实验三:体验细胞膜的制备方法
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1.材料 新鲜的哺乳动物血液
2.用具 离心机,离心管,滴管,显微镜,载玻片,盖玻片,吸水纸,小烧杯。
3.试剂 柠檬酸钠或肝素(抗凝剂),生理盐水(质量分数为 0.9%的 NaCl 溶液),蒸馏水或清水。
4.操作要点
准备一定量的新鲜的哺乳动物血液,如羊血或猪血,在冰箱中静置一昼夜。用滴管将上清液吸去。再
吸取 1 mL 的沉淀物,放入离心管中,加入生理盐水 2 mL,在 2 000 r/min 条件下离心 5 min。去除上清液,
在沉淀中再加入生理盐水 2 mL,再离心一次,去除上清液,留沉淀备用。以上操作的目的是洗去血浆成分,
避免血浆对血细胞的缓冲作用,从而使红细胞的溶血现象更加明显。
学生的实验操作如下。
(1)取一个 5 mL 的小烧杯,加入生理盐水 2~3 mL。
(2)用滴管在沉淀的下层吸取一小滴血细胞,滴入小烧杯的生理盐水中,以达到稀释红细胞的目的,
以免观察时,由于细胞密度太大,影响观察效果。
(3)取另一个滴管,在小烧杯中轻轻搅拌,然后吸取少量的血细胞稀释液,在载玻片的中央滴很小的
一滴,加盖玻片。
(4)先在低倍镜下观察红细胞的正常形态,可见其边缘完整发亮。
(5)在盖玻片的一侧加一滴蒸馏水或清水,在另一侧非常小心地用吸水纸慢慢地吸引,防止把红细胞
全部吸入吸水纸中而影响观察。边加水边观察,注意红细胞的形态变化。红细胞会随着水流向一侧漂移,
观察时注意移动玻片。红细胞体积逐渐变大,变得非常鼓胀,在视野中可以找到少数胀破的红细胞,它们
已失去完整发亮的边缘,变成弥散状。
5.需要注意的几个问题
(1)制作临时装片时,红细胞必须稀释,而且取红细胞的量要少。
(2)在高倍镜下观察,待观察清晰时,在盖玻片的一侧滴加蒸馏水,同时在另一侧用吸水纸吸引。上
述操作均在载物台上进行,并随时调整镜筒高度,持续观察细胞的变化。在盖玻片一侧滴加蒸馏水的量要
少,不能让盖玻片处于漂浮状态;同时在另一侧用吸水纸吸引时要小心,不要将血细胞吸走。
(3)要想取得好的观察效果,所用显微镜的放大倍数应在 400 倍以上。
(4)操作中要认真观察才能看到连续的变化过程。
例 1.生物体细胞内的膜具有一定的选择透过性,即水分子可以自由通过,细胞要选择吸收的离子和小分子
也可以通过,而其他粒子、小分子和大分子则不能通过。请根据以下所提供的条件,验证细胞内膜的选择
透过性。
实验材料和用具:①新鲜的红玫瑰 ②烧杯 ③玻璃铅笔 ④质量分数为 15%的盐酸 ⑤清水 ⑥量筒
(1)红玫瑰的红色与细胞的哪一结构有关?__________________________。
(2)完善下列实验设计,验证活细胞的膜具有选择透过性
第一步:选两只相同的烧杯,用玻璃铅笔标上 A 和 B
第二步:__________________________________________________________________,
第三步:_________________________________________________________________________。
结果预测:_________________________________________________________________________。
