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2019-2020 学年度第二学期网上学习效果监测 生物试题参考答案 1-20 每小题，每题 2 分；21-30 为不定项选择，每小题 2 分，全对的 2 分， 漏选得 1 分 错选得 0 分。共 40 分。 1 ． A 2 ． B 3 ． B 4 ． A 5 ． B 6 ． D 7 ． B 8 ． C 9 ． D 1 0 ． D 1 1 ． D 1 2 ． C 1 3 ． B 1 4 ． A 1 5 ． C 1 6 ． C 1 7 ． D 1 8 ． D 1 9 ． C 2 0 ． B 2 1 ． C 2 2 ． A B C 2 3 ． A D 2 4 ． B C 2 5 ． A C D 2 6 ． B C D 2 7 ． B C 2 8 ． A B C 2 9 ． A B C 3 0 ． A C D 31．（每空 2 分，共 16 分） （1）植物细胞的全能性 茎尖(或芽尖或根尖) 植物分生区附近(茎尖)病毒极少，甚 至无病毒 （2）特有的结构和功能 再分化 （3） 秋水仙素 聚乙二醇（PEG） 植物体细胞杂交（技术） 32．（每空 2 分，共 12 分） （1）动物细胞培养和动物细胞融合 （2）(效应)B 淋巴(或浆) （3）聚乙二醇、灭活 的病毒、离心、振动、电激 （4）维持培养液的 pH 人的胃癌细胞 （5）只有细 胞丙既能无限增殖又能产生抗体 33．（每空 2 分，共 14 分） （1） 冲卵 （2）健康的体质和正常的繁殖能力 同期发情 免疫排斥 （3）胚胎分割 内细胞团 （4）体积小、细胞核大、核仁明显 34．（每空 2 分，共 18 分）（1）Ca2+ 感受 （2）氨苄青霉素 四环素 （3）重组质粒 番茄细胞 PstI 酶 SmaI 酶 2 1．A 【详解】 ①是氢键，②磷酸二酯键。解旋酶将 DNA 两条链之间的氢键打开，因此解旋酶作用于① 部位。限制酶能专一性识别双链 DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特 定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，所以限制酶作用于②部位。 故选 A。 2．B 【详解】 A、运载体不属于工具酶，A 错误； B、目前常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等，运载体需要含有限制酶切点、标记 基因等，B 正确； C、基因工程的原理是基因重组，C 错误； D、将目的基因导入受体细胞，还需要对目的基因进行检测和鉴定，D 错误。 故选 B。 3．B【详解】 A、据表分析可知，牛乳铁蛋白肽基因探针只在乳腺细胞出现了杂交带，即旨在乳腺细胞中 表达，A 错误； B、据表格信息：人干扰素基因探针在三种细胞都出现了杂交带，说明该基因可以在转基因 奶牛的全身多种细胞中表达，B 正确； C、表中两种基因探针所含的脱氧核苷酸的序列不同，才会出现不同的杂交结果，C 错误； D. 乳铁蛋白肽基因和人干扰素基因都是特定的 DNA 片段，D 错误。 故选 B。 4．A 【详解】 基因探针是一段带有检测标记，且顺序已知的，与目的基因互补的核酸序列(DNA 或 RNA)。 基因探针通过分子杂交与目的基因结合，产生杂交信号，能从浩瀚的基因组中把目的基因显 示出来。根据杂交原理，作为探针的核酸序列至少必须具备以下两个条件：①应是单链， 若为双链，必须先行变性处理。②应带有容易被检测的标记。它可以包括整个基因，也可 以仅仅是基因的一部分；可以是 DNA 本身，也可以是由之转录而来的 RNA。基因探针可以 根据碱基配对的原理检测核酸分子，但不能检测特定的蛋白质，综上分析，A 符合题意，BCD 不符合题意。 故选 A。 5．