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2017—2018学年下学期2016级
第二次双周练生物试卷
考试时间：2018年3月29日
一、选择题（40分）
1．DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，DNA不溶液于酒精溶液，而细胞中的某些物质溶于酒精溶液。如图表示“DNA的粗提取”实验的相关操作步骤，其操作目的分析错误的是（ ）
A．①是洗涤红细胞、去除红细胞表面的杂质
B．②是稀释NaCl溶液至0．14mol/L，析出DNA
C．③是选用2mol/LNaCl溶液，溶解粘稠物中的DNA
D．④是纯化DNA，去除溶于95%酒精的杂质
2．以下为形成cDNA过程和PCR扩增过程示意图。据图分析，下列说法正确的是（ ）
A．催化①过程的酶是RNA聚合酶
B．④过程发生的变化是引物与单链DNA结合
C．催化②⑤过程的酶都是DNA聚合酶，都能耐高温
D．如果RNA单链中A与U之和占该链碱基含量的40%，则一个双链DNA中，A与U之和也占该DNA碱基含量的40%
3．SRY基因为Y染色体上的性别决定基因，可用SRY﹣PCR法鉴定胚胎性别，其基本程序如图。相关说法正确的是（ ）
A.PCR扩增的操作步骤依次是：高温变性、中温复性、低温延伸
B.上述过程需要使用的工具酶之一是RNA聚合酶
C.PCR技术中以核糖核苷酸为原料，以指数方式扩增
D．SRY探针能与雄性胚胎样品中DNA配对
4．下列有关DNA的粗提取与鉴定实验的叙述，正确的是（ ）
A．取材：鸡血细胞；原因：有细胞核，其他动物的血细胞都没有细胞核
B．粗提取：不同浓度的NaCl溶液；原因：DNA在其中的溶解度不同
C．提纯：95%的冷酒精；原因：DNA溶于酒精，蛋白质等杂质不溶于酒精
D．鉴定：二苯胺试剂；原因：DNA溶液加入二苯胺试剂即呈蓝色
5．下列是关于血红蛋白的提取和分离实验中关键步骤，其中正确的是（ ）
A．蛋白质的提取和分离一般可分为粗分离、样品处理、纯化、纯度鉴定等4步
B．蛋白质的提取和分离实验可以以猪、牛、羊、蛙等动物的血液为材料分离血红蛋白
C．对样品的处理过程分为红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、透析和分离血红蛋白等
D．对蛋白质的纯化和纯度鉴定的方法使用最多的是SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳
6．下表是某蛋白质混合液中的不同蛋白质从开始析出到完全析出所需要的蛋白质混合液中的硫酸铵浓度范围。下列说法错误的是（ ）
A．使用改变PH的方法也可以沉淀蛋白质
B．若只完全析出甲蛋白，混合液中最合适的硫酸铵浓度
应为20%
C．若加入混合液中的硫酸铵浓度达到30%，会析出2种
蛋白
D．通过改变硫酸铵浓度能从混合液中得到所有的、不含有其他蛋白质的乙蛋白
7.下列是设计DNA鉴定实验的1管与2管示意图，其中正确的是（ ）
8.某同学用洋葱进行DNA粗提取和鉴定实验，操作错误的是（ ）
A．加入洗涤剂后用力进行快速、充分的研磨
B．用蛋白酶纯化过滤后的研磨液中的DNA
C．加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌
D．加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热
9. 下列说法正确的是（ ）
A. 用32P标记T2噬菌体侵染未标记的大肠杆菌，离心后上清液放射性很高
B. 利用DNA与其他有机物等在物理和化学性质方面的差异可提取DNA
C. 若光学显微镜下观察到的视野过于明亮，可使用凹面镜改善观察效果
D. 甘蔗茎含有较多的蔗糖且近于白色，因此可以用于进行还原糖的鉴定
10.下列关于血红蛋白提取和分离的过程及原理叙述，不正确的是（ ）
A．为了防止血液凝固，应在采血器中预先加入抗凝血剂柠檬酸钠
B．红细胞洗涤使用5倍体积的生理盐水，直到离心后上清液不呈现黄色为止
C．利用磷酸缓冲液对血红蛋白溶液的透析12小时，可以去除小分子杂质
D．在凝胶柱中加入蛋白样品后即可连接缓冲溶液洗脱瓶进行洗脱和收集样品
11.下列关于DNA和血红蛋白的提取与分离实验的叙述中，错误的有（ ）
A．提取哺乳动物红细胞中的DNA和蛋白质可以采用蒸馏水胀破细胞的方法