原因分析:_________________________________________________________________________。
(3)此实验主要能验证哪些膜的选择透过性?______________________________。
【答案】液泡 在 A、B 两只烧杯中,分别加入等量的 15%的盐酸和清水 选等量的红色玫瑰花瓣,
分别放入 A、B 两只烧杯中,经过一段时间后观察 水中的花瓣仍为红色,水为无色;盐酸中的花瓣颜色
逐渐变浅,而盐酸溶液变红 盐酸将细胞杀死,膜丧失其选择性,而清水对细胞活性无伤害作用 细
胞膜和液泡膜
【解析】
试题分析:根据实验设计遵循的单一变量原则、对照原则等,围绕题意准确定位该实验是探究性实验还是
验证性实验以及实验目的,据此找出实验变量(自变量、因变量、无关变量),进而完善实验步骤并得出相
应的结论。
(1) 红玫瑰的红色与液泡中含有的色素有关。
(2)依题意可知:本实验的目的是验证活细胞的膜具有选择透过性,因此该实验的自变量是细胞是否有活性,
因变量是细胞所处的水溶液是否变红,其它对实验结果有影响的因素均为无关变量,应控制相同且适宜。
依据实验设计遵循的原则、已经给出的实验材料和用具以及不完整实验步骤可知:第二步,应在 A、B 两只
烧杯中,分别加入等量的 15%的盐酸和清水;第三步,选等量的红色玫瑰花瓣,分别放入 A、B 两只烧杯
中,经过一段时间后观察。
结果预测:因该实验是验证性实验,其实验结论是已知的,所以预测的实验结果为:水(B 烧杯)中的花瓣
仍为红色,水为无色;盐酸(A 烧杯)中的花瓣颜色逐渐变浅,而盐酸溶液变红。
原因分析:盐酸对活细胞具有很强的伤害作用,将细胞杀死而使其细胞膜失去选择透过性,而清水对细胞
活性没有伤害作用。
(3)存在于液泡中的色素,若进入溶液中,需经过液泡膜和细胞膜,所以此实验主要能验证细胞膜和液泡膜
的选择透过性。
【点睛】解答此题时需抓住问题的实质:植物花瓣的颜色由液泡中含有的色素决定,活细胞的细胞膜和液
泡膜具有选择透过性,液泡中的色素分子不能透过细胞膜和液泡膜,溶液不变色;当细胞死亡后,细胞膜
和液泡膜的选择透过性丧失,液泡中含有的色素分子能够进入溶液而导致溶液变色;盐酸可导致细胞死亡。
在此基础上,围绕题意找准实验变量并根据实验设计遵循的原则,既可对相关问题作出解答。
例 2.下列有关细胞膜制备及观察的叙述,正确的是( )
A. 家鸡的红细胞是最佳的实验材料
B. 若选用洋葱鳞片叶表皮细胞应先用蛋白酶去除细胞壁
C. 制备细胞膜应先利用吸水涨破法,再利用差速离心法获取
D. 可以用高倍镜直接进行观察
【答案】C
【解析】家鸡的红细胞为正常细胞,有细胞核和各种细胞器,因此不能用家鸡的红细胞做实验材料,A 错
误;去除植物细胞的细胞壁需使用纤维素酶和果胶酶,B 错误;哺乳动物红细胞放在清水中吸水涨破,再离
心时将血红蛋白和细胞膜分离,C 正确;用显微镜观察时,需先在低倍镜下找到要观察的目标,然后再用高
倍镜观察,D 错误。
1、研究细胞膜常用的材料是( )
A.变形虫
B.受精卵
C.蛙成熟的红细胞
D.哺乳动物成熟的红细胞
【答案】 D
【解析】 研究细胞膜常用的材料是哺乳动物成熟的红细胞,因为它没有细胞核及众多的细胞器,故选 D。
2、下列有关细胞膜的制备及观察的叙述,正确的是( )
