第11单元 生物技术实践
第1讲 传统发酵技术的应用
《选修一》P1-9
考纲要求
运用发酵加工食品的基本方法
利用发酵技术来生产特定的产物
[核心素养]
1.生命观念——结构与功能观:发酵菌种的结构与功能的关系。
2.科学思维——比较与分类:比较制作果酒、果醋、腐乳、泡菜
的制作原理、流程、发酵条件等的异同。
3.科学探究——设计实验探究理想的发酵条件。
4.社会责任——关注食品安全,倡导健康的生活方式。
第1讲需要掌握的内容
考点1 果酒和果醋的制作
一、 制作果酒和果醋时使用的菌种的比较
二、 制作果酒和果醋的原理及发酵条件
考点2 腐乳和泡菜的制作
一、 制作腐乳的发酵菌种、原理、流程及注意事项
二、 制作泡菜的原理、流程、关键操作及影响因素
三、 检测亚硝酸盐含量
三、 制作果酒和果醋的实验流程
四、 泡菜制作过程中乳酸菌、乳酸和亚硝酸盐的变化情况
四、 制作果酒和果醋的结果分析和评价
考点1 果酒和果醋的制作
一、制作果酒和果醋时使用的菌种的比较
《选1》P2-3 《金版》P256
比较
项目 菌种 生物
类群
代谢
类型
菌种
来源
果酒
制作
真核
生物 异养__________型
果醋
制作
____
生物 异养__________型
酵母菌 兼性厌氧 附着在葡萄皮上
的酵母菌
醋酸(杆)菌 原核 好氧 变酸的酒的表面
的菌膜
酵母菌生存的适宜温度为__________℃;繁殖方式为_________
醋酸菌生存的适宜温度为__________℃;繁殖方式为__________
18-25 出芽生殖
30-35 二分裂
(一)制作果酒的原理及发酵条件
1.原理
①有氧条件下,酵母菌大量繁殖,进行有氧呼吸,反应式如下:
②无氧条件下,酵母菌进行酒精发酵,反应式如下:
2.发酵条件
(1)温度:一般_________℃,最适为_______℃左右
(2)氧气:前期_______氧气,后期________氧气
(3)时间:____________天
二、制作果酒和果醋的原理及发酵条件
18-25 20
需要 不需要
先通气(进行有氧呼吸)后密封(进行无氧呼吸即酒精发酵)
10-12
影响酒精发酵的主要环境条件有 、 和 等温度 氧气 pH
C6H12O6 + 6O2 + 6H20 → 6CO2 + 12H20
酶
C6H12O6 → 2C2H5OH + 2CO2
酶
(二)制作果醋的原理及发酵条件
1.原理
①氧气、糖源充足时,醋酸菌进行的反应如下:
②氧气充足,但缺少糖源时,醋酸菌进行的反应如下:
2.发酵条件
(1)温度:最适为_______℃左右
(2)氧气:_______充足的氧气
(3)时间:____________天
30-35
需要
7-8
【醋酸菌将乙醇变成乙醛,再将乙醛变成醋酸:2C2H5OH+O2
→2CH3CHO(乙醛)+2H2O;2CH3CHO+O2 →2CH3COOH(醋酸)】
C6H12O6 +2O2 → 2CH3COOH+2CO2+2H20酶
C2H5OH + O2 → CH3COOH + H2O酶
(三)制作果酒和果醋的实验流程
1.实验大致流程
挑选葡萄 → 冲洗 → 榨汁 → 酒精发酵 → 醋酸发酵→
果酒
→
果醋2.实验流程注意事项及分析
②冲洗葡萄时不能_____________,原因是____________________
____________________________________________________。
反复冲洗 防止洗去葡萄皮上的
野生酵母菌,导致菌种流失,不能正常发酵
③先冲洗葡萄还是先除去葡萄的桔梗?为什么?
应该先冲洗葡萄,后除去桔梗。 因为这样能避免除去枝梗时
引起葡萄破损,增加被杂菌污染的机会
①葡萄酒呈现深红色的原因是什么?
红葡萄皮的色素进入发酵液
④应该从哪些方面防止发酵液被污染?
a.榨汁机要洗净并晾干
b.发酵装置要洗净并用70%的酒精消毒,或用洗洁精洗涤
c.装入葡萄汁后,封闭充气口
完成《金版》P257【深化探究】2.
2.果酒制作时,尝试分析应从哪些方面防止发酵液被污染(至少答
两点)?
