高二生物2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体课件（共20张PPT）

(1) (1) (2) (3) (4) (5) 植物体细胞杂交过程示意图 复习旧知识2.2.2 动物细胞融合 与单克隆抗体A细胞 B细胞 人工诱导 1.1动物细胞融合的概念 杂交细胞 动物细胞融合（也称细胞杂交）：是 指两个或多个细胞融合形成一个单核细 胞的过程。 一、动物细胞融合 两个核的融合是在杂种细胞第 一次有丝分裂时进行的 杂交细胞遗传物质特点： 含两种生物的遗传物质诱导方法： 物理方法： 化学法： 生物法： 灭活的病毒 （动物特有） 电激等 聚乙二醇（PEG)灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面 细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接 细胞融合，形成杂交细胞 原理： 细胞膜具有一定的流动性•为什么灭活的病毒能作为诱导剂？ 因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分 子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细 胞发生融合。 •不灭活的病毒能作为诱导剂吗？ 不能，因为不灭活的病毒会感染细胞。植物细胞杂交与动物细胞融合的比较 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 原理 融合前处理 使用的酶 诱导方法 主要用途 细胞膜的流动性 细胞的全能性 细胞膜的流动性 纤维素酶、果胶酶 胰蛋白酶 物理方法 （离心、振荡、电激） 化学方法（PEG） 物理、化学方法 灭活的病毒 获得杂种植株 制备单克隆抗体 去除细胞壁后诱 导原生质体融合 使细胞分散后 诱导细胞融合4.意义： 突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂 交（种间、属间、科间、动植物之间）成 为可能。 5.应用： 最重要的用途是 制备单克隆抗体• 单克隆抗体：单个B细胞克隆产生的化学性 质单一、特异性强的抗体提示1：对B细胞进行细胞培养可行吗？ 提示2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？ 问题：如何大量生产单克隆抗体？请尝试设 计一个方案。 2.2单克隆抗体的制备一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖 杂交瘤细胞动物细胞培养技术 设计方案： 动物细胞融合技术单克隆 抗体 既能产生特异性抗体， 又能大量增殖的细胞 1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒的实验骨髓瘤细胞免疫小鼠免疫小鼠 单克隆抗体单克隆抗体 筛选 克隆、筛选 体内培养 体外培养 已免疫过的 B淋巴细胞 （浆细胞） （选择培养基） （抗体检测） 细胞融合 杂交细胞杂交细胞 杂交瘤细胞杂交瘤细胞 原理： 细胞膜具 有一定的 流动性和 细胞增殖BB 、B瘤 、瘤瘤 （B、瘤） （一选）目 的：选出杂 交瘤细胞 获得产生相应 抗体的B细胞 （二选）目的： 选能产生所需 特异性抗体的 杂交瘤细胞 √ 体外培养体外培养 小鼠腹腔内培养小鼠腹腔内培养2、单克隆抗体的优点 特异性强、灵敏度高3、单克隆抗体的应用 （1）作为诊断试剂——最广泛应用 准确、高效、简易、快速 （如同位素标记 单克隆抗体，可 诊断肿瘤、心血 管畸形等）（2）运载药物 生物导弹=单克隆抗体+药物，治疗肿瘤） (“(“生物导弹生物导弹” ” ——单抗导向，药物为弹头单抗导向，药物为弹头))1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞， 经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（ ） 　 A.经过免疫的B淋巴细胞 B.没经过免疫的T淋巴细胞 C.经过免疫的T淋巴细胞 D.没经过免疫的Ｂ淋巴细胞 A 2.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较中，正确的是（ ） A. 诱导融合的方法完全相同 B.所用的技术手段基本相同 C. 操作步骤基本相同 D. 都能形成杂种细胞 D3. 单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是（ ） A.由小鼠能产生抗体的B淋巴细胞与肝细胞融合 B.由小鼠一个B淋巴细胞诱导融合而成 C.由小鼠一个B淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成 D.由小鼠一个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成 D 4.只能使动物细胞融合的常用诱导方法是（ 　 ） A．PEG　　 B．灭活的病毒 　 C．电刺激 D．离心 B(1)若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞，则B细胞是取自小鼠 体内的 细胞，从小鼠体内提取分离该细胞之 前，应给小鼠注射_____________类物质。 （2）d过程是一个_____________过程，该过程的进 行常用_____________或_____________的诱导。 (3)假设仅考虑某两个细胞的融合，则可形成 种 类型的C细胞，因此需用__________培养基筛选出D细胞 用于培养，D细胞的名称是 ，其特点是 _________________________________________。 效应B 抗原 细胞融合 聚乙二醇 灭活的病毒 　选择性 　 3 既能无限增殖又能产生特异性抗体 杂交瘤细胞(4)在培养时通过________分裂方式大量繁殖。D细 胞体外培养需要注意的条件是（要求答5项） __________________________________。 （5）单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面， 与常规抗体相比，其特点是_________________。特异性强、灵敏度高 有丝 无菌、无毒的环境；充足的营养；适宜的温度和pH；适宜的气体环境