A.家鸡的红细胞是最佳的实验材料
B.若选用洋葱鳞片叶内表皮细胞,应先用镊子去除细胞壁
C.制备细胞膜可先利用吸水涨破法,再利用离心法
D.用显微镜观察时,可直接用高倍显微镜找到目标
【答案】 C
【解析】 家鸡不属于哺乳动物,它的红细胞中含有细胞核和众多具膜结构细胞器,不宜用于制备细胞膜,
A 错误;植物细胞太小,不能用镊子去除细胞壁,B 错误;红细胞吸水涨破后,经过离心,细胞膜可与其他
成分分离开来,C 正确;用显微镜观察时,应先用低倍镜找到目标,然后再换用高倍镜进行观察,D 错误。
3.疟原虫可以寄生在红细胞内,使人患疟疾,要判断一个人是否患疟疾,应取血样放在什么溶液中制片检查
( )
A. 质量分数为 0.9%的 NaCl 溶液
B. 清水
C. 浓盐水
D. 质量分数为 0.1%的葡萄糖溶液
【答案】B
【解析】红细胞在清水中易吸水而破裂。
4.下列关于制备细胞膜的叙述,错误的是( )
A. 鸟类的红细胞不是制备纯净细胞膜的理想材料
B. 人的成熟红细胞在生理盐水中不会发生水分子的跨膜运输,细胞体积不变
C. 叶肉细胞因有细胞壁的存在,使提取细胞膜更复杂
D. 提取出的猪的成熟红细胞的磷脂分子在空气—水界面上的面积是红细胞表面积的两倍
【答案】B
【解析】鸟类的细胞有细胞核和各种具膜结构的细胞器,不是制备细胞膜的理想材料,A 正确;人成熟红
细胞在生理盐水中也会发生水分子跨膜运输,但细胞体积不变,是因为运输达到动态平衡,B 错误;植物叶
肉细胞有细胞壁,提取细胞膜前需要去除细胞壁,C 正确;猪成熟红细胞没有细胞核和各种具膜结构的细胞
器,膜是由磷脂双分子层组成,在空气——水界面上的面积是红细胞表面积的两倍,D 正确。
5.体验制备细胞膜的方法实验中,材料选用哺乳动物的成熟红细胞,关键原因是红细胞( )
A. 是动物细胞
B. 有细胞核
C. 有各种细胞器
D. 无细胞核及各种细胞器
【答案】D
【解析】哺乳动物成熟的红细胞无核膜和各种细胞器的膜,只有细胞膜,容易提取纯净的细胞膜。
6.制备细胞膜时,稀释红细胞的液体和使细胞涨破的方法分别是( )
A. 清水,将其放入生理盐水中
B. 9%的 NaCl 溶液,将其放入清水中
C. 生理盐水,将其放入清水中
D. 清水,将其放入 9%的 NaCl 溶液中
【答案】C
【解析】稀释红细胞应用生理盐水,以保持红细胞的正常形态;使红细胞涨破应用清水。
7.在制备细胞膜时,显微镜下观察红细胞的动态变化是( )
①细胞破裂 ②凹陷消失 ③内容物流出 ④细胞体积增大
A. ②④①③
B. ④②①③
C. ④①③②
D. ①③②④
【答案】B
【解析】制备细胞膜时用的是吸水涨破法,故红细胞的动态变化为④②①③。
8、科学家在进行细胞膜化学成分的分析时,需制备比较纯净的细胞膜,从真核细胞分离出比较纯净的细胞膜
较为困难,因为会有核膜和细胞器膜的混杂。而哺乳动物(或人)的成熟红细胞,没有细胞核和各种细胞器,将
其作特殊处理就是比较纯净的细胞膜,在生物学上称为“血影”。对“血影”的分析得知,其化学组成如下:蛋
白质 49%、脂质 43%、糖类 8%。请回答:
(1)如何处理红细胞才能使其发生溶血现象?
__________________________________________________________________________。
(2)“血影”的化学成分中,脂质主要是哪一类?
