单元过关检测(十一)(时间:45分钟 分值:100分)1.(12分)研究发现土壤中的一种极毛杆菌,能够以3,4二甲苯酚为碳源,对土壤残留农药中的该成分有较好的降解作用。请回答下列问题:(1)某兴趣小组欲从土壤中筛选出能高效降解3,4二甲苯酚的极毛杆菌菌株,分离极毛杆菌的土样应来自____________________土壤,在配制筛选极毛杆菌的培养基时对其碳源的选择应___________________________________________________________,在实验室一般采用________法对配制的培养基进行灭菌。(2)分离纯化极毛杆菌时,首先需要用________对土壤浸出液进行梯度稀释,理由是___________________________________,该分离纯化方法为________。若采用平板划线法分离土样中的极毛杆菌,在做第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线,这样做的目的是________________________________________________。(3)为了统计土壤浸出液中极毛杆菌的总数,他们选用104、105、106稀释倍数的稀释液进行涂布,每种稀释液都设置了3个培养皿。为了保证实验的准确性,还应设置的一组对照实验是______________。解析:(1)筛选目的菌时,应从含该菌丰富的土壤中采集土样,极毛杆菌对土壤残留农药中的3,4二甲苯酚有较好的降解作用,因此应从该物质含量高的土壤取样。筛选某种微生物的选择培养基应有利于该种微生物生存,而不利于其他微生物生存,极毛杆菌能够以3,4二甲苯酚为碳源,因此配制培养基时应以3,4二甲苯酚为唯一碳源,实验室对培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌法。(2)分离纯化极毛杆菌时,首先需要用无菌水对土壤浸出液进行梯度稀释,这样既可避免杂菌污染,又可将极毛杆菌分散,以便在培养基表面形成单个菌落。利用系列梯度稀释的方法对微生物进行分离纯化属于稀释涂布平板法。利用平板划线法分离该菌时,在做第二次及以后划线时,总是从上一次划线的末端开始,这样可以将聚集的菌体逐步稀释以便得到单个菌落。(3)通过稀释涂布平板法计数该菌时,需要设置一组空白对照组,即不接种的空白培养基。答案:(1)3,4二甲苯酚含量高的 以3,4二甲苯酚为唯一碳源 高压蒸汽灭菌 (2)无菌水 土壤浸出液中菌的浓度高,直接培养很难分离得到单菌落,同时用无菌水可以防止杂菌污染 稀释涂布平板法 将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落 (3)不接种的空白培养基2.(12分)下图是生产乙醇的基本工艺流程图,请回答下列问题:(1)图中①过程选取富含纤维素的土壤,
在鉴定和筛选所需微生物时需用________对纤维素进行染色并制成选择培养基,最后还要在平板培养基上分离纯化目的菌。为避免杂菌污染,接种时要在________旁操作。(2)图中②过程获得的酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分,分别为C1酶、Cx酶和________。前两种酶使纤维素分解成________,第三种酶将其进一步分解成葡萄糖。⑤过程常用的菌种是________。(3)用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中纤维素分解菌数量。在对应稀释倍数为106的培养基中,取0.2mL稀释液涂布,得到以下统计结果:涂布了三个平板,统计的菌落数是210、240和246;请计算每毫升原液中的菌体数是________个。解析:(1)纯化纤维素分解菌时,在鉴定和筛选微生物时需要用刚果红对纤维素进行染色,通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。为避免杂菌污染,接种时需要在酒精灯火焰旁进行。(2)纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶三种组分。前两种酶使纤维素分解成纤维二糖,第三种酶进一步将其分解成葡萄糖。用于乙醇发酵的微生物是酵母菌。