B．采用不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出DNA的方法可去除蛋白质等杂质
C．蛋白质纯化过程中采用透析法可去除溶液中的小分子杂质
D．血红蛋白只能采用凝胶色谱法纯化，DNA则可采用电泳、盐析等方法纯化
12.下列有关核酸的变性与复性的正确叙述是( )
A.不同长度的DNA分子变性后，在合适温度下复性所用的时间基本相同
B.热变性后的DN A经缓慢冷却后可复性
C.热变性的DNA迅速降温过程也称作退火
D.复性的最佳温度为700C-850C
13.下列有关“血红蛋白提取和分离”的相关叙述中，正确的是（ ）
A．用蒸馏水进行红细胞的洗涤，其目的是去除细胞表面杂蛋白
B．将血红蛋白溶液进行透析，其目的是去除相对分子质量较大的杂质
C．血红蛋白释放时加入有机溶剂，其目的是使血红蛋白溶于有机溶剂
D．整个过程不断用磷酸缓冲液处理，是为了维持血红蛋白的结构
14.关于蛋白质提取的叙述中，不正确的是 （ ）
A．分离与纯化蛋白质之前首先要用适当的方法使蛋白质释放出来
B．抽提时要依据蛋白质的不同特性选择不同的溶剂
C．蛋白质的粗提取物离心可除去一些小分子杂质
D．蛋白质的粗制品可能是多种蛋白质的混合物
15.下列几种实验装置所示信息，有错误的是（ ）
16. 下列关于高中生物学实验的叙述，正确的是( )
A. 在制备果酒和果醋的实验过程中都要持续通入氧气
B. 分离土壤中不同种类的微生物需采用相同的稀释度
C. 选择过氧化氢酶作为探究温度对酶活性影响实验的理想材科
D. 将DNA粗提取后用二苯胺进行鉴定时需要进行水浴加热
17. 与析出DNA黏稠物有关的叙述，不正确的是( )
A. 操作时缓缓滴加蒸馏水，降低DNA的溶解度
B. 操作时用玻璃棒轻缓搅拌以保证DNA分子的完整
C. 加蒸馏水可以同时降低DNA和蛋白质的溶解度
D. 当丝状黏稠物不再增加时，NaCl溶液的浓度可认为是0.14 mol/L
18. PCR(多聚酶链式反应)技术是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，如图表示合成过程。下列说法错误的是( )
A. 甲过程高温使DNA变性解旋，该过程不需要解旋酶的作用
B. 丙过程用到的酶在高温下失活，因此在PCR扩增时需要再添加
C. 如果把模板DNA的两条链用15N标记，游离的脱氧核苷酸不做标记，循环3次后，在形成的子代DNA中含有15N标记的DNA占25%
D. PCR中由碱基错配引起的变异属于基因突变
19．下列关于有关科学方法的叙述，错误的是( )
A．分离各种细胞器用差速离心法
B．叶绿体中色素提取用纸层析法
C．血红蛋白的提取和分离时用凝胶色谱法、电泳法
D．验证DNA半保留复制用同位素标记法和密度梯度离心法
20．将经处理破裂后的红细胞混合液以2 000 r/min速度离心10 min后，离心管中溶液分为4层，血红蛋白位于从下至上的( )
A．第一层 B．第二层 C．第三层 D．第四层
21．从细胞中提取某种特定的蛋白质比提取DNA难度大，其原因不是（ ）
A．蛋白质对温度、盐浓度、pH等条件更敏感，更易失活
B．蛋白质的空间结构多样，理化性质各不相同，使得蛋白质的提取没有统一的方法
C．提取某种特定的蛋白质需据其特性摸索提取的程序
D．提取血红蛋白程序可分为样品处理、粗分离、纯化、纯度的鉴定四大步
22．在PCR扩增DNA的实验中，预计一分子DNA经过30次循环后，应该得到230个DNA分子，但是结果只有约210个DNA分子，那么不是出现该现象的原因是（ ）
A．Taq酶的活力不够，或活性受到抑制 B．系统设计欠妥
C．循环次数不够 D．引物不能与亲链结合
23．将粗提取的DNA丝状物分别加入物质的量浓度为0．14mol/LNaCl溶液、物质的量浓度为2mol/LNaCl溶液、体积分数为95%的酒精溶液中，然后用放有纱布的漏斗过滤，分别得到滤液P、Q、R以及存留在纱布上的黏稠物p、q、r，其中由于含DNA少可以丢弃的是（ ）
A．P、Q、R B．p、q、r C．P、q、R D．p、Q、r[
24．现有一滴血液样品中约含有6 000 个某特定DNA 片段的拷贝，以聚合酶链式反应(PCR)进行扩增，经过20 个循环反应后，可得此DNA 分子拷贝为( )
A．6 000×202 B．6 000×2×20 C．6 000×220 D．6 00020
25．下列说法错误的是（ ）
A. 无双缩脲试剂，用配制斐林试剂的材料等也能检测蛋白质
