一、单向选择题(本题共 20 小题，每小题 2 分，共 40 分)
1．如图为表达载体的模式图，若结构 X 是表达载体所必需的，则 X 最可能是
A．氨苄青霉素抗性基因 B．启动子
C．限制酶 D．DNA 连接酶
2．以下甲、乙两图表示从细菌细胞中获取目的基因的两种方法，以下说法中错误
的是
A．甲方法可建立该细菌的基因组文库 B．乙方法可建立该细菌的 cDNA 文库
C．甲方法要以脱氧核苷酸为原料 D．乙方法需要逆转录酶参与
3．科学家已能运用基因工程技术，让羊的乳腺合成并分泌人体某些种类的抗体，以下叙述不
正确的是
A．该技术可导致定向变异 B．表达载体中需要加入乳腺蛋白的特异性启动子
C．目的基因是抗原合成基因 D．受精卵是理想的受体细胞
4.产生标准形态菌落的细菌的最初数目和培养基分别是( )
A 一个细菌、液体培养基 B.许多细菌、液体培养基
C.一个细菌、固体培养基 D.许多细菌、固体培养基
5．植物体细胞杂交和动物细胞融合比较，正确的是
A．诱导融合的方法完全相同 B．所用的技术手段基本相同
C．所采用的原理完全相同 D．都能形成杂种细胞
6．下列关于细胞工程的叙述，正确的是
A．细胞的全能性是植物组织培养和动物细胞培养的理论基础
B．进行植物组织培养，需先用酶解法去掉细胞壁
C．要获取单克隆抗体只能将杂交瘤细胞注入小鼠体内培养
D．动物细胞培养可作为检测有害物质的有效手段
7．在 DNA 测序工作中，需要将某些限制酶的限制位点在 DNA 上
定位，使其成为 DNA 分子中的物理参照点，这项工作叫做
2019-2020 高二年级第二学期期中生物试卷
高考资源网“限制酶图谱的构建”。假设有以下一项实验：用限制酶 HindⅢ、BamHⅠ及两者的混合物
分别降解一个 4 kb(1 kb 即 1 千个碱基对)大小的线性 DNA 分子，降解产物分别进行凝胶电
泳，在电场的作用下，降解产物分开，如甲图所示：据此构建这两种限制酶在该 DNA 分子
上的“限制酶图谱”如乙图，请判断相关的标示正确的是
A．2.8 B．HindⅢ C．0.3 D．BamHⅠ
8．观察分析下图，该图表示的过程是
A．构建基因组文库
B．构建 cDNA 文库
C．构建基因表达载体
D．构建转基因工程菌
9．下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是
A．培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞
B．克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变
C．二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的
D．恶性细胞系的细胞可进行传代培养
10．试管婴儿、试管苗和克隆羊三者均属于生物工程技术的杰出成果，下列叙述正确的是
A．都属于无性生殖，能保持母本性状 B．都用到细胞工程的技术
C．都充分体现了体细胞的全能性 D．都不会发生基因重组和变异
11．下列有关植物细胞与组织培养的叙述中，错误的是
A．花药、胚等不能作为组织培养的材料 B．植物细胞具有全能性
C．外植体是指用于培养的植物组织或器官 D．外植体可诱导出愈伤组织
12．在现代生物科技的应用中，不需要进行检测与筛选的是
A．对植物的离体组织进行培养，大规模培育优良品种
B．将鼠的骨髓瘤细胞与 B 淋巴细胞融合，制备单克隆抗体
C．利用植物体细胞杂交技术培育“萝卜—甘蓝”
D．将抗虫基因导入植物细胞，培育具有抗虫特性的新植株
13．下图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。据图分析正确
的是（ ）
A．3 号试管的稀释倍数为 103 倍B．4 号试管中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数恰为 5 号试管的 10 倍
C．5 号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为 1．7×1010 个
D．该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要高
14．在制果酒、果醋、泡菜、腐乳时,所用微生物的代谢类型分别是（ ）
A．兼性厌氧型、需氧型、厌氧型、需氧型
B．厌氧型、厌氧型、厌氧型、需氧型
C．兼性厌氧型、需氧型、需氧型、厌氧型
D．厌氧型、兼性厌氧型、需氧型、厌氧型
15．在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，不需要下列哪项条件
A．消毒灭菌 B．适宜的温度 C．适宜的养料和激素 D．充足的光照
16．下列关于利用胚胎工程技术繁殖优质奶牛的叙述，错误的是
A．对受体母羊与供体母羊进行同期发情处理
B．人工授精后的一定时间内，收集供体原肠胚用于胚胎分割
C．利用胚胎分割技术可以获得两个基因型完全相同的胚胎
D．一次给受体母羊植入多个胚胎，可增加双胞胎和多胞胎的比例
17．下图为制备转基因鼠的实验程序，其中涉及的技术有
①超数排卵技术 ②同期发情技术 ③显微注射技术
④细胞培养技术 ⑤胚胎移植技术
A．③④⑤ B．①③⑤
C．②③④⑤ D．①②③④⑤
18．下列有关植物组织培养的叙述，正确的是：
A．愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞
B．二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株
C．用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子
D．植物耐盐突变体可通过添加适量 NaCl 的培养基培养筛选而获得
19．2001 年 2 月，一只背上长着“人耳”的老鼠在北京展览馆与观众见面，这只老鼠其实是
一只切去脾脏的老鼠，它背上的“人耳”是一种高分子化学材料聚羟基乙酸作为模型支
架用物理方法增殖成的，增殖的“人耳鼠”的生物工程技术是
A．动物细胞培养 B．动物细胞融合 C．动物胚胎移植 D．细胞核移植
20．下列关于“DNA 粗提取与鉴定实验”的叙述，正确的是
A．洗涤剂能瓦解细胞膜并增加 DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度
