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物质的提取、分离和鉴定专题
主讲教师：毕诗秀
【考试说明“生物知识内容表”与此专题有关的实验】
实 验
要求
（1）检测生物组织中还原糖和蛋白质
（2）叶绿体色素的提取和分离
（3）从生物材料中提取某些特定的成分
（4）蛋白质的提取和分离
（5）DNA的粗提取与鉴定
掌握程度参考本考试大纲中的：
二、考试的能力要求
2.实验与探究能力
一、物质的提取、分离和鉴定实验流程及方法
1.叶绿体色素的提取和分离
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2.DNA粗提取和鉴定实验
二、典型例题
1．以下有关生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质鉴定的实验中，叙述错误
的是
A．红色的西瓜汁是鉴定还原性糖的理想材料
B．花生子叶中脂肪的鉴定需要使用显微镜
C．用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热
D．还原糖的鉴定需热水浴才产生砖红色沉淀
2．在叶绿体色素的提取和分离实验中，收集到的滤液绿色过浅，其原因
可能是
①未加石英砂、研磨不充分 ②一次加入大量的无水酒精提取
③分次加入少量无水酒精提取 ④使用放置数天的菠菜叶
A．①②③ B．②③④ C．①③④ D．①②④
3.某研究组获得了水稻的叶黄素缺失突变体。将其叶片进行了红光照射光
吸收测定和色素层析条带分析（从上至下），与正常叶片相比，实验结果
是
A．光吸收差异显著，色素带缺第2条
B．光吸收差异不显著，色素带缺第2条
C．光吸收差异显著，色素带缺第3条
D．光吸收差异不显著，色素带缺第3条
4.中国的饮食讲究“色香味”，颜色会影响消费。某同学拟研发“绿色”
食用色素，他以生长很快的入侵植物水葫芦为材料进行如下实验。根据所
学知识和实验结果，请回答：
I.提取叶绿素
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（1）提取食用叶绿素的X应该为
，原因是
。
II.探究pH对叶绿素稳定性的影响
取一些叶绿素粗产品，配成一定浓度的溶液，于室温（约25℃）下进
行实验，方法和结果如下表。
实验组号
叶绿素溶液（mL）
调pH至
处理时间（min）
溶液颜色
①
3.0
Y
10
绿色
②
3.0
7.0
10
绿色
③
3.0
6.0
10
黄绿色
④
3.0
5.0
10
黄褐色
注：叶绿素被破坏后变成黄褐色。
（2）表中Y应该为 ，原因是________________________
____________________________________________。
（3）若用作食品色素，天然叶绿素色素不适用于 食品，否则
。
（4）该同学想了解叶绿素产品中是否含有其他色素，请你提供检测方法并写出主要步骤。
5．在利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴定”的实验中，相关叙述正确的是
A．用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14 mol/L，滤去析出物
B．调节NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分杂质
C．将丝状物溶解在2 mol/L NaCl溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色
D．用菜花替代鸡血作为实验材料，其实验操作步骤相同
6.某生物小组开展DNA粗提取的相关探究活动。具体步骤如下：
材料处理：称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份，每份l0 g。剪碎后分
成两组，一组置于20℃、另一组置于-20℃条件下保存24 h。
DNA粗提取：
第一步：将上述材料分别放入研钵中，各加入15mL研磨液，充分研磨。
用两层纱布过滤。取滤液备用。
第二步：先向6个小烧杯中分别注入10mL滤液，再加入20 mL体积分数
为95％的冷酒精溶液，然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮状物
缠绕在玻璃棒上。
第三步：取6支试管，分别加入等量的2 mol/L NaCl溶液溶解上述絮状
物。
DNA检测：在上述试管中各加入4 mL二苯胺试剂。混合均匀后，置于沸水
中加热5 min，待试管冷却后比较溶液的颜色深浅，结果如下表。
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材料保存温度
花菜
辣椒
蒜黄
20℃
+ +
+
+ + +
-20℃
+ + +