__________________________________________________________________________。
(3) 红 细 胞 溶 血 后 , 溶 出 到 细 胞 外 的 物 质 应 该 是 ________________________ , 这 种 物 质 的 特 性 是
________________________________________。因此,红细胞具有________的功能。
【答案】 (1)放在蒸馏水中 (2)磷脂 (3)血红蛋白 容易和氧结合,又容易与氧分离 运输氧
【解析】 红细胞内的物质具有一定的浓度。如果把细胞放在清水里或蒸馏水里,水会进入细胞,使细胞
涨破,细胞内的物质流出来,从而出现溶血现象,通过该种方法所得到的细胞膜较纯净。血影实际上就是
细胞膜,细胞膜的主要成分是脂质和蛋白质,脂质中磷脂含量最丰富。红细胞溶血后,溶出到细胞外的物
质是血红蛋白,血红蛋白容易与氧结合,又容易与氧分离,因此,红细胞具有运输氧气的功能。
9.为获得纯净的细胞膜用于研究其结构与功能,请完成下列实验设计并分析有关问题:
(1)应选取人体下列哪种细胞做实验( )
A.成熟红细胞 B.神经细胞
C.白细胞 D.口腔上皮细胞
(2)选用该材料的理由是___________________________________________________
________________________________________________________________________。
(3)将选取的上述材料放入____________中,一段时间后细胞将破裂。
(4)经过(3)的实验步骤后,可用下列哪两种方法获得纯净的细胞膜(多选)( )
A.静置 B.加热
C.离心 D.过滤
(5)通过有关方法,测得多种膜的化学成分,如下表:
① 依 据 上 表 数 据 , 请 分 析 构 成 细 胞 膜 与 细 胞 器 膜 的 化 学 物 质 组 成 上 的 共 同 点 是 :
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
②化学物质组成的主要区别是:_____________________________________________
________________________________________________________________________。
【答案】(1)A (2)细胞核和许多细胞器也有膜,这些膜若与细胞膜混在一起就无法得到较纯净的细胞膜,
而成熟的红细胞中没有细胞核和众多的细胞器 (3)清水 (4)CD (5)①都有脂质和蛋白质 ②细胞膜除了
有脂质和蛋白质外,还有少量的糖类,而细胞器膜则不含糖类
【解析】人和其他哺乳动物的成熟红细胞除细胞膜外无其他膜结构,通过吸水涨破,从而得到较纯净的细
胞膜。细胞吸水涨破后先离心,将细胞膜与细胞质中的其他物质分开,再过滤可得到较纯净的细胞膜。
10.为获得较纯净的细胞膜,以研究其结构与功能,请你帮助完成下列实验分析并回答相关问题。
(1)最好选取猪的哪种细胞做实验( )
A.成熟红细胞 B.神经细胞
C.白细胞 D.口腔上皮细胞
(2)你选择该材料的原因是________________________________________________________。
(3)将选取的材料放入__________中,一段时间后细胞将破裂。
(4)经过(3)的实验步骤后,可用下列哪些方法进一步获得较纯净的细胞膜( )
A.静置 B.加热 C.离心 D.过滤
(5)将细胞膜的成分分离提纯后,用________可鉴定其中的蛋白质,具体现象是________。
【答案】(1)A (2)成熟红细胞中没有细胞核和众多的细胞器 (3)蒸馏水 (4)C,D (5)双缩脲试剂 产生
紫色反应
【解析】(1)(2)哺乳动物成熟红细胞内无细胞核和众多细胞器,故利于提取较纯净的细胞膜。
(3)动物细胞在蒸馏水中会吸水涨破,其内容物流出,即可得到细胞膜。
(4)由于内容物与细胞膜密度不同,可通过离心、过滤获得较纯净的细胞膜。
(5)蛋白质可与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应。
11.下列关于细胞结构与成分的叙述,错误的是( )
A. 细胞膜的完整性可用台盼蓝染色色法进行检测
B. 检测氨基酸的含量可用双缩脲试剂进行显色
C. 若要观察处于细胞分裂中期的染色体可用醋酸洋红液染色
D. 斐林试剂是含有 Cu2+的碱性溶液,可被葡萄糖还原成砖红色
【答案】B
【解析】A 选项,台盼蓝是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性。还常用于检测细胞是否有活性。
活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。A 正确。
B 选项,双缩脲是用来检测蛋白质的,可以和肽键发生作用,氨基酸当中没有肽键,不能和双缩脲发生反应。
B 错误。
C 选项,醋酸洋红是碱性染料,可以将染色体染成红色,用于观察分裂中期染色体的形态。C 正确。
D 选项,斐林试剂含有 Cu2+,可以和还原性糖作用产生砖红色沉淀。D 正确。