B．将 DNA 丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝C．常温下菜花匀浆中有些酶类会影响 DNA 的提取
D．用玻棒缓慢搅拌滤液会导致 DNA 获得量减少
二、多项选择题：（本题共 5 小题，每小题 3 分，共 15 分）
21. 下表有关基因表达的选项中，能够表达的有
基 因 表达的细胞 表达产物
A 细菌抗虫蛋白基因 抗虫棉叶肉细胞 细菌抗虫蛋白
B 人酪氨酸酶基因 正常人皮肤细胞 人酪氨酸酶
C 动物胰岛素基因 大肠杆菌工程菌细胞 动物胰岛素
D 兔血红蛋白基因 兔成熟红细胞 兔血红蛋白
22．下列关于培育“试管婴儿”的技术包括有
A．体外受精 B．基因重组 C．胚胎移植 D．细胞培养
23．下列与动物细胞培养有关的表述中，正确的是
A．培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清
B．原代培养的细胞一般传至 10 代左右便会出现生长停止
C．动物细胞培养一般能够传到 40～50 代，但其遗传物质发生了改变
D．动物细胞培养可用于药物测试和获得大量自身的健康细胞
24．目前一部分人对“转基因微生物”的产生有激烈的争论，如果正方认为对人类是有利的，
反方认为转基因微生物的产生是有潜在风险的。下列观点中不能支持正方的是
A．转基因微生物会合成出“超级病菌”危害人类健康
B．转基因微生物的扩散会威胁生物的多样性
C．利用转基因微生物可以生产某些药用蛋白或抗生素
D．毒性基因通过基因漂移而造成“基因污染”
25．下列关于制作果酒、果醋和腐乳的叙述，合理的是
A．在果酒发酵后期拧开瓶盖的间隔时间可延长
B．条件适宜时醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸
C．果酒发酵过程中发酵液密度会逐渐减小
D．将长满毛霉的豆腐装瓶腌制时，底层和近瓶口处需加大用盐量
三、非选择题(本题共 6 小题，共 45 分)
26．(6 分)日本下村修、美国沙尔菲和美籍华人钱永健
因在研究绿色荧光蛋白(GFP)等方面的突出贡献，获得2008 年度诺贝尔化学奖。下图为我国首例绿色荧光蛋白(GFP)转基因克隆猪的培育过程示意
图，据图回答：
(1)绿色荧光蛋白基因在该实验中是作为________基因。图中通过过程①、②形成重组质粒，
需要限制酶切取目的基因和质粒。限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，请画出质粒被
限制酶Ⅰ切割后形成的黏性末端：______________，作用于______________键。
(2) 过 程 ③ 将 重 组 质 粒 导 入 猪 胎 儿 成 纤 维 细 胞 时 ， 采 用 最 多 也 最 有 效 的 方 法 是
__________________________________________________________________。
(3)如果将切取的 GFP 基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP 基因可以作为
基因表达载体上的标记基因，其作用是____________________________________。
(4)目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程
技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是(用数字表示)________________。
①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸
②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列
③蓝色荧光蛋白基因的修饰(合成)
④表达出蓝色荧光蛋白
27．（10 分）如图所示为动物细胞培养过程中，动物细胞增殖情况的变化曲线
(图中 B、D 两点表示经筛选后继续培养)，请据图回答下面的问题。
(1)OA 段的培养称为________培养，AB 段可能发生了________现象，需要用
________酶处理使组织细胞分散开来。
(2)动物细胞培养和植物组织培养过程中，就细胞增殖、分化来说，动植物细
胞都要进行________，不同的是植物细胞还要进行___________________。
(3)为制备单克隆抗体，需将________注射到小鼠体内，以此获取________细胞，同时可选取
图中________点的细胞与该细胞融合形成杂交细胞，所选取的细胞，其细胞膜上的________
比正常细胞显著减少，为获得能够产生单克隆抗体的杂交细胞，至少进行_______次筛选
28．（8 分）如右图所示，请据图回答下面的问题。
(1)淋巴细胞能与骨髓瘤细胞融合成一个细胞，两种细胞膜也能“融合”在一起，说明细胞膜_____________________________________。
此过程，常用________作为诱导剂，该细胞的特点是_________________。
(2)已知细胞合成 DNA 有 D 和 S 两条途径，其中 D 途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这
两种 DNA 的合成途径，但一般不分裂增殖，鼠骨髓瘤细胞中尽管没有 S 途径，但能不断分裂
增殖，将这两种细胞在试管中混合，加聚乙二醇促融，获得杂种细胞。请设计一种方法(不考
虑机械方法)，从培养液中分离出杂交瘤细胞。
方法： ____________________________________________。
(3)杂交瘤细胞繁殖进行的是___________分裂，其遗传性状________。
(4)杂交瘤细胞的体外培养与植物组织培养的培养基相比有何主要不同？
_____________________________________________________________。
(5)单克隆抗体注入体内后可以自动追踪抗原(病原体或癌变细胞等)并与之结合，而绝不攻击
任何正常细胞，故称为“生物导弹”，这是利用了
_____________________________________________________________。
29．(5 分)植物组织培养是克隆植物的一种方法，过程如下图所示，请据图回