B. 无鸡血细胞，用香蕉、洗涤剂、食盐等也能提取DNA
C. 无过氧化氢酶，用淀粉酶等也能做pH影响酶活性的实验
D. 无紫色洋葱表皮细胞，用根毛细胞等也能做质壁分离实验
26．关于凝胶色谱柱的装填，除哪项外均为正确解释( )
A．交联葡聚糖凝胶(G－75)“G”表示凝胶的交联程度，膨胀程度及分离范围，75表示凝胶得水值
B．凝胶用自来水充分溶胀后，配成凝胶悬浮液
C．用300 mL的物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液充分洗涤平衡凝胶12 h
D．色谱柱内不能有气泡存在，一旦发现有气泡，必须重装
27．下列关于蛋白质性质的叙述中，不会影响到蛋白质在凝胶电泳中运动速度的是( )
A．蛋白质分子的大小 B．蛋白质分子的密度
C．蛋白质分子的形状 D．蛋白质分子所带电荷量
28．DNA具有半保留复制的特性，但是在DNA分子复制的过程中需要一些引物，其主要原因是( )
A．可加快DNA的复制速度
B．引物可与DNA母链通过碱基互补配对结合
C．引物的5′端有助于DNA聚合酶延伸DNA链
D．DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链
29．PCR又称多聚酶链式反应，现在已成为分子生物学实验室的一种常规手段，它可以在体外很短的时间内将DNA大量扩增。你认为下列符合在体外进行PCR反应条件的一组是( )
①稳定的缓冲液环境 ②DNA模板 ③合成引物 ④四种脱氧核苷酸 ⑤DNA聚合酶
⑥DNA解旋酶 ⑦限制性核酸内切酶 ⑧温控设备
A．①②③④⑤⑥ B．①②③④⑤⑥⑦⑧
C．③④⑤⑥⑧ D．①②③④⑤⑧
30．某考古学家在西伯利亚泰加林地区的冰中发现了一种冰冻的已灭绝的巨型动物的肌肉。他想了解该巨型动物的DNA与现今印度大象的DNA的相似性，于是做了如下检测工作，其中正确的操作步骤及顺序是( )
①降低温度，检测处理后的杂合DNA双链
②通过PCR技术扩增巨型动物和大象的DNA
③把巨型动物的DNA导入大象的细胞中
④在一定温度条件下，将巨型动物和大象的DNA水浴共热
A．②④① B．②④③① C．③④① D ．②④③
31．下列材料中不能作为DNA粗提取与鉴定的材料是 （ ）
猪肝、香蕉、鸡血、哺乳动物的红细胞、菜花、豌豆、菠菜、高等植物的木质部导管细胞、高等植物的韧皮部筛管细胞
A．有一项 B．有二项 C．有三项 D．有四项
32. 下图的实验装置用于研究温度对凝乳酶催化乳汁凝固的影响。先将酶和乳汁分别放在两支试管中，然后将两支试管放入同一温度的水中进行水浴15 min，再将酶和乳汁倒入同一试管中混合，保温并记录凝乳所需要的时间。通过多次实验并记录在不同温度下凝乳所需要的时间。结果如下表所示。据此实验，请判断下列叙述中正确的是
装置
A
B
C
D
E
F
水浴温度（℃）
10
20
30
40
50
60
凝乳时间/（min）
∞不凝乳
7.0
4.0
1.5
4.0
∞不凝乳
A.凝乳时间越长，凝乳酶的活性越高
B.如果将A组的水温逐渐提高，乳汁可以凝固
C.低温破坏了酶的分子结构，所以 10 ℃ 温度下乳汁不凝固
D.可以肯定，凝乳酶的最适温度为 40 ℃
33．家庭制作果酒、果醋和腐乳三种传统发酵食品的共同点是（ ）
A. 菌种均可来自于自然环境 B. 均需在适宜温度下进行，腐乳制作温度最高
C. 保证在有氧环境下发酵 D. 发酵过程中微生物的种群密度不断增加
34. 图示装置可用于生物技术实践的相关实验。下列有关叙述正确的是（ ）
A．制作果酒、果醋或腐乳时，所需控制的温度都是相同的
B．两种装置都可以先用于果酒的制作，后用于果醋的制作
C．用装置甲制作腐乳时，自下而上随着豆腐块加高逐渐减少用盐量
D．装置乙中b为排气口，c为充气口，可防止空气中微生物的污染
35．下表为某培养基的配方，有关叙述正确的是( )
A. 能在此培养基上生长的大肠杆菌，拟核上有抗青霉素的基因
B. 此培养基是天然鉴别培养基
C. 此培养基可以用来检测自来水中细菌含量是否符合饮用水标准
D. 此培养基可以用于选育转基因大肠杆菌菌种的基因工程的操作过程中
36. 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程中，关于倒平板的描述正确的是( )
①等培养基冷却至40℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板