B 【详解】 ①A 过程需要的酶主要有限制性核酸内切酶和 DNA 连接酶，①正确； ②B 过程需要加入卡那霉素进行选择培养，②正确； ③C 过程为脱分化过程，培养基中需加入营养物质、琼脂、激素以及卡拉霉素，③错误；④D 过程可以用放射性同位素(或荧光分子)标记的抗虫基因作为探针进行分子水平的检测，④ 正确； ⑤D 过程可以用虫感染植株进行个体水平的检测，⑤正确； 故选：B。 6．D 【详解】 A、番茄叶肉细胞检测到鱼的抗冻蛋白基因，只能说明目的基因（鱼的抗冻蛋白基因）成功 导入受体细胞，A 错误； B、大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其 mRNA，说明目的基因（人胰岛素基因）成功导入 受体细胞（大肠杆菌）中并在受体细胞中完成了转录，B 错误； C、山羊乳腺细胞中检测到人抗凝血酶基因，只能说明目的基因（人抗凝血酶基因）成功导 入受体细胞，C 错误； D、酵母菌细胞中提取到人白细胞介素，说明目的基因（人白细胞介素基因）在受体细胞中 完成了表达，D 正确。 故选 D。 7．B 【详解】 A、大肠杆菌属于原核生物，原核生物细胞中没有内质网和高尔基体等复杂的细胞器，只有 核糖体，因此不能对人体糖蛋白进行加工，不能作为该基因的受体细胞，A 错误； B、酵母菌属于真核生物，细胞中含有内质网和高尔基体，因此可以对人的糖蛋白基因控制 合成的蛋白质进行加工，B 正确； C、T4 噬菌体没有细胞结构，不作为基因工程的受体细胞，一般可作为基因工程的运载体，C 错误；D、动物病毒没有细胞结构，不作为基因工程的受体细胞，一般可作为基因工程的运载体，D 错误。 故选 B。 8．C 【详解】 A、95℃时是 DNA 的氢键断开，A 错误； B、引物与模板结合后向 3’方向延伸，D 错误； C、反应过程包括变性→复性→延伸，C 正确； D、PCR 技术通过高温解旋，不需要解旋酶，D 错误； 故选 C。 9．D 【详解】 愈伤组织是一团排列疏松而无规则、高度液泡化的、呈无定形状态的、具有分生能力的薄壁 细胞，不具有特定的结构和功能，A 错误； 二倍体植株的花粉中只含一个染色体组，培养 得到的个体为单倍体，高度不育，只有幼苗用秋水仙素处理后得到的植株才能稳定遗传，B 错误； 人工种子中包裹的是再分化形成的胚状体或不定芽、顶芽和腋芽等，但不能是愈伤 组织，C 错误； 用特定的选择培养基可筛选出所需的突变体类型，如植物耐盐突变体的筛 选可利用加适量 NaCl 的培养基进行，D 正确。 故选 D。 【点睛】 本题主要考查学生对植物组织培养相关知识的理解和分析能力。花药的离体培养、基因工程 中的受体细胞的培养、植物体细胞杂交后杂种细胞的培养以及植物的大量快速繁殖都要用到 植物组织培养技术。植物组织培养技术已经得到广泛应用，包括：植物繁殖的新途径（如微 型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（如单倍体育种、突变体的应用）、细胞 产物的工厂化生产（如从培养的红豆杉细胞中提取抗肿瘤药物紫杉醇）。10．D 【详解】 目前植物体细胞杂交技术还没有能使杂种植物按照人们的需要表现出亲代的优良性状，A 错 误；愈伤组织形成时并没有形成完整个体，因此不能说明高度分化的植物细胞具有全能性，B 错误； 上述过程中发生了有丝分裂和细胞分化，但没发生有减数分裂，C 错误； “白菜-甘 蓝”杂种植株具有的性状是基因选择性表达的结果，D 正确。 故选 D。 11．D 【详解】 在体外需要将采集到的卵母细胞培养到减数第二次分裂中期，A 正确；可以通过显微操作技 术去除卵母细胞的细胞核和第一极体，B 正确；核移植时，对提供细胞核和细胞质的奶牛不 需要进行同期发情处理，使用电脉冲等方法可以激活重组细胞使其完成细胞分裂和发育，C 正确；动物体细胞核移植的难度高于胚胎细胞核移植，D 错误。 12．C 【详解】 由于接触抑制，动物细胞培养时只能形成单层细胞，A 正确；在细胞培养的传代培养过程中， 有部分细胞的遗传物质发生了改变，因此基因型会发生改变，B 正确；骨髓瘤细胞是癌细胞， 具有无限增值的特点，C 错误；传代培养时，需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细 胞，D 正确。 