(3)根据题意,每毫升原液中菌体数量是(210+240+246)÷3×106÷0.2=1.16×109(个)。答案:(1)刚果红 酒精灯火焰 (2)葡萄糖苷酶 纤维二糖 酵母菌 (3)1.16×1093.(13分)幽门螺杆菌是一种微厌氧菌,它是引发胃炎的主要原因。胃总是在不停地蠕动,里面还有胃酸(pH为1.5左右),绝大部分的细菌都适应不了,幽门螺杆菌能产生尿素酶,它将尿素分解成氨和二氧化碳,氨可以中和胃酸保护幽门螺杆菌。请回答下列问题:(1)人体的胃可以为幽门螺杆菌的生长繁殖提供水、无机盐、________等营养物质,按功能分类,人体胃中的内容物相当于________培养基。(2)根据题干信息可知,若要在体外培养幽门螺杆菌,培养温度的要求是________,氧气条件是________。可在添加了尿素的培养基中加入________指示剂观察菌落周围是否变红,以对幽门螺杆菌进行初步鉴定。(3)中国人饮食习惯中的不分餐也不常使用公筷很可能会导致胃幽门螺杆菌交叉传播,为了验证这一假说,有人提取了某胃炎患者家庭的100g剩菜,加入无菌水稀释至1000mL。取0.1mL上述稀释液分别接种到3个适宜的培养基中置于适宜的条件下进行培养,三个平板上胃幽门螺杆菌菌落数均介于30~300之间且相差不大,求平均值得到菌落数为A个。实验过程中,接种的方法一般为_______________________,由实验可知每克剩菜中胃幽门螺杆菌数量为___________________________个。解析:(1)培养微生物需要水、无机盐、碳源和氮源等。据题干信息可知,绝大部分细菌适应不了胃酸的环境,因此人体胃中内容物相当于选择培养基,其他细菌不能生长,而幽门螺杆菌能生长。(2)人体体温约为37℃左右,若要在体外培养幽门螺杆菌,培养温度应是37℃左右。据题干信息可知,幽门螺杆菌为微厌氧菌,因此氧气条件是低氧。在添加尿素的培养基中加入酚红指示剂,幽门螺杆菌能够将尿素分解为氨,氨使酚红指示剂变为红色,
由此对幽门螺杆菌进行初步鉴定。(3)对微生物进行计数时采用的接种方法是稀释涂布平板法,每克剩菜中胃幽门螺杆菌的数量=A÷0.1×1000÷100=A×102(个)。答案:(1)碳源、氮源(或有机物)(合理即可) 选择(2)37℃左右 低氧 酚红 (3)稀释涂布平板法 A×1024.(12分)腐乳是一种广受喜爱的食物,回答下列与腐乳制作有关的问题:(1)在腐乳制作过程中,起主要作用的微生物是________。现代制作腐乳时,通常在严格无菌的环境下,将优良的菌种接种在豆腐上,这样可以________________________。(2)将长满微生物的豆腐块放入瓶中,加盐腌制,加盐的作用是______________,防止豆腐块腐败变质;__________________。(3)卤汤是为腐乳调味的调料,根据不同人的口味,配制卤汤时会加入不同量的胡椒、八角、桂皮等香辛料,同时卤汤中还会添加一定量的________,使腐乳具有独特的香味。卤汤应在加盐腌制________(填“前”或“后”)加入。(4)腐乳味道鲜美,除了因为其中加入的各种调料外,还因为微生物产生的蛋白酶将豆腐中的蛋白质水解为________________,脂肪酶将脂肪水解为____________,使腐乳具有特殊的风味。解析:(1)在腐乳制作过程中,起主要作用的微生物是毛霉。现代腐乳制作时,通常在无菌环境下,将优良毛霉菌种接种在豆腐上,以防止杂菌污染,提高产品品质。(2)腐乳制作过程中需要加盐,加盐可以析出豆腐中的水分,使豆腐块变硬,在后期的制作过程中不会过早酥烂,同时加盐可以抑制微生物的生长,避免豆腐块腐败变质。(3)卤汤中除添加香辛料之外,一般还会添加酒,酒可以抑制微生物的生长,同时使腐乳具有独特的香味。卤汤应在加盐腌制后添加。(4)毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸,脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。在各种调料及多种微生物的协同作用下,普通的豆腐会转变成风味独特的腐乳。答案:(1)毛霉 防止杂菌污染,提高产品品质 (2)抑制微生物生长 析出水分,防止豆腐块过早酥烂 (3)酒后 (4)小分子的肽和氨基酸 甘油和脂肪酸5.(12分)制作泡菜时直接接种乳酸菌菌种具有发酵速度快、产品质量稳定、亚硝酸盐含量远远低于自然发酵蔬菜等优点。请回答下列问题:(1)家庭制作泡菜时,需要配制盐和清水的比例为________的泡菜盐水再装坛。直接接种乳酸菌制作泡菜时,乳酸菌产生的大量乳酸能够__________________,所以可以采用低盐工艺,从而大幅度降低产品的含盐量。(2)亚硝酸盐摄入过多会导致中毒,通常可用__________法检测亚硝酸盐含量。亚硝酸盐在特定的条件下也可以转变为________,动物实验表明该物质可以致癌,原因是其会损伤细胞中的DNA分子,使____________________基因发生突变。
