培养基的配制与无菌操作和接种技术训练题（带解析苏教版选修一）
(时间：30分钟 满分：50分)
考查知识点及角度
难度及题号
基础
中档
稍难
微生物培养基的配制
2
6
8
无菌操作和接种技术
1、4、5
综合考查
3、7
一、选择题(共5小题，每小题4分，共20分)
1．细菌培养基常在121 ℃压力锅中灭菌。如果只是在100 ℃温度下将细菌培养基灭菌，下列生物仍会存活的是 ( )。
A．大肠杆菌 B．一种青霉菌
C．枯草芽孢杆菌 D．沙门氏菌
解析 芽孢是为了抵御外界不良环境而形成的一种休眠体，100 ℃的温度不
能将其杀死。
答案 C
2．下列物质中，不能用作酵母菌培养基中碳源的是 ( )。
A．含碳有机物 B．蛋白胨
C．含碳无机物 D．花生粉饼等天然物质
解析 酵母菌是异养型生物，只能利用有机物中的碳。
答案 C
3．三个培养皿中分别加入10 mL不同的培养基，然后接种相同的大肠杆菌样液。培养36 h后，计算菌落数，结果如表所示。下列选项错误的是 ( )。
培养皿
培养基成分
菌落数
Ⅰ
琼脂、葡萄糖
35
Ⅱ
琼脂、葡萄糖、生长因子
250
5
Ⅲ
琼脂、生长因子
0
A.该实验采用的是固体培养基
B．该实验可采用涂抹平板法接种
C．Ⅰ和Ⅲ对照，说明大肠杆菌的生长不需要生长因子
D．Ⅱ和Ⅲ对照，说明大肠杆菌的生长需要糖类
解析 培养基中均加入了琼脂，故为固体培养基；微生物接种的方法很多，
最常用的是平板划线法或稀释涂布平板法；Ⅰ组和Ⅲ组存在两个变量，不能
说明大肠杆菌的生长是否需要生长因子；Ⅱ组和Ⅲ组对照，自变量是葡萄糖
的有无，说明大肠杆菌的生长需要糖类。
答案 C
4．下列有关平板划线操作的叙述，不正确的是 ( )。
A．第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物
B．每次划线前，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌
种
C．在第二次划线时，接种环上的菌种直接来源于菌液
D．划线结束后，灼烧接种环能及时杀死接种环上的菌种，避免细菌污染环
境和感染操作者
解析 接种环取菌种前灼烧的目的是避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；以后每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线后残留的菌种；从第二次划线开始，每次划线时接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端；划线结束仍需灼烧接种环，是避免细菌污染环境和感染操作者。
答案 C
5．获得纯净培养物的关键是 ( )。
A．将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌
B．接种纯种细菌
C．适宜条件下培养
D．防止外来杂菌的入侵
解析 防止外来杂菌的入侵是获得纯净培养物的关键。
答案 D
二、非选择题(共30分)
5
6．(10分)如下表所示为某微生物培养基的配方，请回答下面的问题。
成分
含量
NaNO3
3 g
K2HPO4
1 g
KCl
0.5 g
MgSO4·7H2O
0.5 g
FeSO4
0.01 g
(CH2O)
30 g
H2O
1 000 mL
青霉素
0.1万单位
(1)依物理性质，该培养基属于________培养基；依用途划分，则属于________培养基。
(2)根据培养基原料，所培养微生物的同化作用的类型是________，培养的微生物可能是________。
(3)该培养基中的碳源是________。不论何种培养基，在各成分都熔化后分装前，要进行的是________和________，搁置斜面时，一般需冷却至________左右，在________附近操作。
解析 (1)依物理性质，该培养基中未加凝固剂应属液体培养基；依用途，该培养基中加入了青霉素抑制了许多微生物生长，应属选择培养基。
(2)由于该培养基中加入了有机碳源，故所培养的微生物应属异养型。
(3)该培养基的碳源是(CH2O)；培养基熔化后需调节pH并灭菌；搁置斜面时，应冷却至50 ℃左右，操作应在酒精灯火焰旁进行。
答案 (1)液体 选择 (2)异养型 真菌 (3)(CH2O)
调pH 灭菌 50 ℃ 酒精灯火焰
7．(10分)根据所学的微生物知识回答下列相关的问题。
(1)在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑________、________
和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、________、________等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。
(2)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养器皿进行________(消毒、灭菌)；操作者的双手需进行清洗和________；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能________
5
________________________________________________________________。
(3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的________。
(4)通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的________。
(5)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是________________________________________________
_________________________________________________________________。
(6)若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及培养物必须经过________处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。
解析 大肠杆菌体积小、结构简单、变异类型容易选择、易培养、生活周期短，常作为遗传学研究的实验材料。微生物培养操作过程中要保证在无菌条件中进行。
答案 (1)温度 酸碱度 易培养 生活周期短 (2)灭菌 消毒 损伤DNA的结构 (3)比例合适 (4)鉴定(或分类) (5)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生 (6)灭菌
8．(10分)氯苯化合物是重要的有机化工原料，因其不易降解，会污染环境。某研究小组依照下列实验方案(如图)筛选出能高效降解氯苯的微生物SP1菌，培养基配方如表。
(1)配制Ⅱ号固体培养基时，除添加Ⅱ号液体培养基成分外，还应添加1%的________。
(2)培养基配制时，灭菌与调pH的先后顺序是________。
5
(3)从用途上来说，Ⅰ号培养基和Ⅱ号培养基分别属于________培养基和________培养基。在Ⅱ号培养基中，为SP1菌提供氮源的成分是________。
(4)在营养缺乏或环境恶劣时，SP1的菌体会变成一个圆形的休眠体，这种休眠体被称为________。
(5)将SP1菌接种在含不同浓度氯苯的Ⅲ号培养液中培养，得到生长曲线(如图)。从图可知SP1菌在________培养条件下最早停止生长，其原因是________。
解析 本题主要考查微生物的相关知识。(1)固体培养基必须含有适量的琼脂；(2)配置培养基时应先调pH后灭菌；(3)Ⅰ号培养基是为了获得更多的菌株，属于基础培养基，Ⅱ号培养基是为选择出SP1菌株，属于选择培养基，Ⅱ号培养基成分中含N物质为硝酸铵，则应由它为SP1菌株提供氮源；(4)在恶劣环境下一些菌体会形成芽孢休眠体，来度过不良环境；(5)SP1菌株是以氯苯为碳源，当氯苯消耗尽菌株因缺少碳源而不能继续生存，故氯苯含量越少，SP1菌株越早停止生长。
答案 (1)琼脂 (2)先调pH，后灭菌 (3)基础 选择 硝酸铵 (4)芽孢 (5)20 mg/L氯苯 碳源最早耗尽
5
微信/支付宝扫码支付