13．B 【详解】 A. 细胞的癌变发生于传代培养过程中，A 错误； B. 动物细胞培养前要用胰蛋白酶将组织细胞分散成单个细胞，动物细胞培养过程中也需要 用胰蛋白酶将接触抑制的细胞分散开来，再分瓶培养，B 正确； C. 动物细胞培养的目的是获得细胞群或细胞产物，也包括获得大量的细胞分泌蛋白，C 错误； D. 动物细胞培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐和动物血清等，不需要生长素，生 长素是植物激素，D 错误。 14．A 【详解】 A、单克隆抗体制备所用技术手段是动物细胞融合、动物细胞培养，原理是细胞膜的流动性、 细胞的增殖，植物体细胞杂交的所用技术手段是植物原生质体融合、植物组织培养，原理是 细胞膜的流动性、细胞的全能性，都涉及细胞膜的流动性，A 正确； B、诱导植物原生质体融合，使用化学方法（聚乙二醇）或物理方法诱导原生质体融合，不 能用灭活的病毒诱导，B 错误； C、植物体细胞杂交技术成功的标志是杂交细胞再生出新的细胞壁并最终长成完整植株，C 错误； D、单克隆抗体的制备结果是得到既能无限增殖，又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，D 错 误。 故选 A。 15．C 【详解】 A、制备单克隆抗体采用的细胞工程技术包括细胞培养和细胞融合技术，A 正确； B、单克隆抗体的制备过程需要两次筛选，第一次是用选择培养基筛选获得杂交瘤细胞，去 除未融合的细胞和自身融合细胞；第二次筛选是从杂交瘤细胞中筛选出能产生特定抗体的杂 交瘤细胞，B 正确； C、分散细胞获得单个细胞，需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，C 错误； D、运用的生物学原理包括细胞分裂和细胞膜具有一定的流动性，D 正确。故选 C。 16．C 【详解】 ①项，受精过程中，获能后的精子与卵子相遇时，首先发生顶体反应，顶体内的酶释放出 来，故正确。 ②项，顶体释放的顶体酶可溶解放射冠卵丘细胞之间的物质和透明带，形成精子通过的通 道；精子与卵黄膜结合是由于卵细胞膜表面有大量微绒毛，当精子与卵细胞膜接触时，立即 被微绒毛抱合，随后，精子外膜和卵细胞膜相互融合，这里不再是顶体酶的作用，故错误。 ③项，精子入卵后被激活的卵子完成减数第二次分裂，故错误。 ④项，精子入卵后，尾部脱落，原有核膜破裂，随后形成新的核膜，形成一个比原来精子 核还大的核，叫做雄原核；减数第二次分裂后形成的成熟卵细胞的核叫做雌原核，故正确。 ⑤项，透明带反应是在精子触及卵细胞膜的瞬间，产生阻止后来的精子进入透明带的生理 反应，防止多个精子进入透明带，是引起多个精子入卵的第一道屏障，故正确。 综上所述，因为①④⑤正确，②③错误，所以，本题正确答案为 C。 故选 C。 17．D 【详解】 A. 精子的发生和排卵都从初情期开始，卵子发生中的卵泡的形成和储备是在胎儿期，A 错 误； B、获能的精子与卵子相遇时，首先发生顶体反应，释放顶体酶，溶解卵丘细胞之间的物质 并将透明带溶出一条孔道，从而使精子先后穿越放射冠和透明带，B 错误； C、在自然条件下，受精过程在雌性动物的输卵管内完成，C 错误； D、受精过程结束的标志是雌、雄原核融合形成合子，D 正确。故选 D。 18．D 【详解】 A、内细胞团出现于囊胚，桑椹胚没有内细胞团，A 错误； B、囊胚的内细胞团细胞具有发育的全能性，B 错误； C、囊胚期细胞分化的实质是基因的选择性表达，遗传物质并没有方式改变，C 错误； D、囊胚的进一步扩大会导致透明带的破裂，D 正确。 故选 D。 19．