(1)需要从发酵制作的过程进行全面的考虑,因为操作的每一步都
可能混入杂菌。例如:榨汁机、发酵装置要清洗干净
(2)每次排气时只需拧松瓶盖、不要完全揭开瓶盖等。
⑤在实际生产中,要对发酵液进行煮沸处理,其目的是什么?
消灭发酵液中的杂菌
整个发酵制作的过程都要防止杂菌污染!
3.发酵装置及相关问题分析
《选1》P4 图1-4a
使用该装置装入葡萄汁时要留有大约1/3
的空间,且每隔12h左右要将瓶盖拧松一次
(注意:不是打开瓶盖),此后再将瓶盖
拧紧。当发酵产生酒精后,再将瓶盖打开,
盖上一层纱布。
【分析1】发酵液装瓶后为什么要保持1/3
的剩余空间?
①利于酵母菌进行有氧呼吸快速繁殖,耗尽氧气后再进行酒精发酵
②防止发酵过程中产生的CO2造成发酵液的溢出
【分析2】每隔一段时间(12h)拧松瓶盖的原因是什么?
放出发酵过程中产生CO2 ,防止瓶内气压过高引起爆裂。
【分析3】此后再将瓶盖拧紧的目的是什么?
适时排气
防止进入O2,继续进行酒精发酵
3.发酵装置及相关问题分析
《选1》P4 图1-4a
使用该装置装入葡萄汁时要留有大约1/3
的空间,且每隔12h左右要将瓶盖拧松一次
(注意:不是打开瓶盖),此后再将瓶盖
拧紧。当发酵产生酒精后,再将瓶盖打开,
盖上一层纱布。
【分析5】当发酵产生酒精后,再将瓶盖打开,盖上一层纱布的目
的是什么? 制作有氧条件,进行醋酸发酵
【分析6】分析此发酵装置不足之处? 易被杂菌污染
【分析5】酒精发酵过程中,要保持缺氧、
酸性环境的原因是什么?
在缺氧酸性的发酵液中,酵母菌可以生长繁殖,而绝大多数其
他微生物都因无法适应这一环境而受到抑制。
3.发酵装置及相关问题分析
《选1》P4 图1-4b
【分析1】充气口的作用是什么?
醋酸发酵时充入无菌空气(氧气)
【分析2】排气口的作用是什么?
酒精发酵时排出二氧化碳
【分析3】出料口的作用是什么?
取样 【如取样检测是否有酒精生成:与酸性的重铬酸钾反应,
观察是否呈现灰绿色】
【分析4】选择长而弯曲的胶管而不是直管与瓶身连接作为排气
口的原因是什么? 防止空气中微生物的污染
【分析4】结合果酒、果醋的制作原理,应如何使用这个发酵装置?
制酒时,应关闭充气口;制醋时,应将充气口连接气泵,输入氧气
3.甲、乙、丙三个制作果酒的发酵瓶中,在温度等适宜的条件下
进行发酵,如图所示。发酵过程中,每隔一段时间均需排气一次。
据图分析:
①发酵瓶甲的错误是_____________________,导致发酵中出现的主
要异常现象是______________________________________________
________________________________________。
②发酵瓶丙的错误是________________________________________,
导致发酵中出现的主要异常现象是__________________________。
注:各发酵瓶的左侧管为充气管,右侧管为排气管
未夹住发酵瓶的充气管
酵母菌呼吸产生的乙醇被氧化成醋酸,所以发酵液
从充气管流出,发酵液变酸
瓶中发酵液过多,淹没了排气管在瓶内的管口
发酵液会从排气管流出
①放出气体:
②放热:
③颜色变化:
④菌体数量的变化:
⑤PH值变化:
四、 制作果酒和果醋的结果分析和评价
(一)果酒制作过程中发酵液的变化
CO2
初期发酵液中酵母菌数目增多,后期不再增多
发酵过程产热
随着酒精度数的提高,红葡萄皮的色素进入发酵液,
使葡萄酒呈现深红色。
CO2溶于发酵液而使PH下降
(二)如何评价果酒的制作是否成功
1. 通过嗅闻和品尝进行初步鉴定
2. 用显微镜观察酵母菌
3. 重铬酸钾检验酒精的存在
【取样发酵液,加入3mol/l的H2SO4,再加入重铬酸钾】
(三)如何评价果醋的制作是否成功
1. 观察菌膜的形成
2. 嗅闻和品尝进行初步鉴定
3. 检测和比较醋酸发酵前后的pH作进一步的鉴定
4. 显微镜下观察发酵液中是否有醋酸菌,并统计其数量作进一步
鉴定
(四)提高果酒、果醋品质的方法
1. 直接在果汁中加入人工培养的酵母菌