(3)乳酸菌分离和纯化常采用的方法是______________(答出一种即可)。临时保藏菌种的温度是________℃。(4)在培养乳酸菌和醋酸菌时,除了需要考虑pH外,还需要考虑________________________等不同培养条件。(答出两点即可)解析:(1)家庭制作泡菜时,需要配制盐和清水的比例为1∶4的泡菜盐水,传统家庭制作泡菜初期常利用高浓度食盐抑制杂菌生长,而制作泡菜时直接接种乳酸菌,其产生的大量乳酸能够抑制杂菌生长,所以可以采用低盐工艺,从而大幅度降低产品的含盐量。(2)通常采用比色法检测亚硝酸盐含量。亚硝酸盐在特定的条件下也可以转变为亚硝胺,其能损伤细胞中的DNA分子,使原癌基因和抑癌基因发生突变。(3)可采用平板划线法、稀释涂布平板法对乳酸菌进行分离和纯化。临时保藏菌种的温度是4℃。(4)在培养乳酸菌和醋酸菌时,除了需要考虑pH外,还需要考虑培养基成分(维生素)、氧气(空气)、温度等不同培养条件。答案:(1)1∶4 抑制杂菌生长 (2)比色 亚硝胺原癌基因和抑癌 (3)平板划线法或稀释涂布平板法 4(4)培养基成分(维生素)、氧气(空气)、温度6.(13分)(2020·湖南怀化模拟)近日,神经学家发现一个免疫球蛋白——β2微球蛋白除具有免疫作用外,在患有阿尔茨海默病以及其他认知障碍疾病的病人体内浓度均较高。对这种蛋白的研究受到了研究者重视。回答下列问题:(1)从血液中提取和分离β2微球蛋白可以在进行了样品处理和粗分离的基础上,用凝胶色谱法进行进一步的纯化,进入色谱柱的相对分子质量不同的蛋白质按相对分子质量不同先后洗脱下来,其中相对分子质量大的蛋白质________(填“先”或“后”)洗脱出来。(2)若用电泳法分离纯化β2微球蛋白,其原理是利用了分离样品中各种分子________的差异以及分子本身的大小、形状的不同,在电场的迁移速度不同而实现分离的。(3)有研究者为获得大量β2微球蛋白,提出通过培养转基因细菌来获得,对此细菌进行培养所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供_______________。若培养基需要调节pH,则应在灭菌之________(填“前”或“后”)调节。(4)为了获得由单个细菌繁殖而来的菌落,最好的接种方法是________,此方法涉及倒平板操作,倒平板时应该待温度冷却至________℃左右时进行。实验结束时,每个平板上菌落数控制在________之间以便计数。解析:(1)凝胶色谱法分离纯化蛋白质时,进入色谱柱的相对分子质量不同的蛋白质按相对分子质量不同先后洗脱下来,其中相对分子质量大的蛋白质经过的路程短,没有进入凝胶内部而先洗脱出来。(2)电泳法分离纯化蛋白质的原理是利用了分离样品中各种分子的带电性质和分子本身的大小及形状的不同,在电场的迁移速度不同而实现分离的。(3)在微生物的培养基中,牛肉膏和蛋白胨可以为微生物的生长提供碳源、氮源和维生素。在制备培养基时需要在灭菌之前调节pH。(4)为获得细菌的单菌落常用稀释涂布平板法接种。倒平板时需要在培养基冷却至50℃左右时进行。实验结束时,
