专题二细胞工程——.动物细胞工程
2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体
一、预习目标
预习动物细胞融合和单克隆抗体制备的过程,了解单克隆抗体在医学实践中的应用,并说其应用实例。
“二、预习内容
㈠、动物细胞融合
1、概念:_______或_______动物细胞结合形一个细胞的过程,也称细胞杂交。
2、结果:形成___________。
3、过程:两个或多个细胞___________________________________。
4、意义:克服了___________的不亲和性,成为研究___________、___________、肿瘤和
_______________培育的重要手段。
㈡、单克隆抗体
1、抗体
⑴产生细胞:_________________。 ⑵成分:__________。
⑶特点:从__________中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差。
2、单克隆抗体的制备
给小鼠注射特
定的抗原蛋白
培养骨髓瘤细胞
→
从________中分
离B淋巴细胞
→骨髓瘤细胞
未融合细胞
__________
__________
小鼠体内培
养
体外培养
→
__________
抗体
(1)过程
⑵杂交瘤细胞的特点:____________________、____________________。
⑶单克隆抗体的优点:____________、____________、____________。
㈢、单克隆抗体的应用
1、作为诊断试剂,具有__________、__________、__________、__________的优点。
2、用于治疗疾病和运载药物:主要用于治疗_______、可制成___________。
三、提出疑惑
同学们,通过你的自主学习,你还有哪些疑惑,请把它填在下面的表格中
疑惑点
疑惑内容
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课内探究学案
一、学习目标
1、 掌握动物细胞融合与植物体细胞杂交的区别和联系。
2、 简述动物细胞融合和单克隆抗体制备的过程。
3、 了解单克隆抗体在医学实践中的应用,并说其应用实例。
学习重难点:单克隆抗体的制备
二、学习过程
(一) 动物细胞的融合
探究一:动物细胞的融合
1、植物体细胞杂交和动物细胞融合的区别(学生填下表)
植物体细胞杂交
动物细胞融合
细胞融合原理
细胞膜的流动性
融合过程
先使细胞分散开
诱导方法
电激、振动、离心、聚乙二醇
结果
应用
培育植物新品种
意义
相同点
原生质体融合原理相同;原生质体融合的方法相似
2植物体细胞杂交和动物细胞融合的主要区别是什么?
3、为什么可以使用灭活的病毒促进动物细胞融合?
4、不灭活的病毒能作为诱导剂吗?
知识阅读:阅读课本P52中的小字,了解一下动物细胞融合技术的发展简史。
(二)单克隆抗体
探究二:单克隆抗体制备的原理
1、传统的抗体生产方法及缺陷是什么?抗体是从何来的?
2、 B淋巴细胞有什么特点?
3、若要想获得大量的单一抗体,如何做呢?
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4、在体外培养的条件下,一个B淋巴细胞是不可能无限增殖的,那么,怎样解决这一问题的呢?
5、小结以下内容:
◆ 利用____________________产生特异性抗体的功能。
◆ 利用____________________无限增殖的特性。
◆ 利用____________________技术将两种细胞融合获得杂交瘤细胞。
◆ 利用____________________技术大量培养杂交瘤细胞。
探究三:单克隆抗体制备的过程
1、如何获得B淋巴细胞?
2、如果把B淋巴细胞和骨髓瘤细胞放在一起时,会有几种融合方式(类型)?
3、 选择杂交瘤细胞的两步筛选的目的各是什么?
4、如何进行杂交瘤细胞的抗体检测及克隆化培养?(教师讲解为主)
融合后的细胞经选择性培养基培养后,能存活的细胞就是杂交瘤细胞,但这些杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞,通常用“有限稀释法”
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来选择。将杂交瘤细胞稀释,用多孔细胞培养板培养,使每孔不超过一个细胞,通过培养让其增殖。然后检测各孔上清液中细胞分泌的抗体,那么上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔。阳性孔中的细胞还不能保证是来自单个细胞,挑选阳性孔的细胞继续进行有限稀释,一般需进行3~4次,直至确信每个孔中增殖的细胞为单克隆细胞。该过程即为杂交瘤细胞的克隆化培养。
探究四:单克隆抗体的应用
1、单克隆抗体的应用有哪些?
2、生物导弹的组成及优点
(三)反思总结
(四)当堂检测
1、基因型为Aa与基因型为Bb的动物体细胞混合,用灭活的仙台病毒处理后,不可能获得下列哪种基因型的细胞 ( )
A.AAaa B.AaBb C.Aabb D.BBbb
2、动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中,正确的是 ( )
①诱导融合的方法完全相同 ②所用的技术手段不相同 ③所采用的原理完全相同
④都能形成杂种细胞
A.①② B.①③ C.②④ D.③④
3、关于单克隆抗体,下列叙述不正确的是 ( )
A、可以制成诊断盒.用于疾病的珍断 B、可以与药物结合,用于病变细胞的定向治疗
C、可以利用基因工程技术生产 D、可以在生物体内生产,不能体外生产
4、“生物导弹”是指 ( )
A、单克隆抗体 B、带有特定药物的单克隆抗体
C、杂交细胞 D、B淋巴细胞
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