②将灭过菌的培养皿放在桌面上，左手拔出棉塞
③右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰
④用左手的拇指和食指打开皿盖
⑤右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上皿盖
⑥等待平板冷却 5～10 s，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上
A. ①②③④ B. ④⑤⑥ C. ③④⑤ D. ①②④⑥
37.高中生物学实验中，在接种时不进行严格无菌操作对实验结果影响最大的一项是（ ）
A．将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中
B．将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上
C．将离体的植物叶片接种到无菌培养基上
D．将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上
38.下列关于对微生物筛选的叙述中不正确的是（ ）
A．利用高温培养条件筛选耐热的Taq细菌
B．用不含碳源的培养基筛选出自养微生物
C．用含酚红的培养基筛选出能分解尿素的菌株
D．用高浓度NaCl的培养基筛选耐盐突变菌株
39. 下列操作中不是获得较纯菌种的措施的是（ ）
A. 将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌
B. 土壤样品要灭菌处理后才能使用
C. 适宜环境条件下培养
D. 如是培养皿中的固体培养基，则需倒置培养
40.下列有关微生物培养与应用的叙述，正确的是（ ）
A.同一种物质可能既作为碳源又作为氮源，所有碳源都能提供能量
B.用稀释涂布平板法统计样品中活菌数目，其结果往往比实际值低
C.要从多种细菌中分离出某种细菌，培养基要用液体培养基
D.微生物不可缺少的微量有机物有氨基酸、维生素和蛋白胨等
二、非选择（50分）
41. （16分）某生物兴趣小组在学习了DNA的粗提取与鉴定实验后，尝试开展RNA的粗提取与鉴定实验。通过查阅资料，制订了以下的实验方案：
【实验课题】酵母RNA的提取和鉴定
【实验目的】1．从酵母中提取RNA；2．鉴定RNA。
【实验原理】微生物是工业上大量生产RNA的原料，其中以酵母尤为理想，因为酵母核酸中主要是RNA，DNA很少，菌体易收集，RNA易分离。RNA不溶于乙醇和无水乙醚。利用稀碱法（稀碱能使细胞壁溶解）或高盐法（高浓度的盐改变细胞膜的通透性）来释放RNA。RNA水解液（加硫酸、加热）+苔黑酚-FeCl3试剂加热直到沸腾1分钟，会呈现墨绿色。
【实验材料】干酵母粉、离心机、烧杯、试管、玻璃棒等；0．2%氢氧化钠、95%乙醇、无水乙醚、乙酸、10%硫酸溶液、苔黑酚-FeCl3试剂等。
【实验步骤】
①称6克干酵母
②加0．2%氢氧化钠45mL，沸水加热20分钟，搅拌，后加乙酸7滴
③离心10分钟后取上清液
④边搅拌边缓慢加95%乙醇并静置10分钟
⑤离心后先用95%乙醇洗两次，再用无水乙醚洗两次
⑥获得RNA粗制品
⑦RNA鉴定
请根据实验方案，思考并回答下列问题：
（1）酵母菌细胞中含有RNA的结构有 。酵母菌也是便于用来研究细胞呼吸不同方式的好材料，理由是 。
（2）实验步骤⑤中，离心后取 用乙醇、无水乙醚进行洗涤。
（3）RNA提取过程要注意温度的控制，在20～70℃的温度范围内停留的时间不能太长，其原因是 。
（4）稀碱法提取RNA须在沸水浴中进行的目的，一是 ，二是 ，以便获得更多更纯净的RNA。
（5）若用花椰菜来提取DNA，可用 瓦解细胞膜，然后充分研磨，实验中研磨速度要 。
42．(14分)在进行DNA亲子鉴定时，需大量的DNA。PCR技术(多聚酶链式反应)可以使样品DNA扩增，获得大量DNA克隆分子。该技术的原理是利用DNA的半保留复制，在试管中进行DNA的人工复制(如图，图中黑色长方形是引物)。
(1)图中的变性、延伸分别是指___________________、
____________________________________________、延伸时需要用到______________酶。
(2)假设PCR反应中的DNA模板为P，第一轮循环的产物2个子代DNA为N1，第二轮循环的产物4个子代DNA为N2，N1、N2中含有模板DNA单链的DNA分别有________个、________个。
