1．(2019·上海市虹口区一模)在分离和纯化土壤中自生固氮菌的实验中，不合理的操作是( )A．取土表3～5cm以下土层的土壤B．用无菌水稀释土壤样品C．使用牛肉膏蛋白胨培养基D．用接种环进行划线接种解析：土表3～5cm以上的土壤比较干燥，自生固氮菌的数量较少，因此取土表3～5cm以下土层的土壤，A正确；用无菌水稀释土壤样品，否则可能造成土壤被杂菌污染，B正确；自生固氮菌可以在缺乏氮源的培养基中生存，牛肉膏蛋白胨培养基含有氮源，用其分离出的微生物既有自生固氮菌也有其他的杂菌，无法纯化自生固氮菌，C错误；接种自生固氮菌时可用接种环进行划线接种，也可用涂布器用稀释涂布平板法接种，D正确。答案：C2．(2019·北京市通州区一模)下列有关微生物培养的叙述正确的是( )A．通常使用液体培养基分离获得细菌单菌落B．若培养基需要调节pH，应该在灭菌后进行C．用显微镜直接计数固体培养基中微生物数量D．倒置平板可防止培养基被滴落的冷凝水污染解析：常用固体或半固体培养基分离获得细菌单菌落，
液体培养基无法分离，A错误；若培养基需要调节pH，应该在灭菌前进行，B错误；显微镜直接计数法是测定培养液中微生物数量的方法，固体培养基上用稀释涂布法直接计数单个菌落数，C错误；平板倒置是避免冷凝的液体掉到培养基上，污染培养基，D正确。答案：D3．在平板划线操作中，错误的是( )A．将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红B．将烧红的接种环在火焰旁边冷却C．接种环在平板上划线位置是随机的D．在挑取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过火焰解析：接种环灼烧及接种前后试管口要通过火焰，其目的是为了防止杂菌污染，将接种环先冷却再接种可以避免高温烫死菌种，因此A、B、D都是正确的；在平板上划线时，要划三至五条平行线，而不是随机划线，因此C选项错误。答案：C4．(2019·江苏省月考)如下图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤，下列说法错误的是( )A．①步骤使用的培养基已经灭菌并调节过pHB．①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行
C．④在恒温培养箱中培养时需要将平板倒置D．④操作过程中，需灼烧接种环5次解析：由题图可知，①是倒平板，②是用接种环沾取菌液，③是进行平板划线，④是培养结果。①步骤表示倒平板，在倒平板之前已经灭菌并调节过pH，A正确；①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行，防止被杂菌污染，B正确；将④放在恒温培养箱中培养时，需要将平板倒置，防止皿盖上的水珠滴落污染培养基，C正确；接种环在每次接种前和接种结束后都要通过灼烧来灭菌，所以完成步骤④中5次划线操作前都要灼烧灭菌，接种结束后还需灼烧灭菌1次，防止造成污染，由此可见，完成步骤④共需灼烧接种环6次，D错误。答案：D5．(2019·安徽省合肥市三质检)依据所学生物技术知识，分析回答下列问题：(1)日常生活中烹饪产生的油烟冷却后形成液态的油脂，工业生产中提取玫瑰精油的原理与之相同，该提取方法的名称是______________。(2)为解决生活污水中油脂对环境造成的污染。科研人员要从污水中筛选出分解油脂能力最强的微生物。请分析回答：
①图甲和图乙所代表的方法中能对微生物进行分离和计数的是______________法。用该方法统计样本菌落数时______________(“需要”或“不需要”)设置空白对照组，原因是________。②图乙中涂布前需对涂布器进行的操作是__________。③对分离油脂分解菌的选择培养基成分的特别要求是______________。④接种后，需要将培养细菌的固体培养基倒置培养的原因是______________。解析：(1)玫瑰精油的性质稳定，难溶于水，易溶于有机溶剂，能随水蒸气一同蒸馏，因此提取玫瑰精油的方法是水蒸气蒸馏法，其原理是利用水蒸气将挥发性强的植物油携带出来。(2)①根据以上分析可知，可以对微生物进行分离和计数的接种方法是稀释涂布平板法，即题图乙所示方法；稀释涂布平板法中，为了判断培养基是否被污染，需要设置空白对照组。②在稀释涂布平板法中，对于涂布器需要用酒精浸泡，然后在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却8～10秒。
③油脂分解菌具有分解油脂的能力，而其他微生物没有，因此在培养基中加入油脂作为唯一碳源可以将油脂分解菌分离出来。④接种后将培养细菌的固体培养基倒置培养，可以避免培养皿盖上的水珠滴入培养基，造成污染。答案：(1)水蒸汽蒸馏法(2)①稀释涂布平板 需要 因为需要判断培养基是否被污染②用酒精浸泡，在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却8～10秒③以油脂为唯一碳源④避免培养皿盖上的水珠滴入培养基，造成污染
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