疫情，为此某研究小组为了研制预防 H7N9 禽流感病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下图。下
列叙述错误的是( )
A．步骤①所代表的过程是反转录
B．步骤②需使用限制酶和 DNA 连接酶
C．步骤③可用显微注射法将表达载体导入受体细胞
D．检验 Q 蛋白的免疫反应特性，可用 Q 蛋白与患禽流感康复的鸡的血清进行抗原——抗体
特异性反应实验
14．下面为番茄植物组织培养过程的流程图解，以下相关叙述不正确的是（ ）
植物叶片 叶组织块 愈伤组织 有生根发芽能力的胚状结构 人工种子
种苗
A．脱分化发生在 b 步骤，形成愈伤组织，在此过程中植物激素发挥了重要作用
B．人工种子的胚乳中含有胚状体发育所需要的营养物质，还可以添加农药和植物激素
C．人工种子中的胚状体与正常种子中的胚都是新个体的幼体，都只具有一个亲本的遗传物质
D．经该过程产生的人工种子属于无性繁殖
15．如图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程有关叙述不正确的是
A．图中实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原
B．利用灭活的病毒可诱导细胞融合获得乙，却不能诱导植物原生质体融合
C．用特定的选择培养基对乙筛选，融合细胞均能生长，未融合细胞均不能生长
a→ b→ c→ d→
e→D．丙需进行克隆化培养和抗体检测，才能获得大量所需抗体
16．下列有关哺乳动物精子和卵子发生的叙述，错误的是（ ）
A．精细胞经变形后，高尔基体发育形成精子的顶体
B．不同种动物的精子形态相似，但大小不同，体型越大的动物精子越大
C．卵母细胞发育至减数第二次分裂中期时，才具备受精能力
D．哺乳动物卵泡的形成和在卵巢内的储备，是在出生前完成的，这是精子和卵子在发生上的
重要区别
17．下列关于动物受精过程和胚胎发育的叙述，正确的是（ ）
A．用于移植的早期胚胎不一定是由受精卵发育而来
B．由于受精卵全能性比胚胎细胞更大，所以将受精卵直接移植到受体成活率会更高
C．比利时兔可以作为安哥拉兔的代孕母兔，但黄牛不能作为奶牛的代孕母牛
D．胚胎工程技术发展迅速，目前已经产生的试管动物有试管牛、试管鸡等
18．研究人员为探讨不同换液体积对牛孤雌胚胎体外发育的影响，以 SOFaa 为基础培养液，
将适量牛孤雌胚胎随机分成 3 组，培养在 100μL 微滴中，每隔 48 小时分别更换培养微滴的
体积，实验结果如下表。据此分析正确的是（ ）
换液体积（V/V） 卵裂率/% 囊胚率/%
0 80.71 22.54
1/4 81.82 23.39
1/2 87.50 38.84
3/4 83.33 21.71
A．不同更换微滴体积均能提高孤雌胚胎的卵裂率和囊胚率
B．可以通过实验中所测得的囊胚率数据推断胚胎的桑椹胚率
C．实验中换液体积为 1／2 的组促进牛孤雌胚胎发育效果最佳
D．定期更换微滴除了补充所需营养物质外，还可防止杂菌污染
19．下列关于干细胞的叙述正确的是（ ）
A．胚胎干细胞在饲养层细胞上，能够迅速增殖分化
B．多能干细胞可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞C．治疗性克隆所用的干细胞是从体外受精的胚胎中分离出来的
D．对诱导多能干细胞（iPS）进行定向诱导分化后可用于疾病的治疗
20．关于现代生物工程技术应用的安全性,下列说法中不正确的是( )
A．运用重组 DNA 技术可以将致病菌或病毒改造成威力巨大的生物武器
B．转基因植物进入自然界后不会与野生物种杂交进而威胁其他生物的生存
C．人类在发展基因工程作物时,没有充分考虑生物和环境之间的相互影响
D．一旦发现转基因生物出现了安全性问题,要马上停止实验,并销毁重组生物
二．简答题（共 50 分）
21.（10 分）根据下列有关胚胎工程的示意图，分析回答下列问题：
(1)C 细 胞 应 选 择 处 于 ________________ 的 细 胞 ； 体 外 受 精 前 要 对 B 细 胞 进 行
________________处理。B 细胞和 C 细胞在体外受精后，应将受精卵移入 培养
液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。
(2) 将 早 期 胚 胎 注 入 D 羊 子 宫 内 的 技 术 叫 ________________ ， D 羊 对 外 来 胚 胎 不 发 生
________________，这使外来胚胎在其体内存活成为了可能。在此过程中若想得到具有相同
遗传物质的两个子代 E 羊，可通过________________技术来实现。
(3)图中的早期胚胎通常处于________________阶段。获得的早期胚胎若暂不移植给受体，可
