专题二 细胞工程——动物细胞工程
2.2.1动物细胞培养和核移植技术
一、预习目标
预习动物细胞培养的过程、条件及应用和核移植的过程及应用前景。
二、预习内容
（一）、动物细胞培养
1、动物细胞培养的概念：从动物机体中取出相关的组织，将它______________________，然后，________________________________________让这些细胞_______________________。
2、动物细胞培养的过程：取动物组织块----------- _____________________--------------胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理-------------_______________________________------------制成细胞悬液-------______________________-----------------------分瓶----------________________________细胞株---------10~50代，遗传物质改变----------细胞系。
3、条件：（1）
（2）
（3）
(4)
4、应用 ：（1）生产生物制品。 （2）————————————————
（3）检测有毒物质。
（二）：动物体细胞核移植技术
1、概念：将动物一个细胞的_________________,移入一个______________________________中，使其重组并发育成一个新的________________这个新的胚胎最终发育为新的个体。
2、过程：
(1)取供体_________________ →供体细胞培养。
(2)从卵巢中采集_________________ →在体外培养到_______________________ →去核。
(3)将供体细胞注入_____________________ →使两细胞____________→供体核进人受体卵母细
胞→构建_________________。
(4)将胚胎______________到代孕母体内→生出与供体遗传物质基本相同的个体。
3、应用：(1)加速家畜_________________进程，促进优良畜群繁育。
(2)保护_________________物种。
(3)生产_________________。
(4)作为异种移植的_____________。
(5)用于_________________的移植。
4
三、提出疑惑
同学们，通过你的自主学习，你还有哪些疑惑，请把它填在下面的表格中
疑惑点
疑惑内容
课内探究学案
一、 学习目标
1．简述动物细胞培养的过程、条件及应用。
2．简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。
学习重点：（1）动物细胞培养的过程及条件。
（2）用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。
学习难点：用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。
二、学习过程
[问题]动物细胞工程的常用技术手段有哪些？最基础的技术手段是什么？
动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等。最基础的技术手段是动物细胞培养。
探究一：动物细胞培养
1．概念要点有哪些？
2、动物细胞培养的过程：
（1）什么是细胞贴壁？什么是接触抑制？
（2）如何打破接触抑制？
（3） 细胞传代培养代数有什么特点？
3、动物细胞培养的条件：
4、延伸：
1、动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组培培养基有何独特之处？
2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？
3、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？
4、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？
4
探究二： 动物体细胞核移植技术和克隆动物
1、为什么不能直接利用动物细胞培育动物体？
2、概念要点有哪些？
3.受体细胞为什么选用卵母细胞？
4、细胞胞核移植技术的意义是什么？
5、细胞核移植技术存在哪些问题？
（三）反思总结：植物组织培养和动物细胞培养的比较
植物组织培养
动物细胞培养
原理
细胞全能性
培养基性质
液体培养基
培养基特有成分
蔗糖、植物激素
培养结果
植物体
细胞株、细胞系
培养目的
快速繁殖、培育无病毒植株等
(四)当堂检测
1.为了使用于培养的动物组织细胞分散开以便配制成一定浓度的细胞悬浮液，选取来的动物组织应选用下列哪种物质处理
A.胃蛋白酶B.胰蛋白酶C.盐酸D.胰脂肪酶
2.下列属于动物细胞培养与植物组织培养主要区别的是
A.培养基成分不同
B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行
C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能
D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株
3.在克隆多利羊的过程中，下列哪项技术没有运用到
A.细胞培养技术B.细胞核移植C.胚胎移植技术D.基因工程技术
4、1952~1953年，美国科学家斯提瓦用胡萝卜根的悬浮培养细胞进行人工培养，发现单个细胞能像受精卵发育成胚一样的途径，发育成完整植株。1997年英国维尔穆特等人从白面母绵羊体内取出乳腺上皮细胞静息培养，然后把它的核移入黑面母绵羊去核的卵细胞中形成重组细胞，并将重组细胞培养成胚胎，将胚胎植入另一母羊的子宫内后获得了克隆羊多利。
阅读这段材料后，回答下列问题：
(1)文中的悬浮培养细胞和乳腺上皮细胞均为____________。
(2)斯提瓦的实验证明了____________。维尔穆特的实验证明了_____________。从细胞结构和遗传角度分析，两位科学家实验结论的得出，根本原因在于____________。
(3)斯提瓦和维尔穆特实验的差别在于____________。
(4)维尔穆特的实验技术又称为_____________________技术。该技术的经济意义在于：①_____________；②____________
课后练习与提高
1．下列与动物细胞培养有关的表述中，不正确的是 ( )
A．培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清
B．原代培养的细胞一般传至10代左右便会出现生长停滞
4
C．动物细胞培养一般能够传到40～50代，但其遗传物质发生了改变
D．动物细胞培养可用于检测有毒物质和获得大量自身健康细胞
2．生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复生”将不再是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡，以下较易成功“复生”野驴的方法是
A．将野驴的体细胞取出，利用组织培养技术，经脱分化、再分化，培育成新个体
B．将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个体
C．取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中，经孕育培养成新个体
D．将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体
3．一只羊的卵细胞核被另一只羊的体细胞核置换后，这个卵细胞经过多次分裂，再植入第三只羊的子宫内发育，结果产下一只羊羔。这种克隆技术具有多种用途，但是不能 A．有选择地繁殖某一性别的家畜 B．繁殖家畜中的优秀个体
C．用于保存物种 D．改变动物的基因型
4、下列哪_项属于克隆( )
A．将鸡的某个DNA片段整合到小鼠的DNA分子中
B．将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内
C．将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞
D．将某肿瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞系
5、动物细胞培养的细胞来自于 ( )
A．任何个体的细胞 B．只能取自动物胚胎细胞
C．只能取自幼龄动物的组织细胞 D．胚胎或幼龄动物的器官和组织细胞
6、(08年宁夏卷)回答下列有关动物细胞培养的问题：
（1）在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面 时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的 。此时，瓶壁上形成细胞层数是 。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是 。
（2）随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现 细胞，但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成 细胞，该种细胞的黏着性 ，细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的量 。
（3）现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是 。
（4）检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到 期的细胞用显微镜进行观察。
（5）在细胞培养过程中，通常在 条件下保存细胞，因为在这种条件下，细胞中
的活性降低，细胞的速率降低。
（6）给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作 进行攻击。
课后练习与提高答案：1------5：CCDDD
6、⑴相互接触 接触抑制 单层（或一层 ） 胰蛋白酶
⑵衰老甚至死亡 不死性 降低 减少
⑶由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色（或由于死细胞的膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色）
⑷中 ⑸冷冻（或超低温、液氮） 酶 新陈代谢 ⑹抗原
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