1.若要利用某目的基因(见图甲)和P1噬菌体载体(见图乙)构建重组DNA(见图丙),限制性核酸内切酶的酶切位点分别是BglⅡ(A↓GATCT)、EcoRⅠ(G↓AATTC)和Sau3AⅠ(↓GATC)。下列分析合理的是( )A.用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体B.用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体C.用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体D.用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体解析:解答本题的关键是要看清切割后目的基因插入的方向,只有用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体,构建的重组DNA中RNA聚合酶在插入的目的基因上的移动方向才一定与图丙相同。答案:D2.下图是利用基因工程技术生产可食用疫苗的部分过程,其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ为四种限制性核酸内切酶。下列有关说法中正确的是( )
A.图示过程是基因工程的核心步骤,所需的限制性核酸内切酶均来自原核生物B.图示中构建基因表达载体时,需用到一种限制性核酸内切酶C.一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的核糖核苷酸序列D.抗卡那霉素基因的存在有利于将含有抗原基因的细胞筛选出来解析:题图示表示基因表达载体的构建过程,这是基因工程的核心步骤,所需的限制性核酸内切酶一般来自原核生物,A错误;此表达载体构建时需要用到EcoRⅠ、PstⅠ限制性核酸内切酶,B错误;限制酶具有特异性,即一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列并在特定的位点切割,C错误;抗卡那霉素基因作为标记基因,主要作用是筛选含有目的基因的受体细胞,D正确。答案:D3.(2019·月考)限制酶是一种核酸切割酶,可辨识并切割DNA分子上特定的核苷酸碱基序列。下图为四种限制酶BamHⅠ、
EcoRⅠ、HindⅢ以及BglⅡ的识别序列。箭头表示每一种限制酶的特定切割部位,其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合?其正确的末端互补序列为( )A.BamHⅠ和EcoRⅠ;末端互补序列-AATT-B.BamHⅠ和HindⅢ;末端互补序列-GATC-C.EcoRⅠ和HindⅢ;末端互补序列-AATT-D.BamHⅠ和BglⅡ;末端互补序列-GATC-解析:限制酶所识别的是特定的碱基序列,并在特定部位进行切割,不同的限制酶识别不同的核苷酸序列并识别不同的切点,黏性末端不同。但不同的黏性末端有时是可以进行拼接的,只要切下的游离碱基互补即可互补黏合,由题图示可知,BamHⅠ和BglⅡ都可形成黏性末端-GATC-,故末端互补序列为-GATC-,D项正确。答案:D4.如图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化,图中依次表示限制酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是( )
A.①②③④ B.①②④③C.①④②③D.①④③②解析:限制酶可在特定位点对DNA分子进行切割;DNA聚合酶在DNA分子复制时将脱氧核苷酸连接成脱氧核苷酸链;DNA连接酶可将限制酶切开的磷酸二酯键连接在一起;解旋酶的作用是将DNA双链解开螺旋,为复制或转录提供模板。答案:C5.下列关于载体的叙述中,错误的是( )A.载体与目的基因结合后,实质上就是一个重组DNA分子B.对某种限制酶而言,载体最好只有一个切点,但还要有其他多种酶的切点C.目前常用的载体有质粒、λ噬菌体的衍生物和动植物病毒D.载体具有某些标记基因,便于对其进行切割解析:运载体与目的基因结合后,就会形成一个重组DNA分子,A正确;运载体中,对某种限制酶而言,最好只有一个切点,但还要有其他多种限制酶的切点,便于与目的基因定向连接,B正确;目前常用的载体有质粒、λ噬菌体的衍生物和动植物病毒,C正确;运载体上要具有某些标记基因,便于筛选重组DNA,D错误。答案:D