使用________________法保存。(4)从早期胚胎中分离出的 ES 细胞可诱导分化出不同的组织细胞，这是因为在功能上，ES 细
胞具有____________________。ES 细胞具有体积小、________________、核仁明显的特点。
22、（10 分）近年来，《舌尖上的中国》引发全民关注美食的热潮，其中不乏利用微生物发酵
制作的美食，如素有“东方奶酪”之称的“石宝寨牌”忠州豆腐乳、中国泡菜领导品牌“吉
香居”等．请回答下列有关问题。
（1）利用苹果、梨、葡萄等水果制作果酒时，其发酵阶段所需的菌种是________；在产生酒
精时要控制的必要条件是________。如果发酵后期，通气口的开关被打开，一段时间后果酒
变酸，这是由于酒精在_______的作用下生成了________。
（2）制作吉香居泡菜时，起主要作用的微生物是____________。泡菜制作中盐和水的比例是
_________。泡菜中的亚硝酸盐过多会对人体产生危害，通常用________法检测亚硝酸盐含量。
（3）“石宝寨牌”忠州豆腐乳前期发酵是在严格的无菌条件下，温度严格控制，并保持一定
的 湿 度 ， 然 后 向 长 满 毛 霉 的 豆 腐 块 加 盐 ， 其 作 用
_______________________________________，同时，盐还能_____________________，避免
豆腐块腐败变质．之后要加入配置好的卤汤，其中卤汤中加酒的含量应控制在 12%左右。酒精
含量过高，_________________；酒精含量过低，可能导致豆腐腐败变质。
23.（10 分） 白僵菌可感染农业害虫，因而可用来防治农业害虫。由于白僵菌对草丁膦（一
种除草剂）敏感，且杀死害虫的能力较弱，科研人员将 Bar 基因（抗除草剂基因）和毒蛋白
基因导入白僵菌进行基因工程改造，流程如图所示：（1）从苏云金芽孢杆菌中获取的毒蛋白基因，可以通过 技术在体外大量扩增，与细
胞内 DNA 复制过程相比，该技术的不同点有：
（答出两点,2 分）。
（2）图中形成重组质粒 1 时需要的限制酶是 ；形成重组质粒 2 除了需要
限制酶 XbaⅠ外，还需要 酶。
（3）将重组质粒 2 导入经 处理成为感受态的白僵菌，一段时间后用含有 ________
的平板培养基进行筛选，获得含有 Bar 基因的重组白僵菌。
（4）为了检测毒蛋白基因是否插入到受体细胞，可以采用 ________技术检
测。
（5）为了判断重组白僵菌的杀虫效果，科研人员接下来应该
。（2 分）
24.（10 分）细胞工程可分为植物细胞工程和动物细胞工程等，请回答下列关问题：
(1)图 1 所示为植物体细胞杂交的流程。图 1 中“去壁”要使用的酶是________________ ；①
过程常采用的方法有物理法和化学法，物理法包括______________________等；③过程和④
过程分别表示_______________________。
(2)图 2 所示为制备单克隆抗体的流程。图中“筛选”包括选择培养和抗体阳性检测。其中能在 特 定 的 选 择 培 养 基 中 存 活 的 细 胞 是 _______________ ， 而 抗 体 阳 性 检 测 的 目 的 是
_____________________________________________________。（2 分）
(3) 图 2 中 ， 促 进 细 胞 融 合 的 方 法 中 ， 不 同 于 图 1 中 促 进 细 胞 融 合 所 涉 及 的 方 法 是
____________；筛选中的目标细胞还可以注射到小鼠腹腔内增殖，从_______________中提取
单 克 隆 抗 体 。 与 普 通 抗 体 相 比 ， 单 克 隆 抗 体 具 有
____________________________________________（2 分）等优点。
25．（10 分）为了分离和纯化高效分解石油的细菌，科研人员利用被石油污染过的土壤进行如
图 A 所示的实验。
（1）配制好的培养基灭菌通常可以使用__________________法。步骤③与步骤②中培养基成
分的最大区别是__________________________________________________。这种培养基从功
能上看属于_____________（(填“选择”或“鉴别”)培养基。
（2）同学甲进行过程④的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图 B 所示。该同学的接
种方法是___________；推测同学甲用此方法接种时出现图 B 结果可能的操作失误是
___________________________；在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时
间，这样做的目的是_______________________。