需要选择每个平板上菌落数控制在30~300的平板进行计数。答案:(1)先 (2)带电性质 (3)碳源和氮源(或答碳源、氮源、维生素) 前 (4)稀释涂布平板法 50 30~3007.(13分)(2020·河南开封一模)下图1~3是植物有效成分的提取装置图。请据图回答下列有关问题:(1)橘皮精油的提取一般用图1装置,而不用图2装置,理由是________________________________________________。对所获压榨液进行一系列处理的目的是__________________________。(2)利用图2装置提取玫瑰精油,冷凝管内水流方向与蒸汽的流向________,再将锥形瓶内乳浊液中的玫瑰精油和大部分水分离开,需要用________(仪器)。(3)因胡萝卜素具有_____________________________的特点,可用图3装置来萃取。用石油醚作为萃取剂的理由是_______________________________。所获萃取液的浓缩________(填“能”或“否”)直接使用图2装置进行。用纸层析法对提取的胡萝卜素粗品进行鉴定时,用________________点样,若出现_________________(层析结果),则说明胡萝卜素提取成功。解析:(1)由于橘皮精油用水蒸气蒸馏会发生部分水解,用水中蒸馏会产生原料焦糊,所以橘皮精油的提取一般用图1装置即压榨的方法提取。对所获压榨液还需要过滤、静置、再次过滤等一系列处理,目的是把橘皮精油与水、糊状杂质等分离开。(2)为了对蒸馏出的精油起到冷凝的作用,冷凝管内水流方向与蒸汽的流向应相反,使蒸馏出的精油形成液态,便于收集。锥形瓶内乳浊液中的玫瑰精油和大部分水可用分液漏斗进行分离。(3)因胡萝卜素具有易溶于有机溶剂的特点,可用图3装置来萃取。萃取胡萝卜素的有机溶剂应该具有较高的沸点,能够充分溶解胡萝卜素,并且不与水混溶,而石油醚是水不溶性有机溶剂且沸点高,故可用石油醚作为萃取剂提取胡萝卜素。所获萃取液的浓缩能直接使用图2装置进行,通过该装置可将有机溶剂蒸发掉,剩余胡萝卜素。用纸层析法对提取的胡萝卜素粗品进行鉴定时,用标准样品和提取样品点样,若出现提取样品的层析带中有和标准样品一样的层析带,
则说明胡萝卜素提取成功。答案:(1)橘皮精油用水蒸气蒸馏会发生部分水解,用水中蒸馏会产生原料焦糊(或水中蒸馏会导致原料焦糊和有效成分水解等问题) 把橘皮精油与水、糊状杂质等分离开 (2)相反 分液漏斗 (3)易溶于有机溶剂 石油醚是水不溶性有机溶剂且沸点高 能 标准样品和提取样品 提取样品的层析带中有和标准样品一样的层析带8.(13分)为了探索海藻酸钠固定化对绿球藻生长的影响,以及固定化藻对含Zn2+污水的净化作用,科研人员用筛选到的一株绿球藻进行实验,流程及结果如下。请回答下列问题:→→(1)实验中海藻酸钠的作用是_______________________,CaCl2的作用是________________________________________________________________________。(2)为洗去凝胶球上残余的CaCl2和其他污染物,并保持绿球藻活性,宜采用________洗涤。图1中1.0%海藻酸钠组培养24h后,移去凝胶球,溶液呈绿色,原因是____________________。(3)为探索固定化藻对含Zn2+污水的净化作用,应选用浓度为________的海藻酸钠制备凝胶球。(4)图2中空白凝胶球组Zn2+浓度下降的原因是____________。结合图1和图2分析,固定化藻的实验组24~48h间Zn2+浓度下降速度较快的主要原因是__________________;72~96h间Zn2+浓度下降速度较慢的原因有________________________________。解析:(1)海藻酸钠在固定化绿球藻的过程中作为包埋剂。CaCl2可与海藻酸钠反应,促使海藻酸钠形成凝胶球。(2)利用培养液或生理盐水等洗涤胶球不至于造成绿球藻过量吸水或失水,从而保持其正常的活性状态。1.0%海藻酸钠组移去凝胶球,溶液呈绿色,说明绿球藻逸出了凝胶球,原因是制备凝胶球时,使用的海藻酸钠浓度过低,
导致凝胶球孔径过大。(3)图1显示,在不同浓度的海藻酸钠的作用下,当海藻酸钠浓度为2.0%时,固定化的绿球藻数量最多,故探索固定化藻对含Zn2+污水的净化作用,应选用浓度为2.0%的海藻酸钠制备凝胶球。(4)空白凝胶球中无绿球藻,故该组Zn2+浓度下降是空白凝胶的吸附作用所致。图1显示,固定化藻的实验组24~48h间绿球藻数量增加快,而72~96h间绿球藻数量基本不变,这是导致两个时间段Zn2+浓度下降速度不同的原因。答案:(1)包埋绿球藻(包埋剂) 与海藻酸钠反应形成凝胶球(凝固剂)(2)培养液(生理盐水) 海藻酸钠浓度过低(凝胶球孔径过大)(3)2.0%(4)凝胶吸附Zn2+ 绿球藻生长(繁殖)速度快 绿球藻生长(增殖)速度慢,溶液中Zn2+浓度较低