(3)某样品DNA分子中共含3 000个碱基对，碱基数量满足＝，若经5次循环，至少需要向试管中加入________个腺嘌呤脱氧核苷酸。(不考虑引物所对应的片段)
(4)若下图为第一轮循环产生的产物，请绘出以a链和b链为模板经PCR扩增的产物。
43.（8分）真核生物细胞内，大量DNA和蛋白质以及一些RNA等混杂在一起，难以分离。生物兴趣小组的同学为了获得纯度相对较高的DNA展开了实验探究。
（1）分离各种物质的基本思路是根据DNA和其他物质理化性质的不同而采取一定的方法，如图是从各种物质之间 的差异角度开展研究：
a、取鸡血细胞悬液10ml，加蒸馏水20ml，同时用玻璃棒 （填“轻轻搅拌”或“快速搅拌”）。过滤，取滤液，转移到塑料材质的大烧杯中。
b、沿大烧杯内壁持续、缓慢地加入饱和硫酸铵溶液，用玻棒沿一个方向---- （填“轻轻搅拌”或“快速搅拌”），同时不断收集析出的物质。
下图是根据鸡血中几种物质的析出情况绘制的曲线，请据图分析：
c、如果只要收集纤维蛋白，可采取的措施是 。
d、先用饱和度40%的硫酸铵溶液析出绝大部分纤维蛋白和大部分球蛋白，再在饱和度约为 的硫酸铵溶液中析出DNA（既保证DNA提取量较大又避免其他杂质过多），与此同时析出的物质还有 。
（2）如果要进一步去掉其他杂质，尽可能提高获得的DNA纯度，可采取的两种办法有：
将DNA与球蛋白的混合物加入到 中，收集再次析出物；
用 处理溶有DNA与蛋白质的溶液。
44.（12分）PCR技术是通过链之间重叠的部分互相搭桥、互为模板，通过多次PCR扩增，从而获得目的基因的方法。该技术在扩增较长片段的DNA、不同来源的DNA片段拼接、基因的定点诱变等方面具有广泛的应用前景。下图是利用重叠延伸PCR技术扩增某目的基因的过程。其主要设计思路是用具有互补配对片段的引物（图中引物2、引物3），分别
PCR，获得有重叠链的两种 DNA片段，再在随后的扩增反应中通过重叠链的延伸获得目的基因。结合所学知识，分析下列问题。
（1）引物中G+C的含量影响着引物与模板DNA结合的稳定性，引物中G+C的含量越高，结合稳定性______。
（2）在第一阶段获得两种具有重叠片段DNA的过程中，必须将引物l、2和引物3、4置于不同反应系统中，这是因为________。
（3）若在引物l和引物2组成的反应系统和引物3、引物4组成的反应系统中均复制一次，共产生________种双链DNA分子。
（4）在引物1、引物2组成的反应系统中，经第一阶段形成图示双链DNA至少要经过________ 次复制。
（5）若利用微生物扩增该目的基因，其基本步骤包括：________、________、微生物的筛选和培养、从菌群中获取目的基因。
高二年级第二次双周练生物答案
题号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
答案
A
B
D
B
D
D
B
A
B
D
D
B
D
C
D
题号
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
答案
D
C
B
B
B
D
D
C
C
C
B
B
D
D
A
题号
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
答案
C
B
A
B
D
C
C
C
B
B
41.（1）细胞核、线粒体、核糖体、细胞质基质 酵母菌在有氧和无氧条件下都能生存，属于兼性厌氧型（2）沉淀物（3）分解核酸的酶在此温度范围内活性高，会使RNA降解（4）使杂质蛋白质变性 使核酸水解酶失活，减少RNA的分解（5）洗涤剂 缓慢
42. (1)模板DNA双链解聚形成单链 在DNA聚合酶的作用下，原料脱氧核苷酸聚合形成新的DNA链 耐高温的DNA聚合（Taq）
(2)2 2 (3)31 000
(4)如图：
43.（1）溶解度 a、 快速搅拌 b、轻轻搅拌
c、在硫酸铵浓度达到30%之前收集析出物 d、50% 球蛋白
（2）冷却酒精 嫩肉粉（木瓜蛋白酶）
44.（1）越高
（2）吸引物2和吸引物3存在互补配对片段，置于同一反应系统中它们会发生结合而失去作用
（3）3 （4）2
（5）基因表达载体的构建 将目的基因进入受体细胞
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