（3）同学乙也按照同学甲的接种方法进行了过程④的操作：将 1mL 样品稀释 100 倍，在 3 个
平板上分别接入 0.1mL 稀释液；经适当培养后，3 个平板上的菌落数分别为 56、58 和 57。据
此可得出每升样品中的活菌数为________________。这种计数方法得到的结果一般比实际值
偏小，原因可能有________________________________________________________。
（4）步骤⑤需要震荡培养其目的是提高培养液溶氧量，同时使
____________________________，提高营养物质利用率。
（5） 步骤⑤后取样测定石油含量的目的是________________________________________。参考答案
1-20 DCDBD DDCBB CCCCC BACDB
1．D
【解析】
【分析】
1、在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖，再隔
绝氧气进行发酵；酒精发酵的最佳温度是在 18℃～25℃，pH 最好是弱酸性。
2、醋酸菌好氧性细菌，当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸；当氧气、
糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生长的最佳温度是在 30℃～35℃。
3、豆腐的主要营养成分是蛋白质和脂肪，都是大分子有机化合物，难以消化、吸收，毛霉、
酵母菌等多种微生物分泌的蛋白酶，能将蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可将脂
肪分解成甘油和脂肪酸，在多种微生物的协同下，豆腐转变成腐乳。
【详解】
A、腐乳制作过程中，前期毛霉生长长出大量的菌丝，后期加入盐和卤汤可以预防杂菌污染，
A 正确；
B、能影响腐乳风味的因素有：①豆腐含水量、②盐的用量、③香辛料的用量、④酒的用量、
⑤发酵温度、⑥发酵时间、⑦是否控制好杂菌污染，B 正确；
C、果酒制作时开始需要氧气，进行有氧呼吸让酵母菌大量繁殖，后期应密封，保持无氧环境，
让酵母菌无氧呼吸产生酒精，C 正确；
D、醋酸菌在有氧条件下会把乙醇氧化成乙醛，再氧化成乙酸，D 错误。
故选 D。
【点睛】
本题考查微生物在食品加工中的作用，识记腐乳、果酒、果醋的制作原理和实验步骤，特别
是影响食品品质的因素。
2．C
【解析】
【分析】
解答本题可借鉴腐乳制作的相关原理。参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小
分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。
【详解】
根据题意可知，实验中用到了甲、乙两菌种，故该实验的自变量是菌种，温度属于无关变量，
A 正确；大豆发酵过程中部分蛋白质转变为多肽，形成豆豉的独特风味，B 正确；容器内上层
为有氧环境，底层为无氧环境，若发酵容器内上层大豆的发酵效果比底层的好，则说明该发
酵菌是好氧菌，C 错误；大豆发酵到豆豉，大豆中的蛋白质在微生物分泌的酶的作用下转变为
小分子肽、氨基酸，D 正确。
3．D
【解析】
【分析】
泡菜制作所用微生物为乳酸菌：（1）乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸；（2）利用乳
酸菌制作泡菜定的过程中会引起亚硝酸盐含量的变化。
【详解】
A、泡菜制作过程中会产生亚硝酸盐，若摄入体内的亚硝酸盐含量过多，在特定的条件下会转
化成亚硝胺，亚硝胺是化学致癌因子，可导致细胞癌变，A 正确；
BC、制作泡菜所用菌种为乳酸菌，其代谢类型为异养厌氧型；故为营造无氧条件，需煮沸泡
菜盐水以除去水中的氧气，同时此举还可杀灭盐水中的其他杂菌，B、C 正确；
D、泡菜腌制时间过短，容易造成细菌大量滋生，亚硝酸盐含量增加，而在整个发酵过程中，
亚硝酸盐的含量表现为先增加后下降的趋势，D 错误。
故选 D。
【点睛】
温度过高、食盐用量不足 10%、腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加，
一般在腌制 10 天后亚硝酸盐含量开始下降。
4．B
【解析】
【分析】
微生物实验室培养的关键是防止杂菌污染，无菌操作分为消毒合灭菌，其中消毒只是杀死物
体表面的微生物，而杀菌是杀死所有微生物，常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌、干热灭菌和灼烧灭菌。
【详解】
