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第4课时 鉴定生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
一、实验原理
1.糖类的检测
(1)还原性糖+斐林试剂砖红色沉淀
(2)淀粉+碘液―→蓝色
2.脂肪的检测
脂肪+
3.蛋白质的检测
蛋白质+双缩脲试剂―→紫色
二、实验操作
1.实验材料的选择
(1)在还原性糖的鉴定实验中,最理想的材料是含糖较高的生物组织,且颜色较浅,易于观察,如苹果、梨、白萝卜等。
(2)在脂肪的鉴定实验中,实验材料最好选择富含脂肪的种子,如核桃种子。
(3)在蛋白质的鉴定实验中,实验材料一般选用牛奶、豆浆等,但需要进行稀释。
2.实验流程图示
(1)鉴定淀粉
①配制样液:取蔗糖和淀粉各2 g,分别溶于100 mL的清水中
③观察记录:A试管内不变蓝色,B试管内变为蓝色
(2)鉴定还原性糖
①配制样液(方法同鉴定淀粉)
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③观察记录:A、B试管中无砖红色沉淀出现,C试管中出现砖红色沉淀
(3)鉴定脂肪
①制片:将要探究的植物组织,如核桃和花生的种子、洋葱根尖等,制临时装片
②染色, :用苏丹Ⅲ染液对装片进行染色,并用50%的乙
醇洗去浮色
③观察:先用低倍镜观察,再用高倍镜观察,看组织细
胞中是否有被染成橘黄色的脂肪颗粒
④结果与结论:若所观察的植物组织细胞中有橘黄色颗粒,说明该植物组织细胞中含有脂肪,否则,不含有脂肪
(4)鉴定蛋白质
制备组织样液:黄豆组织样液或鸡卵清蛋白稀释液
取样液2 mL加入试管
加入NaOH溶液2 mL:溶液不变色
加入CuSO4溶液3~4滴:溶液变紫色
实验结论:组织样液中存在蛋白质。
[名师点拨] 对鉴定类实验的几点认识
(1)注意材料中鉴定对象含量要丰富,且选择无色或颜色浅的材料,避免材料本身的颜色掩盖反应产生的物质的颜色。
(2)实验结论往往是根据特定的颜色反应来确定。
(3)掌握试剂的组成和使用方法与顺序,试剂的作用。
(4)注意分析某种试剂缺少,对实验结果产生的影响。
[思考探究]
(1)斐林试剂由何类物质构成?使用时应注意哪些问题?使用条件如何?
提示:斐林试剂由质量浓度为0.1 g/mL的NaOH溶液和质量浓度为0.05 g/mL的CuSO4溶液混合配制而成,使用时应现用现配,且需隔水加热处理。
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(2)与斐林试剂相比,双缩脲试剂有什么不同?在使用方法上有什么区别?
提示:双缩脲试剂中,CuSO4溶液的质量浓度是0.01 g/mL;在使用方法上是先滴加NaOH溶液,然后再滴加CuSO4溶液,且不需加热。
(3)选用核桃种子进行切片观察鉴定脂肪时,宜将种子浸泡,是否浸泡时间越长越好?
提示:用核桃种子进行切片观察时,需提前浸泡。浸泡时间太短,不易切片;浸泡时间太长,则组织太软,切下的薄片不易成形,切片要尽可能薄一些。
(4)在“植物细胞都含有脂肪吗”实验中,选用体积分数为50%的乙醇溶液有什么作用?
提示:洗去被染玻片标本上苏丹Ⅲ染液的浮色。
(5)上述实验中分别有哪些实验需要加热和需要显微镜?