C 【详解】 A、精子和卵子受精形成受精卵后还需要发育成早期胚胎才能移入母牛子宫，A 错误； B、采集的卵母细胞需要培养成熟才能与获能的精子受精，B 错误； C、成熟卵子与获能的精子相遇形成的受精卵，需培养到一定阶段（桑椹胚或囊胚）才可以 移植，C 正确； D、体外受精胚胎的工厂化生产即受精过程和早期胚胎发育在体外进行，但移植后的胚胎发 育过程在受体子宫进行，D 错误。 故选 C。 20．B 【详解】 A、将肠乳糖酶基因导入奶牛受精卵，培育出产低乳糖牛乳的奶牛，该奶牛的所有细胞均含 有肠乳糖酶基因，所以肠乳糖酶基因可以遗传给后代，A 错误； B、将腺苷酸脱氨酶基因转入淋巴细胞后回输患者，进行基因治疗，该患者只有淋巴细胞含有腺苷酸脱氨酶基因，性原细胞不含该基因，故不能遗传给后代，B 正确； C、将含胰岛素基因表达载体的重组质粒转入大肠杆菌，筛选获得的基因工程菌，能够通过 二分裂将胰岛素基因传给后代，C 错误； D、将花青素代谢基因导入植物体细胞，再经植物组织培养获得的植株，该植株所有细胞均 含有花青素代谢基因，因此花青素代谢基因会随该植物传给后代，D 错误。 故选 B。 21．C 【详解】 A、离体的紫草叶片不能进行彻底的灭菌处理，否则会失去活力，A 错误； B、减数分裂是指有性生殖过程中产生的生殖细胞的细胞分裂过程，愈伤组织增殖分裂属于 有丝分裂，B 错误； C、愈伤组织细胞分裂快，从愈伤组织中提取紫草素，可加快生产进程，C 正确； D、植物细胞的全能性是指具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整 生物体的潜能，愈伤组织生产紫草素不能体现全能性，D 错误； 故选 C。 【点睛】 熟练掌握植物组织培养技术原理及过程，并结合选项中减数分裂等知识解题。 22．ABC 【详解】 题图显示：抗原基因中存在 SmaⅠ的识别位点，使用 SmaⅠ切割含抗原基因的 DNA 会破坏 抗原基因的结构，抗原基因的两端分别含有 PstⅠ、EcoRⅠ的识别位点，用 PstⅠ、EcoRⅠ 切割含抗原基因的 DNA，能保持抗原基因结构的完整性，所以构建基因表达载体需要用到 EcoRⅠ、PstⅠ两种限制酶，A 正确；质粒是一种很小的双链环状 DNA 分子，若用图中四种限制酶同时切割质粒，可以产生四个 DNA 片段，B 正确；表达载体中除图示标注的结构 （目的基因、标记基因）外还应有启动子和终止子等调控因子，C 正确；筛选含重组质粒的 受体细胞时应在培养基中加入卡那霉素，D 错误。 23．AD 【详解】 步骤①所代表的反应过程是以 RNA 为模板合成 DNA 的逆转录，A 正确；目的基因需要与 运载体连接后才能导入受体细胞，不能直接导入受体细胞，B 错误；将目的基因导入微生物 细胞常用 Ca2+处理法，将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法，即步骤③和⑤ 常用的方法分别是 Ca2+处理法和显微注射法，C 错误；可用抗原-抗体杂交法检测目的基因 是否成功表达，即可用抗原—抗体杂交法检测细胞中是否真正成功表达了病毒 S 蛋白，D 正 确。 故选 AD。 24．BC 【解析】在基因工程，通常使用同一种限制酶切割目的基因和运载体，使它们产生相同的黏 性末端，以便形成重组质粒，A 错误；限制酶和 DNA 连接酶是构建重组质粒常用的工具酶， B 正确；基因工程的操作的第一个步骤是提取目的基因，C 正确；质粒不是细胞器，是广泛 存在于细菌细胞质中的环状 DNA 分子，D 错误。 25．ACD 【解析】将白菜和甘蓝两者的花粉细胞的原生质体进行融合得到杂种细胞，再经植物组织培 养获得“白菜-甘蓝”杂种植株，由于其中不含同源染色体，因此该植株不能结籽，A 正确； 灭活的病毒能诱导动物细胞融合，但不能诱导植物原生质体融合，B 错误；该培育过程中的 变异为染色体变异，C 正确；该过程中需要向培养基中添加植物激素（生长素、细胞分裂 素），D 正确。 26．