A、在防止杂菌污染，研究和应用微生物时应进行消毒和灭菌，实验室可以用紫外线或化学药
物进行消毒，A 正确；
B、接种环、接种针等金属用具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层即外焰部位灼烧灭菌，B 错
误；
C、在实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防止被微生物感染，C
正确；
D、使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境，D 正确。
故选 B。
5．D
【解析】
【分析】
据微生物生长所必需的营养：碳源、氮源、无机盐、水和生长因子。因微生物不同，对碳源、
氮源、无机盐、生长因子的需求也不相同，可以根据微生物的生长需求制备特殊的选择培养
基，来获得单一纯种。制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒
平板。
【详解】
微生物的营养物质主要有碳源、氮源、无机盐、水和生长因子，A 正确；根据微生物对碳源需
要的差别，使用含不同碳源的培养基，例如培养自养型的细菌，在培养基中不需加入碳源，B
正确；微生物培养基调节 pH 值时可以用磷酸氢二钾或磷酸二氢钾，C 正确；制备牛肉膏蛋白
胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，D 错误。
【点睛】
注意：配制培养基必须按照培养微生物的营养需求进行，尤其要注意是先灭菌后倒平板。
6．D
【解析】
【分析】
培养基为微生物提供生长、繁殖和积累代谢产物的营养物质；营养物质归纳为碳源、氮源、
生长因子、无机盐和水；根据化学成分分为合成培养基、天然培养基等根据用途分选择培养
基、鉴别培养基；根据性质分为液体、半固体和固体培养基。【详解】
A、从培养基的营养成分看（不含有机物），此培养基可用来培养的微生物同化作用类型是自
养型，A 错误；
B、微生物的菌落需要在固体培养基的表面生长，因此若要观察微生物的菌落的特点，培养基
中需要添加凝固剂(琼脂)，使液体培养基凝固成固体培养基，B 错误；
C、培养基需要高温灭菌和调节 pH 值，C 错误；
D、培养基是人们按照微生物对营养物质的需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，D 正确。
故选 D。
7．D
【解析】
【分析】
从对两种筛选纤维素分解菌的方法进行比较分析入手，结合微生物培养过程无菌条件的控制
方法来解答该题；刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色
复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，我们可以通过是否产生透明圈来筛
选纤维素分解菌；刚果红可以在细菌菌落形成前倒平板时加入，也可以在菌落形成后加入；
若在细菌菌落形成前倒平板时加入刚果红，则所加刚果红要进行灭菌，以防杂菌的侵入，影
响纤维素分解菌菌落的形成；若在菌落形成后加入刚果红，则不需要灭菌。
【详解】
A、刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，
A 错误；
B、刚果红可以在细菌菌落形成前的倒平板时加入，B 错误；
C、该实验富集纤维素分解菌时需要选择培养基，分离时需要鉴别培养基，C 错误；
D、有些微生物具有降解色素的能力，它们在长时间培养过程中会降解刚果红而形成明显的透
明圈，出现透明圈的菌落不一定为所需菌种，D 正确。
故选 D。
8．C
【解析】
【分析】
DNA 粗提取和鉴定的原理：1、DNA 的溶解性：DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度 NaCl
溶液中溶解度不同；DNA 不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA 对酶、高温和洗涤剂的耐受性。2、DNA 的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA 遇二苯胺会被染成蓝色。
【详解】
A、植物细胞具有细胞壁，向菜花组织中加入蒸馏水并不能使细胞吸水胀破，A 错误；
B、鉴定 DNA 时，应将丝状物先加入 NaCl 溶液中，再加入二苯胺试剂并沸水浴加热才能呈蓝
色，B 错误；
C、DNA 不溶于 95%的冷酒精，向 DNA 滤液中加入冷酒精缓慢搅拌，可见玻棒上有白色絮状
物析出，C 正确；
D、二苯胺试剂需要现配现用，D 错误。
故选 C。
【点睛】
本题考查 DNA 粗提取和鉴定实验，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识
