山东省泰安市肥城市第三中学高中生物 1.2 基因工程的基本操作程序（二）学案 新人教版选修3.doc

山东省泰安市肥城市第三中学高中生物 1.2 基因工程的基本操作程序（二）学案 新人教版选修3‎ 学习指导 即时感悟 一、学习目标 ‎ ‎1、简述将目的基因导入受体细胞的方法。‎ ‎2、说出对目的基因进行检测和鉴定的方法 二、学习重点及难点 ‎ ‎1、农杆菌转化法的基本过程 ‎2、DNA分子杂交的原理 ‎【自主预习】‎ ‎1、将目的基因导入受体细胞 转化是指 。‎ 将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是______________，除此之外，还有________和______________等方法。 ______________是转基因动物中采用最多，也是最为有效的一种将目的基因导入动物细胞的方法。 大肠杆菌细胞最常用的转化方法是：首先用_______处理细胞，使细胞处于一种___________________________________的生理状态，这种细胞称为__________。‎ ‎2、目的基因的检测与鉴定 要检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因，非常关键，检测方法是 。以__________________________________________作为探针。要检测目的基因是否转录出了mRNA，检测方法是___________。检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是______________。除了上述分子检测外，有的还需要进行____________________的鉴定。‎ 疑惑点 疑惑内容 三、同学们，通过自主预习，还有哪些疑惑呢？‎ ‎【合作探究】‎ 探究一：将目的基因导入受体细胞 ‎ （想一想，为什么要导入受体细胞？在外界能不能维持稳定和表达？）‎ ‎ 思考并回答：‎ ‎ （1）什么是转化？‎ ‎ ‎ ‎ ‎ 4‎ ‎ （2）将目的基因导入植物细胞的方法有哪些？最常用的方法是？哪些细胞可以作为受体细胞？（结合示意图，了解农杆菌转化法的基本过程）‎ ‎ ‎ ‎ （3）将目的基因导入动物细胞的基本操作程序是？要用到什么技术？哪些细胞可以作为受体细胞？‎ ‎ （4）早期的基因工程为什么选择原核生物作为受体细胞？‎ ‎ （5）大肠杆菌细胞最常用的转化方法是？‎ 探究二：目的基因的检测与鉴定（为什么要检测和鉴定？）‎ ‎ 思考并回答：‎ ‎ （1）目的基因的检测与鉴定可以从什么水平来做？‎ ‎ （2）核酸杂交技术基本过程是？ 什么是探针？‎ ‎ （3）如何检测目的基因是否翻译出蛋白质？‎ ‎ （4）如何从个体生物学水平鉴定转基因抗虫棉？‎ 反思总结 基因工程的基本操作步骤 主要方法、技术或组成 步骤一：‎ 步骤二：‎ 步骤三：‎ 导入植物细胞：‎ 导入动物细胞：‎ 导入微生物细胞：‎ 步骤四：‎ ‎[当堂达标]‎ ‎1、人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体加工合成。通过转基因技术，可以使人的糖蛋白基因得以表达的受体细胞是 （ ） ‎ A．大肠杆菌 B．酵母菌 C．T4噬菌体 D．质粒DNA ‎2、下列关于基因工程的叙述，正确的是： （ ） ‎ A．基因工程经常以抗菌素抗性基因为目的基因 B．细菌质粒是基因工程常用的运载体 C．通常用一种限制性内切酶处理含目的基因的DNA，用另一种处理运载体DNA D．为育成抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体 4‎ （1） 能否利用人的皮肤细胞来完成①过程？为什么？‎ ‎ 。‎ ‎（2）过程②必需的酶是 酶，过程③必需的酶是 酶。‎ ‎（3）与人体细胞中胰岛素基因相比，通过②过程获得的目的基因不含有非编码区和 。‎ ‎（4）若A中共有a个碱基对，其中鸟嘌呤有b个，则③④⑤过程连续进行4次，至少需要提供胸腺嘧啶 个。‎ ‎（5）在利用AB获得C的过程中，必须用 切割A和B，使它们产生 ，再加入 ，才可形成C。‎ ‎（6）为使过程⑧更易进行，可用 （药剂）处理D。‎ ‎(1)不能     皮肤细胞中的胰岛素基因未表达(或未转录)，不能形成胰岛素mRNA  (2)逆转录    4种脱氧核苷酸 (3)CaCl2 (4)同一种限制性内切酶     相同的黏性末端     DNA连接酶 ‎【拓展延伸】‎ ‎《学案导学》本节内容 4‎ ‎【课前预习参考答案】1、目的基因的获取 基因表达载体的构建 将目的基因导入受体细胞 目的基因的检测与鉴定 2、自然界中已有的物种中分离出来 人工的方法合成 编码蛋白质的结构基因 具有调控作用的因子 从基因文库中获取目的基因 利用PCR技术扩增目的基因 通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成 3、基因表达载体的构建 目的基因 启动子 终止子 标记基因 4、目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程 农杆菌转化法 基因枪法 花粉管通道法 显微注射技术 Ca2+ 能吸收周围环境中DNA分子 感受态细胞 5、DNA分子杂交 用放射性同位素标记的含有目的基因的DNA片段 分子杂交技术 抗原-抗体杂交 个体生物学水平 ‎【课内探究参考答案】1 C 2 C 3 B 4 B ‎5、（1）不能 皮肤细胞中的胰岛素基因未表达（或未转录），不能形成胰岛素mRNA ‎ ‎（2）逆转录 解旋 （3）内含子 （4）15（a－b） ‎ ‎（5）同一种限制性内切酶 相同的黏性末端 DNA连接酶 （6）CaCl2 ‎ ‎ ‎ 4‎