BCD 【解析】试题分析：细胞的全能性是指已经分化的细胞仍具有发育成完整个体的潜能，图中脱毒苗的 获得体现了植物细胞的全能性，愈伤组织和高产细胞系的获得都没有体现植物细胞的全能性，A 错误；图中①和②分别表示辣椒组织培养中细胞的脱分化和再分化过程，B 正确；再分化 过程中需用适宜配比的生长素和细胞分裂素溶液处理，乙诱导细胞分化的方向，C 正确；用 酶解法将愈伤组织分离成单细胞时，常用的酶是纤维素酶和果胶酶，以分解植物细胞之间的 成分，D 正确。 考点：本题考查植物组织培养及其应用的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点， 把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力。 27．BC 【详解】 通常人工种子是利用完整细胞制备而成，不用原生质体，A 错误；癌细胞具有无限增殖的能 力，因此乳腺癌细胞比乳腺细胞更容易进行离体培养，B 正确；单克隆抗体的制备采用了动 物细胞融合技术和动物细胞培养技术，C 正确；动物细胞融合无法培育出新的动物个体，D 错误。故选 BC。 28．ABC 【详解】 植物组织培养的原理是细胞的全能性，动物细胞培养的原理是细胞分裂，A 错误；植物体细 胞杂交可以克服生殖隔离得到新个体，动物细胞融合可得到杂种细胞，B 错误；动物细胞工 程和植物细胞工程均需要在无菌条件下进行，C 错误；植物组织培养可用于单倍体育种，动 物体细胞核移植可以培养克隆动物，D 正确。故选 ABC。 29．ABC 【解析】透明带反应是防止多精入卵的第一道屏障，A 正确；冲卵是指用特制装置把母畜子 宫内的胚胎冲洗出来，B 正确；精子必须经过获能处理后才能与卵细胞体内受精或体外受精， C 正确；内细胞团将来发育成各种组织，滋养层将来发育成胎盘和胎膜，D 错误。 30．ACD【详解】 a 是核移植技术，①反映了动物细胞核具有全能性，A 错误；体外受精技术得到的动物叫做 试管动物，试管动物技术为良种家畜快速大量繁殖提供了可能，B 正确；胚胎分割技术所得 个体的基因型完全相同，但表现型不一定完全相同，因为表现型还受环境的影响，C 错误； a、b、c 三项技术获得的胚胎，其将要植入的受体必须是健康的具有正常孕育能力的本地物 种，提供胚胎的供体往往是珍稀的、存量少的雌性动物，D 错误。综上所述，A、C、D 错 误，B 正确。 31．（每空 2 分，共 16 分） （1）植物细胞的全能性 茎尖(或芽尖或根尖) 植物分生区附近(茎尖)病毒极少，甚 至无病毒 （2）特有的结构和功能 再分化 （3） 秋水仙素 聚乙二醇（PEG） 植物体细胞杂交（技术） 【解析】试题分析：本题主要考查学生对植物组织培养技术的原理及过程的识记及理解能力。 需要学生熟记并理解植物组织培养的过程及应用并形成清晰的知识网络。分析题图：图示表 示利用植物组织培养技术培育草莓脱毒苗的过程，其中外植体通过①脱分化形成愈伤组织 的过程，愈伤组织通过②再分化形成胚状体的过程。 （1）植物体的任何一个细胞都具有发育成完整植株的潜能，称为植物细胞的全能性。外植 体能够形成幼苗所依据的原理是植物细胞的全能性。培育脱毒苗时，一般选取茎尖(或芽尖 或根尖)作为外植体，其依据是植物分生区附近(茎尖)病毒极少，甚至无病毒。 （2）已分化的细胞经过诱导后失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程叫脱分 化。②是再分化过程，再分化是指已经脱分化的愈伤组织在一定条件下，再分化出胚状体， 形成完整植株。 （3）秋水仙素可以诱导产生多倍体，使用秋水仙素处理草莓的愈伤组织，再经培养获得多 倍体植株；也可以利用聚乙二醇（PEG）诱导草莓体细胞融合形成杂种细胞后，再经组织培 养获得多倍体植株，这种育种技术被称为植物体细胞杂交（技术）。32．（每空 2 分，共 12 分） （1）动物细胞培养和动物细胞融合 （2）(效应)B 淋巴(或浆) （3）聚乙二醇、灭活 的病毒、离心、振动、电激 （4）维持培养液的 pH 人的胃癌细胞 （5）只有细 胞丙既能无限增殖又能产生抗体 【详解】 （1）单克隆抗体利用了细胞融合技术将淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，然后再利用动物细胞 培养技术对细胞进行培养和筛选。 （2）甲代表 B 淋巴细胞，将甲传代培养 10 代以内，形成的细胞能维持正常的二倍体核型。 （3）诱导骨髓瘤细胞与甲融合，常用的诱导因素有灭活的病毒、聚乙二醇（PEG）、电激等。 （4）为筛选出丙，需将乙杂交瘤细胞放入含有 5%CO2 的混合气体的培养箱培养，并在培养 基中添加血清、血浆等天然成分，其中 CO2 的主要作用是维持培养液的 pH。通过检测细胞 是否产生所需的专一抗体，筛选出丙能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，该过程中所选用的抗 原是人的胃癌细胞。 （5）甲是 B 淋巴细胞，细胞丙是杂交瘤细胞，只有杂交瘤细胞即可大量增殖，又能产生抗 体。 33．（每空 2 分，共 14 分） （1） 冲卵 （2）健康的体质和正常的繁殖能力 同期发情 免疫排斥 （3）胚胎分割 内细胞团 （4）体积小、细胞核大、核仁明显 【详解】 （1）根据胚胎移植的过程可知，同期发情处理后需要对供体母牛进行超数排卵（a）；配种 一周后需要对供体母牛进行冲卵（b）；早期胚胎经过检查和培养后需要进行胚胎移植（c）。 （2）供体母牛的主要职能是只产生具有优良遗传特性的胚胎，受体母牛要承担繁重的妊娠 和育仔任务，必须具备健康的体质和健康的繁殖能力的特点；胚胎移植时，受体应处于适合的生理状态，此时可利用激素对受体进行同期发情处理。此外，受体对移入子宫的外来胚胎 基本上不发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能。 （3）为了提高牛胚胎的利用率，常采取的方法是胚胎分割，分割后再进行胚胎移植；处理 的时期可以是桑椹胚或囊胚期，在对囊胚阶段胚胎操作时，注意要将内细胞团均等分割，否 则会影响胚胎的恢复和进一步发育。 （4）从哺乳动物早期胚胎或原始性腺中分离出来的细胞，称为 ES 或 EK 细胞，即胚胎干细 胞，这类细胞的形态特征有体积小、细胞核大、核仁明显等特点。 34．（每空 2 分，共 18 分） （1）Ca2+ 感受 （2）氨苄青霉素 四环素 （3）重组质粒 番茄细胞 PstI 酶 SmaI 酶 2 【详解】 （1）③过程将 B 导入大肠杆菌，需用 Ca2+对大肠杆菌进行处理，使其处于感受态。 （2）根据题图可知，在构建基因表达载体时，四环素抗性基因的结构遭到破坏，而抗氨苄 青霉素基因结构完好，因此没有导入任何质粒的大肠杆菌，不含上述两种抗性基因，在含有 氨苄青霉素或四环素的培养基中都不能生长；导入普通质粒的大肠杆菌含有上述两种抗性基 因，在含有氨苄青霉素或四环素的培养基中都能生长；导入重组质粒的大肠杆菌四环素抗性 基因的结构遭到破坏，抗氨苄青霉素基因结构完好，因此在含有氨苄青霉素的培养基中能生 长，但在含有四环素的培养基中不能生长。将③过程后的大肠杆菌进行筛选时，先用含氨 苄青霉素的培养基进行培养，淘汰没有导入任何质粒的大肠杆菌，能生长的则是含有普通质 粒和重组质粒（二者都含抗氨苄青霉素基因）的大肠杆菌；然后将该培养基上生长的菌落用 “盖章”的方法接种到含四环素的培养基上，在含四环素的培养基上能生长的是含普通质粒的 大肠杆菌，将两个培养基进行位置对照，在含氨苄青霉素的培养基上能生长，而在含四环素 的培养基上该位置没有菌落出现，则属于导入重组质粒的工程菌。故要检测 B 是否导入大 肠杆菌，需将③过程后的大肠杆菌先接种于含氨苄青霉素的培养基上，然后将在该培养基 上生长的大肠杆菌接种在含四环素的培养基上，在前者培养基上能生长而在后者培养基上不 能生长的是导入 B 的工程菌。 （3）据图可知，图中甲代表的是重组质粒，乙可代表番茄细胞，可用 SmaⅠ酶和 PstⅠ酶提取鱼的抗冻蛋白基因，以避免目的基因末端发生任意连接，用此二酶切割质粒产生的 DNA 片段有 2 种。