间内在联系，形成知识网络结构，能运用所学知识和观点，对生物学问题作出准确判断。
9．B
【解析】
【分析】
PCR 技术：
1、概念：PCR 全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定 DNA 的核酸合成技术。
2、原理：DNA 复制。
3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。
4、条件：模板 DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定 DNA 聚合酶（Taq 酶）。
5、过程：①高温变性：DNA 解旋过程（PCR 扩增中双链 DNA 解开不需要解旋酶，高温条件
下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链 DNA 上；③中温延伸：合成子链。
【详解】
A. 变性过程未加解旋酶，是通过高温解旋，破坏 DNA 碱基对中氢键，A 正确；
B. PCR 技术扩增需要的条件是目的基因、引物、四种脱氧核苷酸、耐高温的 DNA 聚合酶，
不需要 DNA 连接酶，B 错误；
C. PCR 技术可用于基因诊断，判断亲缘关系等，C 正确；
D. 如果反应体系中加入模板 DNA100 个，则经过 30 个循环后，DNA 的数量为 100×230 个，
D 正确。
故选 B。10．B
【解析】限制酶主要存在于微生物中，其化学本质是蛋白质，A 项错误；一种限制酶只能识别
一种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，B
项正确；有的限制酶切割 DNA 后会形成黏性末端，有的限制酶切割 DNA 后会形成平末端，C
项错误；DNA 连接酶可将双连 DNA 片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的
磷酸二酯键，D 项错误。
【点睛】本题的易错点在于因混淆了与“磷酸二酯键”有关的酶的具体作用而误选 D。解决此类
问题，需要在平时的学习中注意采用列表等方法对相关的知识进行归纳总结。
酶的种类 具体作用部位
DNA 聚合酶 DNA 复制过程中将单个的脱氧核苷酸通过磷酸二酯键连接成链
DNA 连接酶 将两个 DNA 片段连接起来
RNA 聚合酶
在转录过程中与基因中的启动子结合，连接磷酸二酯键，将单个的
核糖核苷酸连接成链，并能够打开 DNA 碱基对间的氢键
限制性核酸内切酶 识别特定的核苷酸序列，从固定的切点切开磷酸二酯键
逆转录酶
某些 RNA 病毒在宿主细胞内利用宿主细胞的脱氧核苷酸通过磷酸
二酯键连接成链，进而合成 DNA
11．【答案】C
【解析】
本题结合图形考查基因表达载体的构建，要求考生理解构建基因表达载体的方法，明确构建
的基因表达载体应含有哪些部件及这些部件的功能，此题难度稍大。
根据题意，目的基因的两端有 EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，将含有目的基因的 DNA 与用
EcoRⅠ酶切，会得到含目的基因的 DNA 片段和不含目的基因的 DNA 片段；根据质粒的简图
可知，将质粒用 EcoRⅠ酶切，会得到与质粒周长等长的链状 DNA；因此将含有目的基因的
DNA 与质粒分别用 EcoRⅠ酶切，在 DNA 连接酶作用下，可生成含目的基因的原 DNA 片段
两个之间进行连接、由含目的基因的 DNA 片段与质粒周长等长的链状 DNA 相互连接形成的链状 DNA、二倍于原质粒周长的环状 DNA 三种类型，A 错误；DNA 连接酶的作用是将酶切
后得到的黏性末端连接起来形成一个重组质粒，该过程形成四个磷酸二酯键，B 错误；EcoRⅠ
和 BamHⅠ的识别序列不同，获取目的基因和切割质粒时，同时选用 EcoRⅠ和 BamHⅠ切割，
目的基因两端形成的末端不同，切割开的质粒两端形成的末端不同，再用 DNA 连接酶连接，
可以防止目的基因反向粘连和质粒自身环化，C 正确；题图显示，在构建基因表达载体的过程
中质粒中的青霉素抗性基因和四环素抗性基因都不会被破坏，因此能在含青霉素和四环素的
培养基中生长的受体细胞不能表明目的基因已成功导入该细胞，D 错误。
12．C
【解析】
大肠杆菌可能没有导入质粒，A 正确；导入大肠杆菌的质粒可能为重组质粒，也可能为普通质
粒，B 正确；由于目的基因要插入到基因 B 中，即抗氨苄青霉素基因破坏，即工程菌不能抗
氨苄青霉素，因此不能用含氨苄青霉素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒，C 错误；
据分析可知，在含氨苄青霉素培养基中不能生长，但在含链霉素培养基中能生长的可能是符
合生产要求的大肠杆菌，D 正确。