答相关的问题。
(1)为了获得脱毒植株，外植体往往取自植物的花芽、叶芽等处的分生组织，
其原因是______________________________________。
(2)培养皿中的培养基除添加营养物质外，还需要添加植物激素，其目的是
诱导外植体______________________。
(3)在生产实践中为获得大量的细胞产物，如：紫杉醇，可将①________放
入液体培养基中，经机械作用分散成单个细胞，制备成细胞浮液，再经过________即可获得大
量细胞。
(4)组织培养过程需要植物生长和繁殖的最适条件，否则在光学显微镜下可能观察到发生
________异常，进而使植物出现遗传不稳定甚至不育。
30（9 分）某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物 A。研究人员用化合物
A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物 A 的细菌(目的
菌)。实验的主要步骤如图所示。请分析回答下列问题：
(1)培养基中加入化合物 A 的目的是筛选________，这种培养基属于________培养基。(2)转为固体培养基时，常采用________和稀释涂布平板法进行接种，在前一种方法接种过程
中所用的接种工具是________，这种工具在操作时采用的灭菌方法是________。
(3)某同学计划统计污水池中目的菌的总数，他选用 104、105、106 稀释液进行涂布平板，每种
稀释液都设置 3 个重复组，各吸取 0.1 mL 稀释液涂布平板，在适宜条件下培养一段时间后，
对平板的菌落数进行统计，结果如下：
稀释度/倍 104 105 106
平板 1 2 3 1 2 3 1 2 3
平板菌落数/个 432 421 445 78 67 74 9 6 8
为了保证结果准确，应选择上述稀释________倍的平板菌落数作为统计结果，计算出每毫升
样品中目的菌菌株数为________个。
(4)测定微生物的数量常采用____________法，其统计的数值往往比实际数目低，原因是
________________________________
31(7 分).某一质粒载体如图所示，外源 DNA 插入到 Amp r 或 Tetr 中会导致相应的基因失活
(Ampr 表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr 表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用 BamHⅠ酶
切后，与用 BamHⅠ酶切获得的目的基因混合，加入 DNA 连接酶进行连接反应，用得到的混合
物直接转化大肠杆菌，结果大肠杆菌有的未被转化，有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种，
分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。
(1)质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有____________________________(答
出两点）。
(2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述四种大肠杆菌细胞中，未被转化的和仅
含环状目的基因的细胞是不能区分的，其原因是___________________________________
并且________________和____________________________________的细胞也是不能区分的，
其原因是______________________________________________________________________。
在上述筛选的基础上，若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落，还需
使用含有________的固体培养基。
(3)基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体，其 DNA 复制所需的原料来自于
________________。高二生物阶段测试参考答案
1．B 2．C 3．C 4．C 5．D 6．D 7．C 8．A 9．D 10．B 11．A 12．A
13．B 14．A 15．D 16．B 17．D 18．D 19．A 20．C
21. ABC 22. ACD 23. ABD 24. ABD 25. ABC
26．（6 分）
(1)目的
磷酸二酯键
(2)显微注射技术 (3)为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因 (4)②①③④
27．(10 分)
(1)原代 接触抑制 胰蛋白 (2)增殖或分裂 脱分化和再分化
(3)抗原 浆 D 糖蛋白 2
28．(8 分)
(1)具有流动性 聚乙二醇(或灭活病毒) 具有无限增殖能力，能产生特异性抗体
(2)培养液中加入氨基嘌呤，收集增殖的细胞 (3)有丝 保持不变(稳定)
(4)动物细胞培养用的是液体培养基，且其中含有动物血清
(5)抗原与抗体之间结合的高度特异性
29．(5 分)
(1)这些部位很少受到病毒等病原体的侵害
(2)脱分化和再分化 (3)愈伤组织 细胞分裂
(4)染色体结构与数目
30．(9 分) (1)目的菌 选择
(2)平板划线法 接种环 灼烧灭菌
(3)105 7.3×107
(4)稀释涂布平板 两个或多个细胞连在一起时，观察到的只是一个菌落
31（7 分）
答案 (1)能自我复制、具有标记基因
(2)二者均不含有氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上均不生长 含有质粒载体 含有插入了目的基因的重组质粒(或答含有重组质粒) 二者均含有氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上
均能生长 四环素 (3)受体细胞
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