通过分离葡萄表面附着的酵母菌,获得纯净的菌种
2. 直接在果酒中加入醋酸菌
购买当地生产食醋的工厂或菌种保藏中心的醋酸菌菌种;或者尝
试从食醋中分离醋酸菌
1.兴趣小组参加贫困县精准扶贫的山区苹果酒、苹果醋建厂的调研项
目。拟设计采用发酵罐生产。回答下列问题:
(1)制备高产果酒的酵母菌菌株。①若利用该装置制备果酒,需接种的
菌种是________菌。在秋季的葡萄园中,应在葡萄成熟落地流出果汁
的周围土壤选取土样筛选菌株,理由是:__________________
__________。果酒发酵所依据的原理是____________________(用化
学反应简式表示)。
②若利用该装置制备果醋,需接种是醋酸菌,若发酵液中无糖类但有
乙醇,则该发酵菌发酵获得醋酸的途径是:乙醇→______→醋酸。
(2)苹果酒、苹果醋的生产。①若利用该装置制备果酒时,早期通入除
菌后的空气,目的是____________________;若利用该装置制备果醋,
整个过程中需不间断地通入除菌空气,原因______________
________________________________________________________。
②苹果醋生产可在苹果酒生产基础上改变________和发酵条件进行;
评价生产苹果酒、苹果醋优劣的最常用方法是________________。
酵母
该土壤中酵母菌
大量繁殖 C6H12O6→2C2H5OH+2CO2
乙醛
使酵母菌大量繁殖
醋酸菌进行的是
有氧发酵(或短暂中断通入氧气,会导致醋酸菌死亡)
菌种
嗅闻和品尝
2.天津独流老醋历史悠久、独具风味,其生产工艺流程如下图。
(1)在糖化阶段添加酶制剂需要控制反应温度,这是因为酶______
________________________________________________。
(2)在酒精发酵阶段,需添加酵母菌。在操作过程中,发酵罐先通
气,后密闭。通气能提高________的数量,有利于密闭时获得更多
的酒精产物。
(3)在醋酸发酵阶段,独流老醋采用独特的分层固体发酵法,发酵
30 d。工艺如下。
在最适
温度条件下催化能力最强
酵母菌
①发酵过程中,定期取样测定醋酸杆菌密度变化,趋势如图。据图
分析,与颠倒前相比,B层醋酸杆菌在颠倒后密度变化的特点是
_________________________,由此推测,影响醋酸杆菌密度变化
的主要环境因素是_________________________________。
②乳酸含量高是独流老醋风味独特的重要成因。发酵过程中,发酵
缸中_________________________________________层的醋醅有利
于乳酸菌繁殖,积累乳酸。
③成熟醋醅中乳酸菌的种类明显减少,
主要原因是发酵后期营养物质消耗等
环境因素的改变,加剧了不同种类乳
酸菌的________________,淘汰了部
分乳酸菌种类。
先快速增长后趋于稳定
氧气、营养物质、pH
颠倒前的B层和颠倒后的A(或不翻动,或下)
种间竞争(或竞争)
2.苹果醋是以苹果汁为原料经发酵而成的。回答下列问题:
(1)酵母菌的呼吸代谢途径如下图所示。图中过程①和②是苹果醋
生产的第一阶段,在酵母菌细胞的____________中进行,其产物乙
醇与__________试剂反应呈现灰绿色,这一反应可用于乙醇的检验;
过程③在酵母菌细胞的________中进行。与无氧条件相比,在有氧
条件下,酵母菌的增殖速度______。
(2)第二阶段是在醋酸杆菌的作用
下将第一阶段产生的乙醇转变为醋
酸的过程,根据醋酸杆菌的呼吸作
用类型,该过程需要在________条件下才能完成。
(3)在生产过程中,第一阶段和第二阶段的发酵温度不同,第一阶
段的温度________(填“低于”或“高于”)第二阶段的。
(4)醋酸杆菌属于________核生物,其细胞结构中________(填“含
有”或“不含有”)线粒体。
细胞质基质
重铬酸钾
线粒体
快
有氧
低于
原 不含有
《三维设计》P106【练热点】1.