13．C
【解析】本题考查基因工程的应用，要求考生利用所学知识解读图形，判断出图中①是反转
录，②是形成重组质粒，③是将目的基因导入受体细胞，④是目的基因在受体细胞内表达，
进而结合题意分析、判断各选项。
分析图形可知，步骤①代表反转录，是以禽流感病毒的 RNA 为模板合成 DNA 的过程，A 正
确；步骤②是用限制酶和 DNA 连接酶将目的基因与质粒相连形成重组质粒，B 正确；步骤③
将目的基因导入大肠杆菌的方法是用 Ga2+处理，使大肠杆菌细胞处于感受态，进而吸收重组
质粒，C 错误；检验 Q 蛋白的免疫反应特性，可用 Q 蛋白与患禽流感康复的鸡的血清进行
抗原——抗体特异性反应实验，D 正确。
【点睛】将目的基因导入受体细胞受体细胞种类不同，导入方法也不同，可通过下表比较记
忆：
生物种类 植物细胞 动物细胞 微生物细胞
常用方法 农杆菌转化法 显微注射法 转化法
受体细胞 体细胞或受精卵 受精卵 原核细胞转化过程
将目的基因插入到 Ti 质粒
的 T－DNA 上→导入农杆
菌→侵染植物细胞→整合
到受体细胞的染色体 DNA
上→表达
将含有目的基因的表达载
体提纯→取卵(受精卵)→
显微注射→受精卵发育→
获得具有新性状的动物
Ca2＋处理细胞→感受
态细胞→重组表达载
体与感受态细胞混合
→感受态细胞吸收
DNA 分子
14．C
【解析】
【分析】
植物组织培养依据的原理为植物体细胞的全能性，即已经分化的细胞仍然具有发育成完整植
株的潜能；培养过程的顺序是离体植物器官、组织或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，
再分化形成根、芽等器官进而形成新的植物体。
【详解】
A、脱分化发生在 b 步骤，形成愈伤组织，在此过程中需要植物激素诱导，A 正确；
B、人工种子的胚乳含有胚状体发育所需要的营养物质，还可以添加农药和植物激素，B 正确；
C、正常种子中的胚是由受精卵发育而来，具有双亲的遗传物质，C 错误；
D、经该过程产生的人工种子没有经历生殖细胞的产生和融合，属于无性繁殖，D 正确。
故选 C。
15．C
【解析】
试题分析：甲注射小鼠，产生能分泌特异性抗体的 B 淋巴细胞，则甲属于抗原，A 正确；利
用聚乙二醇（化学法）、灭活的病毒（生物法）和电激（物理法）可诱导细胞融合获得杂种动
物细胞，但用灭活的病毒却不能诱导植物原生质体融合，B 正确；用特定的选择培养基对乙筛
选，融合具有同种核的细胞和未融合细胞均不能生长，只有融合的杂种细胞能生长，C 错误；
杂交瘤细胞经过选择培养基的筛选并经单一抗体检测后，培养能产生特定抗体的杂交瘤细胞
即可制备单克隆抗体，D 正确。
考点：单克隆抗体的制作
16．B
【解析】【分析】
精子变形：细胞核→精子头的主要部分；高尔基体→头部的顶体；中心体→精子的尾；线粒
体→线粒体鞘（尾的基部）；细胞内其他物质→原生质滴（最后脱落）；不同种动物精子的形
态相似，大小略有有不同，与动物的体形大小无关。受精前的卵子的准备，动物排出的可能
是初级卵母细胞也可能是次级卵母细胞，都要在输卵管内进一步成熟，达到减数第二次分裂
中期时，才具备与精子受精的能力。
【详解】
精细胞经变形后，高尔基体发育形成精子头部的顶体，A 正确；不同精子形态相似且大小和动
物体型大小无关，B 错误；卵子在输卵管内发育到减数第二次分裂中期时才具备受精的能力，
C 正确；哺乳动物卵泡的形成和在卵巢内的贮备是胎儿出生前即（胎儿时期）完成的，这是精
子和卵子在发生上的重要区别，D 正确。
【点睛】
解答本题的关键是识记精子和卵子形成的时间、精子变形的过程，掌握精子形成三个阶段发
生的具体内容，明确不同精子形态相似且大小和动物体型大小无关。
17．A
【解析】
【分析】
胚胎移植实际上是生产胚胎的供体和孕育胚胎的受体共同繁殖后代的过程；胚胎移植大大缩
短了供体本身的繁殖周期，充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。
【详解】
A、用于移植的早期胚胎不一定是由受精卵发育而来，也可以是细胞核移植后得到的，A 正确；
B、受精卵不能直接移植，B 错误；
C、只要是同一物种，具有正常繁殖能力，就可以做受体，C 错误；
D、胚胎工程的对象一般是哺乳动物，D 错误。
故选 A。
【点睛】
本题考查高等动物的受精和胚胎发育的知识。意在考查能理解所学知识的要点，把握知识间
的内在联系的能力。18．C
【解析】
【分析】
由表格数据可知，换液体积为 3/4 的囊胚率低于不更换微滴体积，换液体积为 1／2 的组卵裂
率和囊胚率均最高，该条件下促进牛孤雌胚胎发育效果最佳。
【详解】
A、由表格数据可知，换液体积为 3/4 的囊胚率比不更换微滴体积低，A 错误；
B、因为各组卵裂率不同，故不可以通过实验中所测得的囊胚率数据推断胚胎的桑椹胚率，B
错误；