+ +
+ + + +
分析上述实验过程，回答下列问题：
⑴该探究性实验课题名称是
。
⑵第二步中”缓缓地”搅拌，这是为了减少 。
⑶根据实验结果，得出结论并分析。
①结论1：与20℃相比，相同实验材料在-20℃条件下保存，DNA的提取
量较多。
结论2：
。
②针对结论1请提出合理的解释： 。
DNA粗提取：
第一步：将上述材料分别放入研钵中，各加入15mL研磨液，充分研磨。
用两层纱布过滤。取滤液备用。
第二步：先向6个小烧杯中分别注入10mL滤液，再加入20 mL体积分数
为95％的冷酒精溶液，然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮状物
缠绕在玻璃棒上。
第三步：取6支试管，分别加入等量的2 mol/L NaCl溶液溶解上述絮状
物。
DNA检测：在上述试管中各加入4 mL二苯胺试剂。混合均匀后，置于沸水
中加热5 min，待试管冷却后比较溶液的颜色深浅，结果如下表。
⑷氯仿密度大于水，能使蛋白质变性沉淀，与水和DNA均不相溶，且对
DNA影响极小。为了进一步提高DNA纯度，依据氯仿的特性．在DNA粗提
取第三步的基础上继续操作的步骤是：
。然后用体积分数为95％
的冷酒精溶液使DNA析出。
7．某生物小组研究萝卜贮藏根组织细胞中是否存在蛋白质和DNA。他们从
查阅资料得知：①蛋白质在10%NaCl溶液中可沉淀析出；②在蛋白质溶液
中，加入双缩脲试剂，溶液呈现特有的颜色；③DNA溶于10%NaCl溶液但
在95%酒精中呈白色絮状沉淀，析出；④DNA可以被甲基绿染液染成蓝绿
色
实验材料和实验用具：略
药品及试剂：蒸馏水、10％NaCl溶液、95%酒精、甲基绿染液、双缩脲试
剂、蛋白质标准样品。
请你根据所提供的条件完善实验方案。
一、材料处理：称取50g萝卜冼净切块，加水30ml，粉碎机粉碎，将匀浆
经纱布过滤。
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二、提取：
⑴提取蛋白质：向经纱布过滤得到的滤液中加入 ，
直至 。经滤纸过滤，将
放入试管中，加入1ml蒸馏水，振荡，用于蛋白质鉴定。
⑵提取DNA：向除去 的滤液中，加入 ，
用玻棒轻轻搅拌，见有 产生，经滤纸过滤，用
镊子将 置于载玻片，用于DNA鉴定。
三、鉴定及结果：
⑴在用于蛋白质鉴定的实验试管中，加入 ，产生
色反应；同时将 和1ml蒸馏水
放入另一试管，也加相同的试剂作为对照实验。观察到___________
_________________，说明实验试管中有蛋白质存在。
⑵在用于DNA鉴定的载玻片上，滴加 ，呈现
，说明该白色絮状沉淀为DNA。
⑶通过对白萝卜贮藏根匀浆液的检测，说明有____________
的存在。
四、讨论：
⑴蛋白质在萝卜贮藏根组织细胞中所起的作用有__________
___________________________________________________。
⑵ DNA主要来自萝卜贮藏根组织细胞的______________
8.请回答下列与实验室提取芳香油有关的问题：
⑴植物芳香油的提取可采用的方法有萃取法、_____和_______。
⑵芳香油溶解性的特点是不溶于___，易溶于________，因此可用_______
__作为提取剂来提取芳香油。
⑶橘子果实含有芳香油，通常选用新鲜_______作为材料提取芳香油，原
因是_______________________________。
⑷对材料压榨后可得到糊状液体，为除去其中的固体物获得乳状液可采用
的方法是________。
⑸用水蒸汽蒸馏法提取芳香油时，在油水混合物中加入氯化钠并放置一段
时间后，芳香油将分布于液体的_____层，原因是____________________。
加入氯化钠的作用是_____________________________________。常用于
分离油层和水层的器皿是________。分离出的油层中加入无水硫酸钠的作
用是________________________________。
⑹用蒸馏法提取芳香油过程中，加热时需安装冷凝回流装置，其目的是__________________________________。
⑺当蒸馏瓶中的水和原料量一定时，蒸馏过程中，影响芳香油提取量的主
要因素有蒸馏时间和 。当原料量等其他条件一定时，
提取量随蒸馏时间的变化趋势是____________________________________
______________________________________。
⑻密封不严的瓶装玫瑰精油保存时最好存放在温度 的地方，目
的是 。
⑼某植物花中精油的相对含量随花的不同生长发育时期的变化趋势如下图
所示。提取精油时采摘花的最合适时间为 天左右。
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