提示:鉴定还原性糖的实验需要加热;鉴定脂肪的存在需要使用显微镜。
1.生物体内主要有机物的鉴别实验中,按编号顺序对应下列各项中的内容,正确的是( )
待测物
试剂
颜色
反应条件
蛋白质
双缩脲试剂
③
-
脂肪
②
橘黄色
-
①
斐林试剂
砖红色
隔水加热
A.蔗糖、苏丹Ⅲ染液、紫色
B.蔗糖、苏丹Ⅲ染液、红色
C.还原性糖、苏丹Ⅲ染液、紫色
D.果糖、苏丹Ⅳ染液、红色
解析:选C 蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应;脂肪被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色;还原性糖与斐林试剂发生作用,在隔水加热的条件下,生成砖红色沉淀,果糖为还原性糖,蔗糖为非还原性糖。
2.关于生物组织中还原性糖的鉴定,下列叙述正确的( )
A.量取斐林试剂时应优先加甲液再加入乙液
B.隔水加热时,试管中液体的液面应低于烧杯中水的液面
C.实验结束时将剩余的斐林试剂装入棕色瓶,以便长期保存备用
D.在组织样液中加入斐林试剂后试管内液体呈现无色,加热后变成砖红色
解析:选B 鉴定还原性糖时,斐林试剂的甲液和乙液应该等量混合均匀后再使用;隔水加热时,为了均匀加热,试管中的液面应该低于烧杯中水的液面;斐林试剂应该现配现用,不能长期保存;组织液中加入斐林试剂后,试管中液体呈现蓝色,加热后变为砖红色。
3.下面各组分别表示鉴定材料、所用试剂和产生的反应现象,其中错误的一项是( )
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A.苹果、斐林试剂、砖红色
B.马铃薯、苏丹Ⅲ染液、橘黄色
C.豆浆、双缩脲试剂、紫色
D.花生种子、苏丹Ⅳ染液、红色
解析:选B 马铃薯中主要含有淀粉,应该用碘液检测,呈蓝色。
4.在生物组织还原性糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中,对实验材料的选择,下列叙述错误的是( )
A.红瓤西瓜中含有大量糖分,可以用于还原性糖的鉴定
B.核桃种子含脂肪多且易获取,是用于脂肪鉴定的理想材料
C.大豆种子蛋白质含量高,是进行蛋白质鉴定的理想植物组织材料
D.鸡蛋清含蛋白质多,是进行蛋白质鉴定的动物材料
解析:选A 红瓤西瓜的红色对颜色反应的观察有遮盖作用,不能作为实验材料。
5.生物组织中还原性糖、脂肪和蛋白质三种有机物的鉴定实验中,以下操作错误的是( )
A.用双缩脲试剂检测蛋白质需要加热
B.可溶性还原性糖的鉴定,不可用酒精灯直接加热产生砖红色沉淀
C.只有脂肪的鉴定需要使用显微镜
D.使用斐林试剂最好现用现配
解析:选A 蛋白质的鉴定不需要加热。
6.在用双缩脲试剂鉴定蛋白质实验时,正确的操作是( )
A.向2 mL蛋白稀释液中先加0.1 g/mL的NaOH溶液,振荡均匀后,再加入3~4滴0.05 g/mL的CuSO4溶液
B.向2 mL蛋白稀释液中先加0.1 g/mL的NaOH溶液,振荡均匀后,再加入3~4滴0.01 g/mL的CuSO4溶液
C.向2 mL蛋白稀释液中先加0.01 g/mL的CuSO4溶液,振荡均匀后,再加入3~4滴0.1 g/mL的NaOH溶液
D.向2 mL蛋白稀释液中同时加0.1 g/mL的NaOH溶液和0.05 g/mL的CuSO4溶液
解析:选B 使用双缩脲试剂时,先要加入质量浓度为0.1 g/mL的NaOH溶液,混匀后再加入质量浓度为0.01 g/mL的CuSO4溶液。
7.下列关于检测“生物组织中糖类、脂肪、蛋白质”实验操作步骤的叙述,正确的是( )
A.用于鉴定还原性糖的斐林试剂甲液和乙液,可直接用于蛋白质的鉴定
B.若要鉴定花生种子细胞中是否含有脂肪,用肉眼即可观察
C.鉴定还原性糖时,斐林试剂的甲液和乙液应等量混合后均匀再加入
D.用于双缩脲试剂鉴定蛋白质时,需隔水加热2 min才能看到紫色
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解析:选C 斐林试剂的成分虽然和双缩脲试剂相同,但是浓度、用法、用量都不同,不能直接用于蛋白质的鉴定;检测花生种子细胞中是否含脂肪,染色后需用显微镜观察;鉴定还原性糖时,斐林试剂的甲液和乙液应等量混合均匀后再加入;用双缩脲试剂鉴定蛋白质,不需要隔水加热。
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