C、实验中换液体积为 1／2 的组卵裂率和囊胚率均最高，促进牛孤雌胚胎发育效果最佳，C
正确；
D、定期更换微滴除了补充所需营养物质外，还可防止代谢产物积累，D 错误。
故选 C。
19．D
【解析】
【分析】
本题考查胚胎干细胞的相关知识，要求考生识记胚胎干细胞的特点，掌握胚胎干细胞的相关
应用及实例，能结合所学的知识准确答题。
【详解】
A、胚胎干细胞在饲养层细胞上，只增殖不分化，A 错误；
B、全能干细胞可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞，B 错误；
C、治疗性克隆所用的细胞是从患者自身分离出来的，然后才有核移植技术和早期胚胎培养技
术形成早期胚胎，再从中获得干细胞，C 错误；
D、对诱导多能干细胞（iPS）进行定向诱导分化后可用于疾病的治疗，D 正确。
故选：D。
【点睛】
胚胎干细胞:（1）哺乳动物的胚胎干细胞简称 ES 或 EK 细胞，来源于早期胚胎或从原始性腺
中分离出来。（2）具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在
功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养
的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。20．B
【解析】
【分析】
转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生
物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。有关生物安全问题，反对者的观
点是：转基因植物可能会对生物多样性构成潜在的风险和威胁。他们的理由：①转基因植物
扩散到种植区外变成野生种或杂草；②转基因植物竞争能力强，可能成为“入侵的外来物种”；
③转基因植物的外源基因与细菌或病毒杂交，重组出有害的病原体；④可能使杂草成为有抗
除草剂基因的“超级杂草”，据此答题。
【详解】
A、转基因技术如果被用于军事，制造出生物武器，那将是对人类社会极大的毁灭，A 正确；
B、转基因生物有可能会在近缘物种之间通过花粉杂交，造成基因库的污染，B 错误；
C、人类在推广转基因作物时，没有充分考虑生物和环境之间的相互影响，C 正确；
D、实验过程中一旦发现转基因生物出现了安全性问题，要马上停止实验，并销毁重组生物，
D 正确。
故选 B。
【点睛】
本题考查生物技术的安全性和伦理问题的分析，此题容易混淆，基本知识必须扎实，易混知
识必须区分清楚。
21、【答案】(1)减数第二次分裂中期(MⅡ中期) 获能 发育
(2)胚胎移植 免疫排斥反应 胚胎分割
(3)桑椹胚或囊胚 冷冻 (4)发育的全能性 细胞核大
22【答案】
（1）酵母菌 无氧(密闭、密封) 醋酸菌 醋酸
（2）乳酸菌 1：4 比色
（3）析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬 抑制微生物的生长
腐乳成熟的时间将会延长 【解析】（1）参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制
作的原理：
在有氧条件下，反应式如下：C6H12O6+6H2O+6O2 →6CO2+12H2O+能量；
在无氧条件下，反应式如下：C6H12O6→2CO2+2C2H5OH+能量。
参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、
糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙
醛，再将乙醛变为醋酸。
（2）参与泡菜制作的微生物是乳酸菌。泡菜制作中盐和水的比例是 1：4；为了检测泡菜中的
亚硝酸盐的含量，通常采用光电比色法检测。
（3）腐乳前期发酵时，温度应该控制在 15~18℃，并保持一定的湿度。加盐的作用是析出豆
腐中的水分，使豆腐块变硬，同时，盐还能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质。酒精
含量一般控制在 12%左右，酒精含量过高会延长腐乳成熟的时间，含量过低则不能抑制杂菌
生长。其次是酒精还能使腐乳具有独特的香味。
２３.答案：
（1）PCR PCR 通过高温解旋，PCR 使用的是热稳定 DNA 聚合酶（Taq 酶），引物不同，
先解旋后复制（任答两点，每点 1 分，共 2 分）
（2）NcoⅠ、BamHⅠ DNA 连接
（3）Ca2+（CaCl2 溶液） 草丁膦
（4）DNA 分子杂交技术
（5）将重组白僵菌喷涂在植物叶片上，再用此叶片饲喂害虫，记录单位时间内的害虫死亡的
数(2 分)