【补充练习】1.下图为葡萄酒的发酵装置示意图,回答下列问题:
(1)发酵初期,集气管中收集不到气体,原因是_______________
___________________________________________。
(2)集气管中的气体主要是______,可用_______________检测。
(3)发酵过程中,酵母菌种群数量增长呈“________”型增长。
(4)若发酵液表面出现菌膜,最可能的原因是__________________,
该菌膜中的微生物最可能是________________。
酵母菌只进行
有氧呼吸
CO2 澄清的石灰水
S
发酵瓶漏气
醋酸菌
【补充练习】2.下图为枸杞果酒的生产工艺流程简图,据图回答问
题。选料→?→粉碎→灭菌→接种→发酵→?→果酒
(1)流程中“?”处的内容应为________、________。
(2)制作果酒时,温度应该控制在________。果酒酿造过程中如果果
汁灭菌不合格,含有醋酸菌,在酒精发酵旺盛时,醋酸菌能否将果
汁中的糖发酵为醋酸?________。说明理由。_________________
_________________________________________________________
_________________________________________________________
_____________________________________________。
(3)果酒制作离不开酵母菌,与醋酸菌相比,酵母菌在结构上的主要
特点是____________________________。
(4)枸杞果酒制作过程中,接种完成后要先向发酵罐中通入一段时间
的无菌空气,目的是________________________________________。
(5)果酒制作是否成功,需发酵后用______________来鉴定,在
________条件下,该物质与酒精反应呈现________色。
冲洗 过滤
18-25℃
不能 因醋酸菌是需氧型
酒发酵的环境是无氧环境(或因醋酸菌需要在有氧且温度是30~35
℃的条件下,才能将糖转化为醋酸,而此时发酵罐中的条件是无
氧且温度是18~25 ℃)
有核膜包被的细胞核
在有氧条件下,使酵母菌迅速繁殖,增加数量
重铬酸钾溶液
酸性 灰绿
【补充练习】3.如图是果酒果醋的制作流程(如图所示)。请据图回答
以下问题:
(1)在葡萄酒制作过程中出现葡萄酒变酸现象,其原因可能是发酵液中
混有________菌发酵产生乳酸;也可能是_____________________
_____________________________________________,导致________菌
生长繁殖,产生醋酸。
(2)某同学尝试用罐头瓶制作果酒,在培养过程中,每隔12 h左右将瓶
盖拧松一次,此后再拧紧,这样做的主要目的:一是___________
__________,二是避免氧气进入和杂菌污染。
(3)在酸性条件下,可用_________来检测果酒发酵是否成功。若要进
一步检测所得果酒中活体酵母菌的密度时,一般采用_____________法,
但此种方法最终计算得出的菌体数往往比实际数目低。
(4)在果酒制作中,加入的新鲜葡萄汁没有经过灭菌处理,但是在制出
的果酒中基本检测不出酵母菌以外的杂菌,从生态学角度分析: 一
是酵母菌与杂菌之间存在________关系;二是由于果酒中的______不
利于杂菌的生长
乳酸 发酵装置密闭不严(答案
合理即可,如排气、防止装置爆裂、降压等) 醋酸
放掉发酵产
生的CO2
重铬酸钾
稀释涂布平板
竞争 酒精
【补充练习】4.蓝莓富含花青素等营养成分,具有保护视力、软化
血管、增强人体免疫力等功能。某同学尝试用蓝莓来制作蓝莓果酒
和蓝莓果醋。
(1)制酒中利用的微生物是________,取样后可用______________观
察该微生物。发酵时一般要先通气,通气的目的是______________
_____________________。制酒过程中可在酸性条件下用橙色的重铬
酸钾检验酒精的存在,检验后颜色变成____________。
(2)酿制成功的蓝莓果酒如果暴露在空气中酒味会逐渐消失而出现醋
酸味,尤其是气温高的夏天更易如此,分析其原因是____________
__________________________________________________________
____________________。醋酸菌将乙醇变为醋酸的环境条件是糖源
________(填“充足”或“缺少”)。
(3)酿制蓝莓果酒时,并不需要对蓝莓进行严格的消毒处理,这是因
为在_________________的发酵液中,绝大多数微生物无法适应这一
环境而受抑制。
(4)为鉴定蓝莓果醋是否酿制成功,除可以通过观察菌膜、尝、嗅之
外,还可以通过检测和比较___________________作进一步的鉴定。
酵母菌 (光学)显微镜
酵母菌可在有氧
条件下大量繁殖
灰绿色
醋酸菌是好氧
最适生长温度为30~35 ℃,(夏天温度较高,导致醋酸菌大量生长
产生醋酸)
缺少
缺氧、呈酸性
(醋酸)发酵前后的pH