解析：（1）根据题意可知，3 种获取目的基因的方法中，只有 PCR 技术可以获得
大量毒蛋白基因片段。而 PCR 技术与细胞内 DNA 复制的区别主要是 PCR 通过高
温解旋，PCR 使用的是热稳定 DNA 聚合酶（Taq 酶），引物不同，先解旋后复制
等。
（2）据图分析，毒蛋白基因两端是 NcoⅠ、BamHⅠ作用位点，因此需要 Nco I、
BamH I 两种限制酶切割目的基因和质粒。然后再用 DNA 连接酶形成重组质粒 1，利用两种限制酶可以防止目的基因和质粒自身连接；然后再利用 Xal I 酶分别切割
重组质粒 1 和 BAR 基因，再构建重组质粒 2。
（3）将重组质粒 2 与用钙离子处理后处于感受态的白僵菌菌液混合进行转化，一
段时间后，用含有草甘磷的平板培养基进行筛选，获得还有 Bar 基因的重组白僵
菌。
（4）检测毒蛋白基因是否插入到受体细胞，说明检测对象是基因，用 DNA 分子
杂交技术。
（5）个体水平的检测，科研人员将重组白僵菌喷涂在植物叶片上，再用此叶片饲
喂饥饿处理的害虫，记录单位时间内的害虫死亡的数，以判断重组白僵菌的杀虫
效果。
２４答案 (1)纤维素酶和果胶酶 离心、振动、电激 脱分化和再分化
(2)杂交瘤细胞 筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞（2 分）
(3)灭活病毒法 小鼠的腹水 特异性强、灵敏度高、并可能大量制备（2 分）
解析 (1)在进行植物体细胞杂交之前，应先使用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞
壁。图 1 中，①过程表示诱导植物细胞的原生质体融合，常用的方法有物理法和
化学法，其中物理法包括离心、振动、电激等；③过程和④过程分别表示脱分化
和再分化。(2)图 2 中经融合处理后还需要进行至少 2 次筛选，第一次(利用选择培
养基)筛选出杂交瘤细胞而未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡。
杂交瘤细胞中只有极少数能产生特异性抗体，通过抗体阳性检测来选出目标细胞。
(3)诱导动物细胞融合的方法有物理法、化学法和灭活的病毒处理法等。筛选出杂
交瘤细胞后，将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增
殖，这样，从细胞培养液或小鼠腹水中，就可以提取大量的单克隆抗体了。
２５答案 答案（1）高压蒸汽灭菌 步骤③的培养基中石油是唯一碳源 选择
（2）稀释涂布平板法 涂布不均匀 检测培养基平板灭菌是否合格
（3）5．7×107 当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
（4）菌体和培养液充分接触
（5）筛选出分解石油能力最好的细菌【解析】
本题考查分解石油的细菌的筛选，要求考生明确微生物的接种、筛选方法，能根据所学知识
分析操作流程图，筛选出所需要的石油分解菌，并能对计数结果进行计算。
（1）根据题意，要分离和纯化高效分解石油的细菌，配制好的培养基灭菌通常可以使用高压
蒸汽灭菌法。图中步骤②是扩大培养来自被石油污染过的土壤中细菌，步骤③是利用添加石
油扩大培养分解石油的细菌，步骤③与步骤②中培养基成分的最大区别是步骤③的培养基中
石油是唯一碳源。这种培养基从功能上看属于选择培养基。
（2）过程④是对分解石油的细菌进行分离，分析 B 图可知，分解石油的细菌在培养基表面分
布较为均匀，说明同学甲进行过程④的操作中接种方法是稀释涂布平板法；图 B 中培养基表
面左侧的菌落数目明显比右侧多，推测同学甲用此方法接种时出现图 B 结果可能的操作失误
是接种时涂布不均匀；在接种前需随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样
做的目的是检测培养基平板灭菌是否合格。
（3）同学乙也按照同学甲的接种方法进行了过程④的操作：将 1mL 样品稀释 100 倍，在 3
个平板上分别接入 0.1mL 稀释液；经适当培养后，3 个平板上的菌落数分别为 56、58 和 57。
据此可得出每升样品中的活菌数为（56+58+57） 3 0.1x100x1000=5.7×107。由于细菌会相互
重叠，当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以导致统计的细菌
数量往往比实际数目少。
（4）步骤⑤需要震荡培养其目的是提高培养液溶氧量，同时使菌体与培养液充分接触，提高
营养物质利用率。
（5）步骤⑤后取样测定石油含量的目的是筛选出分解石油能力最好的细菌，其中石油剩余量
最少的一组所含的细菌就是分解石油能力最好的细菌。
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